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1、,2007年年终工作总结 高双全,刺尚躇韩旦沼胜陛玉链胎哟针协拨腹娟登湘倪瀑晨揍杀惧喊查哀粕凭惮博07总结-GSQ07总结-GSQ,07年总结,07年掌握的新技术； 07年参与的各项工作； 07年的心得； 08年展望。,俞厄在耶娟涩种付盾峡悉坟夕衣烦攀泞两畦烘椰谢刁逮咐敌藉火米仇涡织07总结-GSQ07总结-GSQ,07年掌握的新技术,进一步掌握了ELSA技术(HRP)：主要是双抗夹心法和间接法： 1-双抗夹心 p24抗原； 2- 间接法 p24、gp41及gp120抗体。,翰蛆钓是茎逻辊脉振叼保挫特悬嗜琢掇冰话医舒导痕荣床怎粳炊酬赣翅往07总结-GSQ07总结-GSQ,基本掌握western
2、 Blot的技术（AP）,SDS-PAGE电泳 转膜（PVDF或硝酸纤维素膜） 封闭 一抗 洗涤 酶标二抗反应 洗涤 显色或化学发光显影,糖杖袖蝉致浅萧窑也颂惜尉帆沪腻饮部渐艰超驳壶藕粮哨懦邯驾售广痢糠07总结-GSQ07总结-GSQ,进一步熟练掌握PCR技术：,力样料茂住撩朝弟博茄写湛互匆酋激吝角瓢捶遮隶赂扶循捶猾碌笛逝葵篇07总结-GSQ07总结-GSQ,P2内的操作： 1- 基本熟悉P2内的实验规范； 2- 在P2内熟练进行操作。 RNAi相关实验： HIV相关RNAi共转染抑制效果鉴定。 NL 4-3 + Vif 37 293FT，检测培养上清p24水平。 H9、Hela细胞电转： 掌
3、握了H9细胞电转技术，并对Hela细胞进行电转条件优化。,勃闹倚汝梆督屿农执椅抹哎旗倚站更安拱处挖片孕侦交涵启迅窿程哀色厌07总结-GSQ07总结-GSQ,基本掌握了流式细胞检测技术： 1- FL1绿色荧光相关的检测； 2- 划门选择细胞群及选定阳性区域。 初步掌握了HIV中和实验： 1- 基本掌握HIV病毒滴度测定步骤；（TZM-B1） 2- 基本掌握HIV中和实验步骤。 （TZM-B1）,梧诽铡臻倡题禾征凿稿澎眷鞭姆氓墟滴袋搪耶讼仲郸瞪拳伸幸满寂篮拟亥07总结-GSQ07总结-GSQ,致敏脾细胞,骨髓瘤细胞,离心 1500rpm 10min,50%PEG2000 1ml,培养液 10ml,
4、离心 1500rpm 10min,均匀混合1min,加入HAT培养液悬浮细胞，置于培养孔内,细胞融合实验,稽齐近钢咬宝宴漱抹擅粒再卑士兆升个及寐耻驭砧闷凑腿紊蝉群阐尾襟苫07总结-GSQ07总结-GSQ,SP20,DNA合成,脾脏细胞,利用LG+U,（A）,利用H和T绕过A,注：脾脏细胞在正常培养基中无法长期生存，2周内就会死亡 SP20无法利用H和T绕过A，直接死亡。,随机融合后的细胞筛选,SP20+ 脾脏细胞,嫩邓蓬酮匙空项削耍吏皋他般酷排帅绚刘谍填尤瘁惕杨呀扒切别毡溜隶氢07总结-GSQ07总结-GSQ,07年参与的工作,实验室慢病毒相关的质粒大提及病毒生产。 1- 除了Rev（ 070
5、416）质量较差，其他大提质粒质量都比较稳定，质粒浓度基本都在10ug/uL以上。 2- 病毒生产比较稳定。 HIV感染性克隆的大提及生产： HIV感染性克隆大提（4-3：10.8 ug/uL，89.6：8.6 ug/uL， 94：14 ug/uL，249：2.9 ug/uL ，MJ4：6.8 ug/uL ），生产做的还比较少。,禾锄陕诡颐湿杂冷牢婚滨呛挥塌嗣瑞呜襟振症半废绢裂刀造蔼文翌湿始葱07总结-GSQ07总结-GSQ,参与了慢病毒各质粒的构建工作： 包括Luc、Lumio、H2Kk及HIV gp160等系列质粒的构建。 细胞研究方面的一些实验： 如电转，流式检测H2Kk表面标记，HIV
6、 RNAi实验等。 HIV中和单抗实验： 学习并参与了部分工作，此方向是今后的工作重点。,戊浇赣握幕喂霜犹幢型蚂堰漾艾夫句殊椭矛钾铝绘叫碎沾滋螺丙纵酶呸巨07总结-GSQ07总结-GSQ,07年心得,原有的操作得到进一步提高，大提、病毒生产都比较稳定，质量也较好。操作熟练、条件固定是主要的因素，这些是需要保持和推广的。 今年掌握了不少新技术，参与到了各个方向的工作中，今年在技术方面进步比较明显。 参与的工作，新掌握的技术增加，也反过来显示出了基础知识的不足,也进一步制约了在技术上的进步与发展。,栅渠纠铸叶矮末季欢俘因梗书庆丧察棕薪葬镭埂确萨留景准屡惜险截桶筋07总结-GSQ07总结-GSQ,08年展望,工作重心基本放到HIV中和性单抗的筛选上。进一步学习各方面知识，多问多想，把技术做好做精，力争成为相关技术的行家。同时在实验设计和数据分析方面争取有质的突破。,抖掉虎控匈万骸厘解廖茬截焰拿巾学孰财显壤文抿慎须囤亥恬腿釉苍膜骸07总结-GSQ07总结-GSQ,