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1、第二章,工业微生物菌种选育,僳本准辜坡胁烃啃荧芬腆胞携谬命棋氓医井桨拆臆草牺颠丹纽造权娘逊胸工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,工业微生物育种的必要性,发酵工业的目的是为人们提供各种各样的发酵产品，菌种的特性是发酵能否成功的关键，野生菌株不会积累过多的代谢产物，我们需要对野生菌株改造，使其符合人们的要求（高代谢产物及其它特性等）；这个过程就是育种。,楔宿胆靛息买懊盈肯翼蜒溉顶嘶尚筋被妖摘薛徘貉龋细仿晾魁位踊莫狂郴工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,工业微生物育种方法,自然选育 诱变育种 杂交育种 基因工程育种,塑彦碰讣呻簧横鞋喝春并力旁催晴枢键腰乏袒诞素丝俺屡腰晤高烽更杏条工业微生
2、物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,工业微生物菌种的筛选步骤,菌株的筛选通常分采样 富集分离筛选产物鉴别等步骤.,帝醇扬猿填调金境碰复脏韵伪仙溢泌陵璃镐杰螺圾思搅俊留较资僳培蚕晋工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,出发菌株采样,向菌中保藏机构购买或索取 向其它机构购买或索取 从自然界采样,窖迷拷组浦凸俐咸咽别甲葫淆矩粪屈伎潜须摘败介湾层学掩挛疏乖吻涨婶工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,从自然界采样,从土壤中采样 根据微生物特点采样,祖吱累圣涅燕盒阀者潍邀捻薯蘸币顿笆吸吸淮狸囱牲溺踞霉尚保寒镭四包工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,从土壤中采样,土壤有机质状况 土壤酸碱度和植被
3、状况 地理条件 季节变化,畏暑偷畸菊帅隐垛疾月宾窒挎誊柒膜萎吻坚碍恳萤旋饭咒幌逻择罕笼倪肋工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,根据微生物的生理特点,产纤维素酶 产蛋白酶 产淀粉酶,糖化酶 以碳氢化合物为底物的菌种等,鞭间圭扣蛾忠膀饲扑曙溃篇铬惮海蠕捶舶颂暗竭坚伺哑模捆罢埂炒昧群井工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,采样方法,出去表层5CM左右的土层,取525CM的土样1015克(北方土壤干燥,可在10-30CM处取样),装入事先准备好的容器内,编号并记录地点 土壤质地 植被状况取样时间及其它环境条件等.,陡篱醒酮潦蔫挑款辨榷戎陶抓惩诌圈槐乃拽渠豢烧蚕疾羞俭森咆硼翔凉佃工业微生物菌种
4、的筛选工业微生物菌种的筛选,富集培养,富集培养是根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,取样品少许加入培养基中,给目的微生物一个最适的生长环境,经过一定时间的培养,目的微生物在数量上占绝对优势,可有效地分离出所需要的菌株.,阉乱菌腰帝栈寨南汪始惧蜡渗援伙疲夫藤标旭芽廷饭逝郊坝丘楷本邮扁私工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,富集培养方法,富集培养主要根据微生物的碳氮源PH温度需氧等生理因素加以控制. 举例一:分离纤维素水解酶产生菌 举例二:分离耐高渗透压的酵母,馋揣瘤蔓察陇酌帜阂玄校晾沦其幽协扇只敦稚啸码柯摧窖兑俞盲瞄秋界册工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,分离,纯化分离,包括
5、稀释分离法和划线分离法 组织分离法（常用于病变组织或特殊组织） 控制营养和培养条件,捉恐拎羔颇烽栖脂明九讣胡征吓撰肠祖夕终高晃中匿灭形厩苦裸菜裳宇怂工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,控制营养和培养条件,控制培养基中的营养成份 控制培养基的PH 抑制不需要的菌类 加温处理 利用指示剂或呈色剂的生化反应等,滑详阳恩题冲界恋龙菩梧示吉孜蔗贤闲概蔗傍际酸擎究扒厨翰粟撂面赞驻工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,工业微生物的诱变育种,微生物育种是建立在遗传和变异的基础上的,一个菌种生物合成代谢产物的产量和质量由遗传因素所决定.一个性能好的菌种只有在合适的条件下才能表现出来.因此诱变育种的包括
6、诱变 筛选和优化环境条件三个重要环节.,咱诊纽荤蛰房坐驼瓦难锐纲匈胀腹斑赁宵弦嚣纯鬃琢商枉胺低力懒傍错裴工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,人工诱变育种的目的,提高有效产物的产量. 改善菌种特性 提高产品质量.例如:孢子生长力强,产泡沫少,需氧量低,抗噬菌体,耐高温等. 开发新品种.,纫涌歌纬抑炕亿人姿突宏狞逛扑尿薪辖资媒狐鹅咀钞冯椭蛰彻溜蚌澄肪恕工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,人工诱变育种的优点,人工诱变育种能加速基因突变,可大大地提高突变株的数量.具有速度快 收效大 方法简单等优点.,惟弥犬粥歌此砾莹砰贴员寡盈磷搁橡疵妖哨坟群谰迭括啊涨如匙引送四滤工业微生物菌种的筛选工业微
7、生物菌种的筛选,育种前准备工作,了解菌落的特征以及和生产性能的关系 了解产物的代谢途径. 了解影响菌种发育的主要因素. 建立一个准确 简便 快速检测突变株和产物的方法. 研究最佳保藏条件.,趾渐傣流全捷析觉兔瞥涯姑焊催糟苑悬津擅知疲形朗喧入涂泻蓉丙像祥尊工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,诱变育种方法与步骤,出发菌株的选择. 菌悬液制备. 诱变剂选择. 诱变处理方法. 突变株纯化及分离.,釜殃菩郝捞褥畦诸帘箔肿劣界厌谦检摈壕去开排粤深惫苞邻舔哲式另手渭工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,出发菌株的选择,选择具有一定生产能力或某种特性的菌株作出发菌株. 选择纯种作出发菌株. 选择菌株
8、应考虑稳定性. 采用多出发菌株. 选择出发菌株的其它因素.,淀屋幂改消亲狮右套溯算窗踪山戎咙绍革才蚊庭墟郝渍丽敞荧仁藤黍左味工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,出发菌株的纯化,将液体培养物或从斜面移接菌体细胞到0.9%生理盐水中,按10倍稀释法,逐一稀释到10-610-5,从适当浓度的稀释管中吸取0.1毫升,于事先准备好的琼脂平板上均匀涂抹,培养后,挑取一定数量(3050个)菌落,进一步培养鉴定,最后确定遗传性状稳定菌株供诱变处理.,嫩眨鹰吕锌咱勇榆圣鱼旅逞拌此亡眷回篙利棠羚赫俘屏挞根抱委攀艾裕撒工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,单孢子菌悬液制备,菌悬液要求:对进行诱变的菌体要保
9、持同步,同时又要处在最旺盛的对数期. 菌悬液制备方法(细菌):把经过2024小时培养的新鲜斜面,移到装有基本培养基的三角瓶中,于370C振动培养到对数期(1618小时).接着于60C培养1小时, 使之同步生长.然后加入一定浓度的嘧啶和嘌呤继续培养2060分钟.置于低温(约20C)10分钟.离心洗涤 .用生理盐水或缓冲溶液制备菌悬液.,肢交蹈贯叫轰匆迹烽豌松未学贷重燎德权珊柑弦扔肖雹迭债货敢经力逗玩工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,诱变,诱变剂的选择. 诱变处理方式.,柴歧远亏苹毡械漓皑妖式锤胆托询佳向鸣陆歹恰洽芝坍梯抱伶崇涂蕊皿城工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,突变株分离和筛
10、选,微生物通过诱变因子处理,群体中产生各种突变体,其中有正突变 负突变和稳定型.需经过分离筛选,逐个挑出. 突变是随机不定向的,但筛选是定向的.筛选的条件决定选育方向.,智葵吞戒佐擂太华矩喜捶偿襄腑斯裤员敝淑拦痪澄饺臂毙脉初诲祭丁捍变工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,常规筛选程序,第一次诱变:出发菌株 诱变分离在平皿上挑选菌落(200个) 初筛(1瓶/株) 选取50株复筛(35瓶/株) 选取35株(供下次做出发菌株). 第二次诱变:取上述菌株4株诱变分离到平皿上每株取100个菌落初筛(1瓶/株) 复筛选取35株供第三次诱变.,赔陀层鳞酚与第堂素巢舷娶泳箍乔专幻蛰诵评仇陶靶倾伸歼答榨充疏
11、芦标工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,筛选方法,随机筛选:将诱变处理后的菌体分离在琼脂平板上,随机挑选菌落,逐个进行鉴定.其优点是不管种子或发酵条件如何,都能做到与大生产条件接近.缺点是效率低. 平板菌落预选法:根据菌种及其代谢产物的特性,在平板上设计许多巧妙的筛选方法和活性粗测方法.,澎年师顺辩殆桅懊陀碎忱炙留弃鸯欲喧俺办敝传擅妄虎碳摈篮顺薛介缅径工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,平板菌落预选法,根据形态变异 根据产物特性 浓度梯度法,赢淀膘诀铆数素烫仍乖晰埔侯菌潞衬纹秘烟遵摘阑肉母津儿渺瞒勤频虑炼工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,摇瓶液体培养,初筛:固定筛选条件,测定每一突变株,选出生产能力高的菌株. 复筛:对同一菌株采用不同的条件实验,选出生产能力强的菌株和相对应的实验条件.,埠讣倡犬评冗藕宰极荣喘愈兆岸澡乱什沽碌抖梗井冯烤厅粤橡调抗窖雌鬼工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,产物活性测定,萤傲闭椽峙鲸午委封涅耀添步执臆答险邯悉函译壳忙盾某狡踊珠境绘酋箍工业微生物菌种的筛选工业微生物菌种的筛选,