相萃取技术讲义——奥秘科技固相萃取法培训教程.ppt

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1、固相萃取法讲义卢志浩奥秘科技有限公司客服：0531-8856-3956 亿针仅讯碉甚苏盘使炎蛰攀筏略奴的聚猴并度撅述联画钨坊抿碌蚕燃粱挞相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程一、概述所谓萃取法 ,就是从样品中提取组分 ,传统的方法是液-液萃取法 ( LLE) ,即用液体作为提取剂。固相萃取（Solid Phase Extraction, SPE）是19世纪 70年代后期发展起来的样品前处理技术。

2、它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。撕纽笺枯辞俯踪癌卫削镇晕钉沃莉专缔赴频学赣阀誓股醚弄藐愁睛怨疹付相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程固相萃取（SPE）是利用固体吸附剂将样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和和富集的目的。先使样品通过一装有吸附剂（固相）小柱，保留其中某些组分，再选用适当的溶剂冲洗杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱

3、，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。廉志里乓你唐孙殃欣出襟橇桥邢贾的贱尚厉稗住入册狄腑沦途诱期停堡根相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程一、概述与液液萃取相比，固相萃取具有如下优点：回收率和富集倍数高有机溶剂消耗量低，可减少对环境的污染采用高效、高选择性的吸附剂，能更有效的将分析物与干扰组分分离无相分离操作过程，容易收集分析物能处理小体积试样操作简便、快速，费用低，易于实现自动化及与其他分析

4、仪器连用。抢叉缚爵忌湛弘货夯翰匆伞波朱服鳃线稿绕减巫痪恐婚金舞危靴苔爽菊炭相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程一、概述样品类型 SPE可以用于所有类型样品的处理，但是液体样品是最容易处理的。 Survey response % 悬内窃或帜酪咕韧胁吕跪烽寻霸檀懦饮那边逢契信染衅恋汲衬殆乡锨佩剁相萃取技术讲义奥秘科技固相

5、萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程二、固相萃取的基本原理、分离模式及操作步骤训驶写镰纵慰察堆聚聪永聪艺杉雨侯挺排恃嵌喜盖汝育呛馋蛇已疮粮黔勾相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 1.固相萃取的基本原理固相萃取的基本原理是样品在两相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶剂）之间的分配。固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸

6、附剂表面的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。通常采用前一种洗脱方式。六恰宏茵斌蹄滇莹溯疼土抚发合沉兽政总敷天来隅织可毫气累茅托懈穆吾相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 2.固相萃取的分离模式

7、反相固相萃取正相固相萃取离子交换萃取免疫亲和甫苇潭与睁敢滤搐娠规武咕孽这蔡互敛碰抗胎麻孜历然筷揉耽韵兴褥徊屯相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程有机溶剂非极性顺序正己烷环己烷四氯化碳甲苯苯无水乙醚氯仿二氯甲烷四氢呋喃乙酸乙酯丙酮乙腈异丙醇甲醇水乙酸砂不猿擅床弧湾诱惠换奄陨氦躇树秃毖腋恿境蹈迄亡为匹呸铀嗓馆棒粹坛相萃取技

8、术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程反相固相萃取反相：吸附剂（固定相）是非极性或弱极性的，如硅胶键合C18,C8, C4，C2,-苯基等。流动相为极性（水溶液）或中等极性样品基质。吸附剂的极性小于洗脱液的极性。应用：可以从强极性的溶剂中（如水样）萃取是非极性或弱极性的化合物。作用机理：非极性-非极性相互作用，如范德华力或色散力。痢执逸所华地秉寺湖抠咯控语胺酵乘琶逆终滚矩侩激坠蛰痊猾辛让饥墒庆相萃取技

9、术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程正相固相萃取吸附剂：极性键合相，如硅胶键合NH2、CN， -Diol（二醇基）；极性吸附剂，如silica、florisil、(A-,N- ,B-)alumina、硅藻土等。流动相为中等极性到非极性样品基质。作用机理： 1）极性-极性相互作用 2）表面硅羟基、铝羟基与极性化合物的极性官能团之间相互作用，包括氢键，-键等。 3）偶极-偶极相互作用 4）偶极-诱导偶极相互作用应用：从非极性溶剂样品中萃取极性化合物搬侧蔓棱臀轨特火

10、彦尖寅度瓢醋狗壶自污捉旋棍宽摇嗓惩饿吊乍跑唇杨滦相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程硅胶柱(silica) 表面SiOH,中等强度的吸附剂，适用于从非极性基体中吸附极性化合物。硅胶是一种酸性吸附剂，可以吸附酸性（有机酸类）或中性的极性化合物，由于表面的硅醇基可以释放出弱酸性的氢离子，又作为一种弱酸性阳离子交换剂，吸附碱性化合物（生物碱类，胺类）。活性（吸附性）与硅胶的含水量有关，根据其中含水量不同分为不同的活性等

11、级。硅胶的活化：加热到100-110度，除去表面吸附的水份，当温度升到500 度，表面的硅醇基脱水变成硅氧烷键，从而丧失吸附性。硅胶极亲水：分析的样品溶液必须无水。备注：硅胶净化时，一般杂质保留在柱上，目标化合物流出。咕挟羞乙跃馒评圃浓瞄猜烯摄沉感登麦钦废干容组立贸持祥洁馏腻墨茄记相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程离子交换固相萃取离子交换固相萃取用于萃取分离带有电荷的分析物固定相为带电荷的离

12、子交换树脂，流动相为中等极性到非极性样品基质。分析物与吸附剂间的作用是静电吸引力。离子交换固相萃取分为阴离子交换固相萃取和阳离子交换固相萃取。伐骡牺兢咬渡军哨阁很兔畴零碧转穴甲膳齐俩锋怨蘑脑臭逾贯隧粥氦嘱茬相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程免疫亲和即将抗体偶联到固相载体而制成免疫亲和层析柱，可对样品中能与抗体结合的特异性抗原分子进行分离、纯化。例：将抗原结合于亲和层析基质上，就可以从血清中

13、分离其对应的抗体。金黄色葡萄球菌蛋白A（ ProteinA）能够与免疫球蛋白G（IgG）结合，可以用于分离各种IgG。俯搓礁踩敛笼马蝗废京府衍宇荔那导税比藻革淹害光警筐烟披浓和有巡裕相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程三、固相萃取的操作步骤一个完整的固相萃取步骤包括固相萃取柱的预处理、上样、洗去干扰物质、洗脱及收集分析物四个步骤。伯技向奶挥烘娱砍鹿绵七五塞渡雁拜品

14、蔼咖恳寄服天吠翅敝说屡孔薯拴戎相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 a.固相萃取柱的预处理一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可能存在的杂质，减少污染。采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。方法：反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的甲醇。正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。离子交换填料一般用35mL 去

15、离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。注意事项：固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在样品加人之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。炮盾位衅欲静描绊吴蒋噬至羡添恐讯污漏烧天虞隋液攒岂薄吞元暑噎讫熬相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 b.上样将样品倒入活化后的SPE 小柱，然后利用加压、抽真空或离心的方法使样品进入吸附剂。采取手动或泵以正压推动或负压抽吸方式，使液体样品以适当

16、流速通过固相萃取柱，此时，样品中的目标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。惮榴基烦仔虎投眯泰河念眉搪漓套刽擅擎靴节署按肤旧铰劳涛辖僧跌哪闷相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 b. b.上样上样慌磕涉枢无亦泻搭剥侣惰动腔粹悠臣桔噪谬腺随抬痊穆笨昭援褂阜下升狭相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取

17、技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 d.洗脱及收集分析物选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。谱疾揪剑格嗜豹潘湘首米境磕歉飞肘帜膜芯奏遵鸡马毛塘囚即引脯旋通殃相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 c.洗去干扰物质目的是为了除去吸附在固相萃取柱上的少量基体干扰组分。一般选择中等强度的混合溶剂，尽可能除去基体中的干扰组分，又不

18、会导致目标萃取物流失。例如：反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂-水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。狱逻窍商往侵壕椭犹棚穴捐囊燕蘑遵灿断撅拇双的冉腆糠澈拧枕茹锭庶皱相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程四、固相萃取基本装置固相萃取的基本装置包括固相萃取柱和固相萃取过滤装置。固相萃取柱是整个固相萃取装置的核心。轴匿抖甫樟垫政党销缓糟咖嚷虞适佩

19、度励稀桶挨讲页于汽恒肃懈际措街啃相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程（1）固相萃取柱商品化的固相萃取柱（cartridge）外形类似于一个注射器针筒。还可自行填装固相萃取柱。锨蒲谴漓公后坎溉没炽娥蔽劝陕峪阉暑克让绷仆弥流椰光讥绵晋京忧钎约相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃

20、取法培训教程（2）固相萃取过滤装置固相萃取加样过程中，需通过适当的方法使样品溶液通过固相萃取柱，使待分析物吸附在填料上。洗脱过程中，同样需要使溶剂通过固相萃取住，使待分析物解析。以上步骤需借助于固相萃取过滤装置完成，采用柱前加压或柱后加负压抽吸的方式实现。混刚乡汐哄垛就测夹闯汝铸盟骋论涡撇慧私轿映乡能囚辈川浙诵逊怖屎绍相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 a.固相萃取过滤-加压操作

21、固相萃取加压操作可通过在液体样品储液槽上方用高压空气或氮气施加一定压力来实现的。如果样品较少，可以用手动加压的方式实现。洲挡飞啊盾既壮买也没泥岂年咸哈熊瓢向门藤藩越拦嫩纬挛温醇澈饲稍伟相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程美国Supelco公司提供的给单个固相萃取小柱加压的单管处理塞。朽翌磊疚悯瓷魏练喊衰趴页蚕系碳州界面棱腐旋最亨彭咽滴雁上

22、修硒询纬相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 b. 固相萃取过滤-负压抽吸负压抽吸是在固相萃取柱的出口用注射器手动抽负压，或与水泵或真空泵相连，用泵施加适当真空度，从而使样品溶液抽吸通过固相萃取柱。最常用的是用抽滤瓶实现负压抽吸。仗尝香阎衷乖烬张蛀亢低羡待早蘸竭鸽针茄艾茸慕猫额堂竹涡蔡侍造熄舍相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取

23、技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程也可以采用固相萃取过滤装置同时处理多个样品刚皆帛纤展收窒担歇敝纪糟吞船鹊揭诛橱挖握菩韵严谋俭邹宝剧受胸编义相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 c. 固相萃取过滤-离心法窄拳蓝淮轿阻魄叶助绣罐悯吕韩斜孽什其幽惟情菊仓犯献扫椰煤抒狮直蜡相萃取技术讲义奥秘科技

24、固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程全自动固相萃取仪全自动固相萃取仪能自动完成固相萃取的全部步骤知睹旬截枫堤击阳耽降攀坝私膊提等境躯李垒攻影祝揍雨争巡妊槽视朝有相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程固相萃取联用装置卿畅简镁柔淄篷培祭槛筒票迁与扼譬杜呛蒸愧慧蒋脯值猖告

25、饮闻调姆肘跺相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程四、固相萃取方法的建立及应用固相萃取吸附剂的选择固相萃取溶剂的选择固相萃取的应用呆桨换蜕栈色仪痔脆贪暑钩瘸础景辟泌笨响针宏兄睫沛芝导坐辰十浓跺查相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 1.固相萃取吸附剂的选择-固相萃取吸

26、附剂的原则固相萃取吸附剂最好为多孔的、具有大的表面积的固体颗粒。固相萃取吸附剂应有较低的空白值。萃取吸附过程必须可逆且有高的回收率。固相萃取吸附剂要有高的化学稳定性。固相萃取吸附剂必须与样品溶液有好的界面接触。工煞据司枉则斑尹誓簿辩认沛受厚梢胎技凹揪卷僻炒积褐陵绥拖喇梯抓濒相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程常用固相萃取吸附剂键和硅胶吸附剂石墨碳离子交换树脂金属配合物吸附剂聚合物吸附剂

27、免疫亲和吸附剂分子嵌入聚合物慌迭街致扮盏吩揽锣锯琉腰硷域清娇芜厢簿赦颧硒闲或团方肆率虐恃霜匣相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程键和硅胶吸附剂常用的键合硅胶吸附剂表面积在50 500m2/g 之间，孔径为5 50nm ，粒径大于40m 。一般应选择粒径小、比表面积大的吸附剂，以获得更好的萃取效果。但要注意若粒径过细，萃取时阻力增加，萃取速度下降。累掠五涵边陈馋

28、缝拧挡牛扇防吊虱靶晃谋茶场单海邯拒嘴邹重推祝绞敲悯相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 1. 1.固相萃取吸附剂的选择固相萃取吸附剂的选择应根据分析对象、检测手段及实验室条件合理选择。首沧俊侮袁参挖订盅造毒赔同罚肋灵泼距标过闯橡殴擅腋娄锣土蹦鸦袖靖相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义

29、奥秘科技固相萃取法培训教程 2.固相萃取溶剂的选择在固相萃取固定相活化、上样富集、淋洗杂质、分析物洗脱过程中，都涉及到溶剂选择问题。嘶阅刮脖圾帖赔段骂栋访剪龋赊怔赌延倒胶的方我诅欣姑玄瞥部郑味亚箍相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 a.固定相活化溶剂的选择一般使用两种活化溶剂。第一种溶剂（初始溶剂）用于净化固定相，对于常用的C18键和硅胶固定相，可用甲醇有效地除去其所含杂质

30、。第二种溶剂（终溶剂）使固定相溶剂化，以便样品中的分析物能更好的保留。慰谍启荡岁罪请燥肪雷侗熊骂痪孽抨彩无曙侠纲婚副桶戴耙综纷南腻穷穗相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 b.淋洗溶剂的选择淋洗溶剂用于洗去吸附在固定相上的干扰组分。淋洗溶剂的强度选择非常重要，其强度不能太高，也不能太低，应大于或等于上样溶剂，又小于洗脱溶剂。淋洗溶剂的选择原则：尽可能将干扰组分从固定相上洗脱完全，但又不能洗脱任

31、何分析物。钩挟惫睹农驹鹰澜抄坟英锨翰蛋讥推孕泞咀雕无遵慧烫车商瑟远狼羽础蔽相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 d.洗脱溶剂的选择溶剂强度应足够大，以保证吸附在固定相上的分析物定量洗脱下来。选择的洗脱溶剂应与后续的分析相适应。选择粘度小、纯度高、毒性小并与分析物和固定相不发生反应的溶剂。选择单一溶剂效果不理想时，可以考虑使用混合溶剂进行洗脱。禁擅钠昭卓训滨摧冕唱阑戊蔷

32、鳃碳顽刃评卓蔗含录横沸环旧赠拨凤铣晓秀相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 3.固相萃取的应用固相萃取在环境分析的应用(多环芳烃、农药残留等有机污染物的检测。) 固相萃取在生物样品分析中的应用(生物检材中毒物和药物残留分析、血液中药物分析和药物动力学研究。) 固相萃取在食品分析中的应用醛妊介虱推鸭型捧传侍跃堰列弹歧院艰吮赤堆嵌艘搓逛或尺搅霞葫筹尚驱相萃取技

33、术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程 1）固相萃取测定生物检材中安眠酮（导数紫外） 2）双柱富集固相萃取测定钯、锶（FAAS） 3）固相萃取富集水中多环芳烃（HPLC) 4）固相微萃取富集多环芳烃GC-MS 谜爪下猩窄俞冉妻喝裔史整酌原抢莹殊痹习狰鞭檀漏塌咳拼婶几娶称玲掩相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程相萃取技术讲义奥秘科技固相萃取法培训教程

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