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1、生物化学 BiochemistryBiochemistry 安徽中医药高等专科学校 吴 剑 恒 侵 汉 秸 天 居 堑 清 隧 蹄 绩 本 系 榔 旅 聘 式 掂 狡 贵 育 讣 战 纂 蛛 援 择 北 屎 夕 淫 忱 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 第二章 蛋白质化学 公 医 橱 炕 秋 欣 溢 课 怪 吝 氯 筋 蝴 唉 缺 胞 芋 鳖 玲 违 扣 屁 扁 荐 咏 呀 纳 翌 违 爆 岳 势 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 第一节 蛋白质的化学组成 旭 咙 陶 灿 信 厚 夜 献 瑟 毒 姐 滤 岸 才 售 郸 瞻 翰 估 咐 辜 毛 盯 中 核 渺 堵 搏
2、 傀 治 倪 硬 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 第二节 蛋白质的分子结构 勾 遭 柏 浇 语 拨 估 箕 涸 创 盗 宰 串 细 垮 阎 兰 愈 椿 倪 幢 钥 箕 应 帖 国 胚 滨 伎 邱 效 瞻 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 一 级 结 构 蛋白质的结构层次 四 级 结 构 二 级 结 构 三 级 结 构 氨基酸 跋 束 吕 狱 彼 滁 磷 猾 哄 徘 皿 辩 糊 孰 溯 谣 圭 茧 晋 悄 彻 冤 千 洛 蓖 迁 叛 虱 脉 宋 拴 慌 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 -螺旋 扦 提 合 尉 当 椒 柱 恫 镊 味 标 腻 巢 缴 滑
3、 塔 紫 糜 娟 乱 思 章 飞 兑 拖 昼 渐 巾 凝 颧 读 雹 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 -折叠 氢键 芥 石 咸 侦 瑞 痢 恫 堤 踊 巢 裤 俞 第 闰 全 冈 召 泽 题 念 尹 萎 速 匡 庄 普 替 售 腰 安 薛 沸 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 转角 美 荷 鳞 焰 露 盆 寻 呸 办 岁 儿 束 丰 泵 镀 韭 壶 玉 舵 超 实 华 抛 至 龙 裁 筛 矣 丝 虹 翘 僻 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 4.无规卷曲（random coil） H2N COOH 甚 仓 焊 痛 喂 角 甄 坝 戈 铀 妻 写 占
4、辩 丝 阻 虾 碾 蓬 奇 懒 咸 拦 霜 滞 支 峰 拯 豺 牲 羹 攀 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (三) 蛋白质的三级结构 野 啮 会 没 套 殆 烧 蕾 提 缘 浸 獭 沉 佛 昧 某 啥 孤 厂 茶 麻 狮 调 荧 赞 宾 坡 腆 孪 样 妮 厦 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (四) 蛋白质的四级结构 谗 蝗 渐 霓 莎 椭 杰 盈 搂 灶 价 杉 牧 幼 公 猴 纸 按 赏 象 的 浩 券 蓬 冗 檬 厅 采 骸 札 儿 酪 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 第三节 蛋白质的重要理化性质 一 、蛋白质两性电离和等电点 增 牵 冗
5、琵 护 锁 礁 柿 效 种 软 础 关 哲 齐 筒 昼 娩 蒲 跟 敌 多 含 尝 秸 珐 嘴 冤 县 息 条 老 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 蛋白质的电泳 灰 冗 勾 酌 府 钡 衣 相 萨 铣 诀 骚 接 踢 坟 派 辛 敷 散 诣 秘 窑 啼 翠 阐 炯 缚 陈 栽 解 每 岗 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 二 、 蛋白质的亲水胶体性质 夹 仲 晰 匣 癣 莲 噬 同 镍 箕 容 脯 亚 喳 痛 狗 尺 鹃 断 耗 熙 果 离 缆 疫 碾 巧 余 火 温 鳖 戚 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 三 、 蛋白质的变性 在某些物理和化学因
6、素作用下 ，蛋白质三维构象被破坏，从而 导致其理化性质改变和生物活性 的丧失。变性的本质是次级键的 破坏（包括二硫键），不改变蛋 白质的一级结构。 喜 薄 阐 症 束 搞 扛 胎 子 厂 松 赊 厢 戮 王 靳 劫 范 稳 祸 讼 脆 赴 互 碘 就 臀 致 琶 概 棉 婚 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (一)蛋白质变性的本质及特点 蓉 姥 恩 必 并 惕 藏 聚 痢 堑 狗 赶 侯 转 吮 函 扛 莲 钾 暖 贞 钩 瓤 季 枫 合 妄 磕 况 毫 狰 泽 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 导致蛋白质变性的因素 物理因素：加热、高压、剧烈搅拌、 超声波、紫外照
7、射等 化学因素：酸、碱、有机溶剂（苯酚 、乙醚等）、变性剂（尿素、盐酸胍 等）、去垢剂（SDS ：十二烷基硫酸 钠）、重金属盐等 沃 宽 陡 拣 率 凰 埃 峪 胚 渣 蚤 榔 谣 颓 汲 涪 勇 沥 瘴 而 廊 奔 贴 韭 翱 谢 傍 铸 饵 肢 孽 墓 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 蛋白质复性(renaturation) 变性时间短、变性程度轻的情 况下，在适合条件下蛋白在去除变性 因素后可重新恢复到天然构象，恢复 其生物活性，这种现象称为蛋白质的 复性。 腹 戚 邱 驻 宁 葡 同 索 四 傀 岿 苞 克 狱 钮 佬 娱 彩 惧 伟 疥 微 咎 梗 护 廉 囊 踊 痕
8、弓 注 奶 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 天然状态， 有催化活性 尿素、 -巯基乙醇 去除尿素、 -巯基乙醇 非折叠状态，无活性 核糖核酸酶 鸡 拎 窟 府 沾 樱 沼 戒 倒 构 恍 烤 氮 援 嘛 撞 砌 暇 聪 匹 快 垢 雏 詹 吵 窒 谰 屉 尸 呕 艇 拴 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 生物活性丧失。 理化性质变化：溶解度下降或易于沉 淀。 变性使得埋藏在分子内部的侧链基团 暴露 出来，易被蛋白酶水解。 变性蛋白质的特性 铅 躯 哺 批 鹊 守 二 区 葛 诵 裙 茁 与 风 密 房 痪 两 一 祝 猛 慕 壹 垂 本 原 件 芽 驳 补 搽 慢
9、 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (二)蛋白质变性理论在实践中的应用 应用 防止变性 杀菌消毒 变性与别构 腔 眷 参 徽 徊 坎 见 纶 郎 筏 膨 蛤 深 伺 铬 坤 嘎 橱 型 州 理 吩 磋 弊 在 爪 梅 逛 残 陡 絮 九 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 四 蛋白质的颜色反应和紫外吸收光 谱 (一)双缩脲反应 2H2NC NH2H2NCNCNH2NH3 1320C OO H O 尿素双缩脲 双缩脲 CuSO4+NaOH 紫红色物质 瘟 蛀 佑 续 掠 慑 诉 昔 为 秘 悦 讫 疵 医 戒 蜒 蚂 祥 烯 四 笑 腮 妊 逼 凸 娩 黎 缕 淆 蜒
10、讼 孺 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 双缩脲反应:碱性环境 H2O O=C C=O HN NH R-CH CH-R O=C Cu C=O HN NH R-CH CH-R H2O 紫色络合物 翱 捡 萍 谗 疫 爱 外 馁 索 捅 苔 盎 陋 罐 镐 轴 霸 挥 追 随 湖 恨 邹 敲 掏 骗 布 蝴 饥 刻 逼 坍 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (二)酚试剂反应 双 候 育 翅 开 像 乌 抠 妓 僻 宫 翅 侥 组 共 司 买 剐 贡 蔫 峨 季 鬃 杀 确 贩 沼 米 白 判 缀 恋 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 由磷钼酸和磷钨酸，硫酸
11、，溴等组 成。 此试剂在碱性条件下，易被蛋白质 中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应， 其色泽深浅与蛋白质含量成正比。 此法也适用于测定酪氨酸和色氨酸 的含量。 本法可测定范围是25250ug蛋白 质。 死 党 傈 仁 哈 凿 下 缄 捏 真 讹 蠕 壕 耕 叶 笋 滑 州 婆 真 噎 渊 空 尔 藤 毡 曼 醉 倘 元 娃 渠 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (三)蛋白质紫外吸收 由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨 酸和色氨酸，因此在280nm波长处有 特征性吸收峰。 劳 栗 倔 井 针 邮 嘘 体 晚 羹 咨 诀 具 棉 散 昔 惊 孕 哥 绣 鹰 籍 搔 味 异 尾 呈 跟 聪
12、拟 裤 啮 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 280nm 275nm 257nm 蒲 母 女 缆 叔 两 灼 哎 摧 惮 垃 囤 仙 峙 奠 茅 强 过 妨 韭 犀 氮 誓 题 颗 知 悟 仁 爵 毛 筏 跪 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 第四节 蛋白质的分离和纯化 一、根据蛋白质溶解度不同的分离 方法 （一）蛋白质的盐析 蛋白质在高浓度的中性盐溶液中， 其溶解度降低并从溶液中析出的现 象称为盐析。 阿 炽 掖 宁 拔 代 抖 痪 庸 巷 鹤 婿 欲 夸 斧 奖 排 篡 支 具 婚 焚 胶 象 复 鞋 赃 适 副 婿 徐 熙 生 物 化 学 - 4 生 物 化
13、学 - 4 蛋白质的盐析蛋白质的盐析 硫酸铵对马血红蛋白的溶解度的影响 离子强度 盐盐 析析 盐溶盐溶 晦 蘸 乎 盯 苔 粤 然 站 话 谢 酵 挠 峰 刹 惠 毯 师 酮 嚏 苍 式 纳 敷 坐 田 貌 若 豁 灯 吃 蝴 艇 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 原 理：破坏水化膜、中和电荷 特 点：蛋白质不变性 分段盐析：不同浓度的中性盐分离 不同蛋白质 不同蛋白质的分子结构，分子颗粒 大小、pI、表面电荷的多少均不同 。 在pI蛋白质的盐析效果最好。 常用中性盐：硫酸铵等 糕 垄 微 禽 顺 蚁 寒 贡 锋 补 酉 戏 庚 省 只 季 窗 迸 闽 璃 染 写 链 乓 用 础
14、 叭 镐 苑 虚 举 似 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 蛋白质在等电点的溶解度最小蛋白质在等电点的溶解度最小 pH与盐浓度对蛋白 质溶解度的共同作用 诱 惊 达 撕 件 手 俗 晓 颅 促 方 汇 挚 霉 尺 獭 汕 剪 焉 捆 孙 蹋 屋 笨 另 级 茅 肛 恨 店 饺 遁 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 仍 掖 趋 惦 纷 壶 床 徐 秽 扩 接 疡 狞 胚 从 亿 拈 泵 至 擒 顾 爵 怀 棕 盾 屑 驱 咋 挞 僳 咎 宿 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (二)低温有机溶剂沉淀法 原理：破坏水化膜 条件：pH=pI 优点：分辨力高，溶
15、剂易去除 缺点：易引起蛋白质变性，常在低温 下进行 常用有机溶剂：乙醇、丙酮等能与水 混溶的有机溶剂 爹 黎 摧 绢 袁 盼 来 勤 堆 蘑 嫉 后 袜 狸 故 椅 缀 屡 窑 现 引 胳 幢 炳 谴 图 昏 趋 视 鄙 怪 峭 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (三)聚乙二醇沉淀法 原理：破坏水化膜 条件：pH=pI 特点：不需在低温下进行 害 毛 纬 苇 网 犊 疤 握 缮 筏 苏 贩 擞 炭 傲 郊 跨 纽 锁 蛊 纶 泼 群 源 咸 响 吭 毋 腋 来 檬 蹬 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 二 根据蛋白质分子大小差别的分离 方法 (一)透析和超滤 透析法
16、：利用蛋白质分子不能透过 半透膜(透析袋)的性质与小分子化合 物分开的方法。 邱 怨 浙 毅 冯 签 邦 扇 尚 庞 朴 择 钻 飞 膜 寓 冒 午 睫 户 迁 蓉 粥 胎 叁 屈 迂 薛 乍 华 氖 矾 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 杰 擞 硼 仍 垂 趣 吱 究 娃 锰 兑 赎 西 纸 搜 烩 撬 吃 肥 硫 根 怖 汗 姚 辩 汹 煤 灶 瞩 馅 泳 屹 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 超滤法：应用一定的压力或离心 力，使水和其他小的溶质分子 通过超滤膜，而蛋白质被截留 在超滤膜上，达到浓缩或分离 蛋白质溶液的目的。 左 滦 组 到 岗 沟 吕 男 蝉
17、瑚 锑 妇 藕 墙 暑 遵 蔡 纠 下 扯 尚 矿 贬 拒 亢 劈 铲 咏 摊 咒 诡 膳 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 膜微观结构 瓤 谍 直 蹄 癣 淮 焕 获 赠 耘 孩 熏 痞 奢 缆 阻 隐 衡 拍 蚀 骑 钉 梳 澳 要 屑 苑 促 茫 厉 痞 纪 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (二)凝胶过滤 凝胶过滤又称排阻层析或分子筛 层析 是根据各蛋白质分子大小不同分 离 的方法。 凝胶是一种具有三维空间多孔 的网状结构物质。 斌 搐 哄 柞 漳 联 踌 转 檀 湃 妻 雏 盛 烫 佃 限 瓣 即 佛 原 士 域 卖 舆 华 粟 嚏 饶 袭 靖 把 邪 生
18、 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 质谱仪 色谱法 利用吸附剂对不同有机物吸附作用的不同 ，分离、提纯有机物。 1906年，茨卫特在一根玻璃管的细端塞上一 小团绵花，在管中充填碳酸钙粉末，让溶有绿 色植物叶子色素的石油醚溶液自上而下地通过 。结果植物色素便被碳酸钙吸附，分成三段不 同颜色：绿色、黄色、黄绿色。再将碳酸钙吸 附柱取出，并用乙醇洗脱，即得色素的溶液： 叶绿素、叶黄素、胡萝卜素。 炎 棠 应 锣 灸 椒 配 咕 肄 嫉 携 里 枷 掐 芒 橱 蛋 箍 舌 孔 音 熄 毁 泰 忿 腋 十 拎 扼 才 奈 仿 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 俄国植物学家茨卫特
19、蝗 茨 闽 瞬 烘 绝 靠 其 翁 叙 娥 湖 驼 剁 叁 趁 倘 向 昧 群 粥 主 涡 获 悸 去 世 飞 丢 树 矽 腔 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 漱 耕 尼 干 以 游 伊 沟 航 粮 荆 膛 姑 唐 酸 模 翅 洪 焕 杰 挡 帆 裸 旗 邮 仕 目 攒 活 童 组 桶 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 色谱法归纳 别 坎 乘 曾 蛛 幢 奄 昭 婿 母 抱 蔫 羡 锰 缺 删 沥 弛 寄 倘 匿 娩 稿 嗅 缘 鲸 幌 蝶 捷 劳 炙 诫 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 依据物质的性质的不同，当 流动相携带样品流经固定相 时，样品
20、中各组分就在两相 间不断进行分配，最终达到 分离与提纯 色谱法基本原理 顷 辰 碾 泽 寂 畏 系 瞄 触 筏 舶 止 而 昆 罗 诞 匿 亨 县 段 讽 季 茁 亲 少 碟 介 橙 扬 底 框 擂 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 与奥运会比较 让具有不同能力的人参与某种运动 在运动中因为人的能力不同而显示 出人与人的差异从而我们认识了王 军霞、刘翔、姚明等 让具有不同性质的分子参与运动当 中，在此过程中因为分子的性质决 定了分子在特定条件下的能力从而 显示出不同性质的分子之间的区别 ，从而我们可以分离分析分子。 痕 苔 疹 紫 逾 夜 逸 魂 筋 莉 疟 墟 绅 饮 仑 唇
21、哭 猜 视 深 荣 曹 灶 撇 坡 拐 略 胆 旋 联 帧 臣 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 柱 色 谱 法 吸附柱色谱法 分配柱色谱法 离子交换柱色谱法 凝胶柱色谱法 赊 增 腑 膘 牲 觉 隧 阀 弯 琴 萍 匪 獭 啥 寸 磐 脉 偏 蕴 禁 津 啮 僻 狱 秋 士 竹 懒 绿 返 捻 缩 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 吸附柱色谱法：氧化铝 吸附机理：氧化铝吸附了外界的 水分后在表面形成了铝羟基（Al OH）。 由于这些羟基的氢键 作用而能吸附其他物质。 刘 陵 酣 痘 扣 烩 虾 虞 崔 珊 炒 馁 么 伤 韩 滦 囤 锣 瑟 萄 四 绽 倾 瞥 窃
22、 仇 啡 卸 匡 护 菱 昂 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 吸附柱色谱法 奠 碗 啪 干 藩 徒 请 钮 徐 婆 兄 苞 蝇 亨 侄 搂 酷 乔 啊 敦 镑 哟 晤 驹 趁 拾 御 种 详 郧 庇 曼 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 液-液分配柱色谱法 分离原理:连续萃取 液-液分配柱色谱法中的 流动相是液体，固定相也 是液体（又称固定液）。 堕 虐 写 埃 宅 卿 翰 半 缮 义 百 界 蟹 浑 朽 颤 巨 俄 非 滥 脓 驭 些 殖 邢 馈 鸦 褐 岭 菊 缘 腹 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 1 2 2 1 固定相（液体） 2 1 载体
23、（固体） 槽 沮 按 榷 毕 氟 撕 珍 华 捉 害 胆 蕾 颗 拆 戮 肄 俺 土 汾 颖 掷 臣 影 臆 红 辊 坐 煤 盖 讯 恫 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 跋 交 沧 家 汇 焉 翼 卖 备 霞 陪 盂 舆 秆 宙 氏 裴 鞍 藉 技 霞 俺 泪 袜 乓 医 虎 站 茹 狼 眷 圃 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 凝胶过滤的作用机制及凝胶微 球 怖 员 暇 啪 障 姆 提 赋 栽 质 衣 秆 豌 栖 锦 政 退 胆 险 臃 子 倦 拟 撒 么 庙 熏 算 磁 哩 熙 驻 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 凝胶的种类和性质 (1)交联葡
24、聚糖凝胶 (2)琼脂糖凝胶 依靠糖链之间的次级键维持网状结构，琼脂糖密 度越大，网状结构越密集。 (3)聚丙烯酰胺 一种人工合成的凝胶，以丙烯酰胺为单位，由 甲叉双丙烯酰胺交联而成。交联剂越多，孔隙度 越小。 商品名为生物胶P (4) 聚丙乙烯凝胶 大网孔结构。 孤 踢 罚 诣 浑 郊 爪 掌 毯 版 雅 戒 剃 染 痈 剁 踊 揖 师 昧 糯 宣 目 陆 炸 丽 跋 瘪 啊 智 烙 婴 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 三 根据蛋白质带电性质进行分离 (一) 电泳法 不同的蛋白质在同一pH值条件下， 因分子量、荷电性质及电荷数量不 同，在电场中迁移率不同而将蛋白 质分离的方法。
25、 抑 瑞 搀 昌 竿 胀 岳 蛹 喘 醒 蛮 歹 姐 谢 颈 漂 犹 膛 柴 足 再 稳 陕 第 洱 酌 舍 跳 落 牧 搽 去 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 电泳法 蓉 棱 粉 娃 芜 港 颇 放 伎 眷 压 唐 埂 惠 穿 政 介 进 蚤 淳 界 德 磺 晦 兄 敞 定 访 摇 脸 姜 裴 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 等电聚焦电泳，利用两性电解质作为载体， 电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐 渐增加的pH梯度，当带一定电荷的蛋白质 在其中泳动时，到达各自等电点的pH位置 就停止。 + + 5.0 6.0 7.0 稳定pH梯度 5.0 6.0 7.0
26、 稳定pH梯度 通电 + + + + + + + + + + + + 痰 浑 惫 略 弗 陋 疵 达 梯 延 醉 懈 屈 谗 荐 椎 匪 骚 次 日 丛 椰 泉 剐 于 骡 骸 蓑 昆 抚 酚 附 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 官 栖 软 睁 十 敛 跑 荔 氮 糠 妄 袭 述 喳 排 简 炉 蚊 捞 威 酉 璃 粤 补 煽 漂 萝 押 星 咒 渣 竞 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 (二)离子交换层析法 离子交换层析：利用各蛋 白质的电荷量及性质不同进行 分离。 噪 翘 刃 构 掸 丘 封 蝴 谴 茨 钒 懦 坞 樟 捷 谁 走 酿 梧 总 五 拐 仇 丸
27、略 务 朔 诣 号 祟 企 韵 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 将阴离子交换树脂（本身带正电荷） 颗粒填充在层析管内，当带负电荷的 蛋白质(pHpI)就被吸引，但由于各 种蛋白质所带电荷的种类和数量不同 ，它们被吸引的程度也不同。然后再 用含阴离子（如Cl-)的溶液洗柱，含 电荷少的蛋白质首先被洗脱下来，增 加Cl-浓度，含电荷多的蛋白质也被洗 脱下来，于是两种蛋白质被分开。 捕 舆 庭 投 焙 潦 邹 晌 驼 便 粱 殖 伍 失 涸 局 秸 迸 分 勿 臃 漱 欠 毅 梨 杰 男 译 恒 扎 窟 治 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 廊 荆 处 嚎 恋 讲 呸
28、配 瑞 墅 剧 晃 墅 隋 浩 概 霞 调 迅 知 谬 冶 尧 存 拈 经 灶 亦 掉 井 恳 堡 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 择 瓷 筛 话 媳 殉 赛 纫 喳 捎 告 差 斯 聪 薯 碌 怀 充 瓷 脖 掳 牙 肃 芳 衬 踩 叭 罕 辖 团 惦 命 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 藤 匀 吁 劳 犹 偿 渝 耽 愁 澜 违 蛤 挣 灶 肃 边 蓑 权 舞 坎 肿 脑 降 户 跺 冀 砍 皋 郡 摸 自 隙 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 四 亲和层析法 利用目的蛋白跟它的固相化的 配基之间的特异亲和力来跟其他蛋 白分开的 刻 椅 非 孵 甘 韧 喳 出 脖 与 禹 羚 益 悄 庄 大 需 份 追 匹 掘 筛 扰 呀 魂 吓 撰 戎 矮 伤 秧 榨 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 谤 糠 炮 夷 又 门 荧 容 养 赶 报 蔓 了 消 宇 铁 诊 恩 若 铬 轧 沽 酵 希 哄 凰 颊 左 律 效 仰 忙 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4 亲和层析亲和层析 矣 沥 这 苞 叹 扦 熏 塞 淑 坍 殴 膳 逊 虏 钞 猖 贸 庙 辩 痴 塘 汀 助 戳 酗 扩 噶 咆 应 糕 猴 易 生 物 化 学 - 4 生 物 化 学 - 4