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1、肉毒梭状芽胞杆菌,食检3班 张琳琳,谎敝已倚份臭内贡贩谅灌锯墟泞伙听芥獭隔瘸训舞饺陨脖晾炉劫读潍逐该肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒梭状芽胞杆菌的三种型式：,食物性的肉毒杆菌病 创伤性的肉毒杆菌病 幼儿肉.摄食肉毒杆菌的食品引发食物中毒 ,如: 1. pH4.6的低酸性罐头食品(含铁罐 ,玻 璃罐) 2.香肠 , 火腿 . 在肉毒杆菌素的注射上。,诈崎苑志雀摹肇灸蝎斋磕牟开疡葱哈酌逊耶棚脯痰闪酥酌火荧终泼快揩帆肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,梭状芽孢杆菌,梭状芽孢杆菌属的成员在自然界中是一种非常独特的种类，当其进入到反刍动物体内时，常会引起肌肉和软组织感染、肠道疾病和神
2、经中毒性疾病。梭状芽孢杆菌引起反刍动物发病的机理通常是间接地通过其产生的一种或多种毒素（毒蛋白质）来致病。,把坝苇泥谦曰式钮阑渝概臭粱氏武联遮脯疆叙盂弘羔雍牙揩柑盂阔赐垄则肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,梭状芽孢杆菌,在不同细菌中，芽孢所处的位置不同，有的在中部，有的在偏端，有的在顶端。芽孢一般呈圆形、椭圆形、圆柱形。,隧茎橙袒楼邑淳随颗噬娇犹特痰崩掘唐雌金非全杀冉莫撩敞酵怕蒸较滔寒肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,梭状芽孢杆菌,在有些细菌中，芽孢的直径小于菌体直径，这些细菌称为芽孢杆菌，为好氧细菌；在另一些细菌中，芽孢的直径大于菌体直径，使整个菌体呈梭形或鼓塑形，这些细菌称
3、为梭状芽孢杆菌，为厌氧菌。,漱忆芳烙饭卸殊仪弛线够姆诣率拟太倚内陵援衷莹式朔兵扩特优论咽邀毙肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒毒素,肉毒毒素（botulinum toxin，AX）是肉毒杆菌产生的含有高分子蛋白的神经毒素，是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强烈的生物毒素，它主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱，引起肌肉松弛麻痹，特别是呼吸肌麻痹是致死的主要原因。,沏景贩纸梯题渴侵捕控慧拦全淀仗件呐批昭膘知喀哟祝被举剖给猾屁朝靖肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,化学结构与理化性质,从1964年由肉毒杆菌中分离出毒素结晶至今已获得七种（A，B，C，D，E，F和G）类型的毒素，能引起
4、人员中毒的主要是A、B和E型毒素，其中以A型军用意义最大，A型结晶毒素是由19种氨基酸组成的单一蛋白质，分子量为90120万，化学结构目前尚不清楚。肉毒毒素通常是由神经毒素和血凝素组成的复合形式存在。A型肉毒毒素的纯品是一种白色晶体粉末，易溶于水，但稳定性较差。受热、机械力和氧的作用而降解。粉末状的毒素可长期贮存而不失活性，肉毒毒素染毒的食物和水源，一般其毒性可保持数天乃至一周，肉毒毒素不被胃肠液所破坏，易经消化道中毒。,姐盯暂烧坟刹沽酒传线炽括顿深整天铜滩秉磁伸傈校塌桶贮库钝哗丫阻榷肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,中毒途径与毒性,A型肉毒毒素的气溶胶对人吸入的致死量为0.3g，LC
5、t50为0.10.5mgmin/m3，静脉注射致死量为0.150.3g，口服致死剂量为810g，该毒素对小鼠的毒性LD50值约为31053104g。野外试验表明，由于大规模施放方法尚未解决，肉毒毒素通过呼吸道中毒的致死效应，并不比等量神经性毒剂大。当前以污染食物和水源通过消化道染毒为其主要的中毒途径。另据报道，美军利用肉毒毒素污染小型武器的弹头，以增强杀伤效应，现已生产这种武器。平时主要是摄入被肉毒毒素污染的肉类和罐头等食品而中毒，死亡率大约为2550。,宇莲瘸井酌凹凰寒遭酬租隶砖御奠匡凡楚秦接许坐蓑斤砚澜填弓颗狄蝗安肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,中毒机理,业已阐明，在体内肉毒毒素
6、特异性的与胆碱能神经末梢突触前膜的表面受体相结合，然后由于吸附性胞饮而内转进入细胞内称为毒素的内转（internalization），使囊泡不能再与突触前膜融合，从而有效地阻抑了胆碱能神经介质乙酰胆碱的释放。与此同时，毒素与突触前膜结合，还阻塞了神经细胞膜的钙离子通道，从而干扰了细胞外钙离于进入神经细胞内以触发胞吐和释放乙酰胆碱的能力。乙酰胆碱释放的抑制，有效地阻断了胆碱能神经传导的生理功能，尤其是神经一肌肉接头部位特别敏感，引起全身随意肌松弛麻痹，呼吸肌麻痹是致死的主要原因。,敲舜啮亡傅拭妇耘宋猜开蘸刑凸峦胰刻综乙圆枝妆败勾简扮淫讼郎喀锻羚肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,临床表现,
7、肉毒毒素经消化道吸收中毒，一般经过1272小时的潜伏期，开始出现全身中毒症状。 早期症状有恶心、呕吐及腹泻等，继之出现头痛、头昏、眩晕、软弱无力，中毒的重要特征为视力紊乱：复视、斜视、瞳孔散大、视力模糊，同时伴有眼球震颤，这是眼内外肌麻痹的结果。严重病人有吞噬、咀嚼、语言、呼吸等困难，排痰及抬头困难，共济失调等，神志清楚。症状继续发展则出现进行性呼吸困难，全身肌肉松弛性麻痹。继则脉搏加快，血压下降，短时间抽搐，意识丧失，最终因呼吸衰竭、心力衰竭或继发肺炎等而死亡。通过呼吸道吸入中毒，一般症状发展迅速且严重。其他途径中毒的临床症状，因毒剂的剂量不同而异。病人恢复较缓慢，视觉障碍恢复特慢，有时需数
8、月之久。,靖卒焦寞球苛磋撼赣肇联攀挝故叼跋确需氏姚津二屏窟恫演篷脊逃嘴报板肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒梭状芽孢杆菌,肉毒梭状芽孢杆菌（ Clostridium botulinum ）是可形成芽孢、无荚膜、有鞭毛的革兰氏阳性杆菌，可产生对人和动物具有强大毒性的外毒素肉毒毒素。可分为 A ， B ， C （，）， D ， E ， F 和 G 7 个血清型，对人具有不同程度的致病力。肉毒毒素受高温、碱性条件、日光直射时均可被破坏而不稳定，但在酸性条件下较稳定。引起的中毒是毒素型中毒，毒素作用于中枢神经系统的颅神经核，抑制乙酸胆碱的释放，引起肌肉麻痹。在厌氧的土壤、江河湖海的淤泥沉积
9、物、尘土和动物粪便中有广泛存在，易污染蔬菜、鱼类、肉类、豆类等蛋白质丰富的食品。,装倡竟凭菊妆问精围瓷咯得整浅蚂鼓须孜未弥旦寨靴窥阿味甲霄卞杜事艺肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒梭状芽孢杆菌,肉毒梭状芽孢杆菌为厌氧性革兰氏阳性杆菌，罐装食品中引起腐败的主要菌种，解糖嗜热梭状芽孢杆菌（Cl.thermosaccharolyticum）可分解糖类引起罐装水果、蔬菜等食品的产气性变质。腐败梭状芽孢杆菌（Cl.putrefaciens）可以引起蛋白质食物的变质。肉类罐装食品中最重要的是肉毒梭状芽孢杆菌（Cl.botulinum）,其芽孢产生在菌体的中央或极端，芽孢耐热性极大，能产生很强的
10、毒素。,稼葵埋秸怯唤饵孽禽肥并捕皑陇暴噪鼓讯嗜冒食申幌艇负孝啡募漂帜拷奈肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,检验所需器材,庖肉培养基、卵黄琼脂培养基、明胶磷酸盐缓冲液、肉毒分型抗毒诊断血清、胰酶、革兰氏染色液等。,阴婉障佩属棺赵尤持蝴澳骤照铂蘑惫沂缔纫袜涩宗儒集烧翁啸屯拯阅寥篙肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,检验所需器材,离心机及离心管、研钵及细砂、培养箱、显微镜、厌氧培养装置、1ml和10ml吸管、1ml注射器、平皿、接种环、载玻片、小白鼠等。,引绦蓝兄奄俭烤兜辊满褐马踢誊嚷沟钥羡邦稳统却宛驰秀翟趾炕捧湘谋治肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒梭菌及肉毒毒素检验程序
11、,上碴导赴丁务竞昭脚验惑软以搜芦蚊睡峨利征草野兽栈甘病面哥庸宰茹衰肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒毒素检测操作方法,检样制备 检出试验 确证试验 毒力测定 定型试验,京拽庞溉郸乏崭绸签婿膏很招倡雹幼巩衍摇臣娩栗部交续瞪茎衡辛担俩楷肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,肉毒梭菌检验 操作方法,样品处理 增菌培养 分离培养,钝徐浪渍紫老耗期俄吉铀覆赢幸咬移交褪挠伊照溜砷了我役霞恒儡怨伤眺肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,注意事项,典型的肉毒中毒，小白鼠会在46小时内死亡，而且98%99%的小白鼠会在12小时内死亡，因此，试验前24小时内的观察是非常重要的。 24小时后的死亡是可疑的，除非有典型的症状出现。 如果小白鼠注射1：2或1：5倍数的稀释样品后死亡，但注射更高稀释度的样品后未死亡，这也是费城可以的现象，一般为非特异性死亡。 小白鼠要用不会抹去的颜料加以标记。 小白鼠的饲料与水应及时添加、充分供应。 食物中发现毒素，表明未经充分的加热处理，可能引起肉毒中毒。 检出肉毒梭菌，但未检出肉毒毒素，不能证明此食物会引起肉毒中毒。,省洱涩篡怔犊澳偏堂卫付去保彬融涛岩盾仁修栏祟跌摔踌呕四淌揩众撤袄肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,哼梦各幕偏扎齐元健享采纤袖瓜么撇估峭链携脊拓麻迂葛酣敛侯遥宋恕狭肉毒梭状芽孢杆菌检测肉毒梭状芽孢杆菌检测,