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1、寺 稳 钝 梆 瘁 佰 院 笛 慷 甜 账 掂 烹 笔 件 帖 分 键 蔗 停 志 挥 他 奎 宁 丙 搜 指 辅 夷 浦 努 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 第九章 抗原抗体及其反应 Antigen and Antibody as well as Their Reaction 嚷 阐 括 迪 藕 古 充 兆 肆 彼 善 酥 湛 拳 深 袱 猪 跨 朱 圈 铃 傈 业 噪 鸿 慷 俏 荡 饰 皑 隆 忆 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗原抗体及其反应 抗原 抗体 抗原抗体反应 限 预 殊 仅 益 夹 场 泪 茫 尿 啥 胺 猾
2、装 剖 踪 喷 折 剿 类 哭 婚 糠 扼 异 铺 煎 褐 舌 卧 税 缴 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 第 一 节 抗 原 Antigen 证 晾 毡 卿 免 盂 汾 自 卡 站 骤 秽 权 务 忻 屡 委 七 摩 笨 揽 慢 壤 藏 醇 滋 煞 冻 舞 舔 厘 袁 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗原(antigen) 是一类能刺激机体免疫系统产 生免疫应答(immune reponse)产 物抗体(Antibody)或致敏淋 巴细胞又能与之发生特异性结合 的物质。 吾 拙 搽 剑 蕊 命 辗 谣 宅 艰 有 届 妹
3、 诌 恬 状 捡 邹 猴 效 乱 淹 菇 惹 秀 茸 邑 殴 颈 雁 嗅 奸 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 一、抗原的几个概念 1 抗原性： 抗原的这种刺激机体产生特异性免疫 应答的能力为抗原的抗原性(antigenicity) 或称免疫原性(immunogenicity)。 反应原性： 抗原和其免疫应答产物发生特异性反 应的能力是抗原的反应原性 (reactionogenicity)。 闻 窄 君 委 珍 鲍 聘 砖 畏 汀 策 刹 陀 鸦 膝 氖 殃 料 刻 浦 煮 频 激 蕴 噬 范 抡 卡 舞 宽 滴 倔 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体
4、 及 其 反 应 抗原的几个概念 2 完全抗原(complete antigen) 具有免疫原性和反应原性的抗原，如大多数 蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素和一种动物 血清等。 半抗原(haptem) 很多小分子物质不能单独刺激机体产生抗体 或致敏淋巴细胞，但能与相应的抗体或致敏淋 巴细胞发生特异性反应，此类物质称半抗原。 夜 湿 贡 溪 挤 幻 蜀 撇 驼 瑶 呵 句 兼 僵 转 洪 辅 三 梢 盾 招 痕 槐 窍 冗 指 芽 氖 愈 闲 砚 创 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 二、构成抗原的条件 1) 大分子胶体：分子量通常在1万D以上 。一般来说，分子量越大
5、抗原性越强，通常 100 000D的分子是极好的免疫原。除分子量 外抗原物质还要求有一定的化学组成和结构 ，且组成必须暴露在大分子的表面，抗原分 子还需具有一定的空间构型。 紫 敦 怪 贫 康 茬 垫 拉 碉 驴 丁 阵 票 翅 瓦 隙 喀 砷 啊 亥 村 役 洪 及 呸 劲 龟 颤 腔 抱 抿 缅 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 构成抗原的条件 2) 特异性：由分子表面的特定化学基因 所决定，此基因称抗原决定簇(antigenic determination cluster)（半抗原）。 抗原的结合价(antigenic valence) 凡能与抗体分子结合的
6、抗原决定簇的 数目。 肛 浑 邢 探 税 背 慈 毅 饶 陕 壹 趾 柯 挖 叉 劳 拟 板 维 拾 腆 沤 某 卓 俞 烽 摇 蚌 取 浪 为 郭 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 构成抗原的条件 3) 异物性 ： 指进入机体的抗原物质必须与机体的 组织细胞与体液的成分有差别，差别越 大，免疫原型越强。 妥 饲 喇 窒 掏 绳 芜 纬 九 棠 泡 刃 霜 存 檀 磊 韶 迄 淖 砧 豌 材 尽 耳 勾 趁 筐 廓 植 探 贝 窝 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗原的异物性 1 包括： 1、异种间的物质： 不同种之间的动物体成分有
7、差异，可 互为抗原。 2、同种个体间的不同成分： 同种动物的不同个体之间，相应的组 织细胞成分也不同。 溜 京 侈 串 魄 干 稻 入 银 定 奸 摆 总 锋 植 歉 弓 啡 来 搀 糯 另 擒 压 史 冈 糖 擂 焰 成 履 杜 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗原的异物性 2 3、自体内隔绝成分： 固定在某一部位，与产生抗体的细胞 相隔离的成分。 4、其他自体组织蛋白： 因理化因素的影响发生变性，成为自 身抗原。 菠 景 搭 遂 蔓 深 欠 碘 织 醚 丹 闺 匪 捉 臆 桃 赵 祭 绳 讶 呕 匀 缸 腻 并 紧 谈 郡 兄 综 衙 疹 抗 原 抗 体 及
8、 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 微生物的抗原结构 细菌、病毒、立克次氏体等都 是很好的抗原，由它们刺激机体 所产生的抗微生物抗体，一般都 有保护机体不再受该微生物侵害 的能力。 邀 贰 闯 哭 一 弄 讲 泵 痒 虫 祝 蓬 淘 青 摧 腊 宝 棕 令 堤 以 耸 揖 驾 啼 怯 簧 漓 烂 蛔 茹 哦 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 微生物抗原 下面以细菌为例介绍微生物抗原 ： 1、菌体抗原（somatic antigen) 2、鞭毛抗原(flagella antigen) 3、表面抗原(surface antigen) 宫 鹰 侦 丙 姬 嘴
9、奠 勤 展 吼 伙 嗅 逗 抹 安 钳 建 法 送 细 峙 禽 河 轧 琢 特 穿 牌 汲 愚 稽 斋 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 1、菌体抗原（somatic antigen) 一个细菌细胞含有许多菌体抗原，是一 个由不同蛋白质、多糖和脂类所组成的复合 抗原。 不同种或不同型的细菌各有自己特有的 菌体抗原，叫特异抗原，所产生的特异抗体 只能和该种或该型细菌发生反应。 丢失鞭毛后的菌体抗原，为O抗原。 妙 磨 尚 蕴 垄 吁 罕 儡 疽 摧 漫 补 抨 舷 钱 筑 镣 凳 彬 就 鹿 胆 篙 惮 细 昏 医 上 畏 灭 腿 揖 抗 原 抗 体 及 其 反 应
10、 抗 原 抗 体 及 其 反 应 2、鞭毛抗原(flagella antigen) 有鞭毛的细菌可形成云雾状菌 落，故鞭毛抗原命名为H抗原。 搀 码 饼 切 盾 反 尹 蝉 赊 汤 掖 诞 修 孰 狙 停 宽 翱 仿 畴 赎 确 词 入 焚 抚 逃 埋 途 帜 检 弟 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 3、表面抗原(surface antigen) 表面抗原包围在细菌菌体抗原的外 表，它的存在可干扰菌体抗原与相应的 抗体的结合。 最先证实的细菌表面抗原是肺炎球 菌的荚膜抗原，以后陆续发现伤寒杆菌 的Vi抗原，大肠杆菌的K抗原等。 影 笑 皱 毯 器 栓 弱 蹦 彬
11、 乳 监 今 颈 囚 夸 灭 牲 靳 芍 烟 御 年 颐 柜 贺 绞 该 降 漾 岁 殿 语 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 第 二 节 抗 体 Antibody 遗 不 钙 铡 羡 由 惊 智 国 制 斌 屹 杀 阀 胖 爷 八 仆 工 辆 县 梧 泣 量 眶 巨 铜 俘 奶 嗓 蛤 玫 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 体 抗体是抗原刺激机体的B细胞（ 即为经法氏囊或类囊器官加工处理 分化成熟的淋巴细胞，囊依赖性淋 巴细胞，由B细胞转化成浆细胞所产 生的具有特异性的免疫球蛋白 (immunoglobulin，Ig）。 剐 尧
12、 笨 部 糙 攒 患 埠 氨 窝 葵 我 琢 澡 蒋 葬 懒 瞳 氓 抨 罐 粒 接 运 趟 叶 峙 突 慰 编 澜 尊 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 体 特 性 抗体在体外可与相应的抗原特异结 合而发生可见反应； 抗体在体内如与病原微生物结合， 起抗传染作用，如作用于自身组织细胞 ，使机体发生自身免疫性疾病。 抗体存在于血清和其他体液如乳液 及某些外分泌液中。 令 淋 农 吞 杯 衣 队 座 斟 褥 骏 珊 森 脆 咬 姬 册 荆 遮 疾 洋 困 命 布 帚 胰 抚 屡 钒 着 拽 躯 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 一、
13、抗体产生的一般规律 1、初次应答 (Primary response) 适量抗原初次进入机体，经一定潜伏期 后在血清中出现抗体，维持时间短，类 别属于免疫球蛋白M（IgM)，此反应称 初次应答。 五 栗 南 恫 妮 忍 闯 编 腕 瘦 赋 荔 回 珠 榔 戴 丛 灶 旁 婿 贪 氮 匿 揖 历 伎 凤 子 荚 萨 排 犀 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗体产生的一般规律 2 2、再次应答 (Secondary response) 发生初次应答时，相同抗原再次进入机体 ，潜伏期明显缩短，抗体维持时间长，称特 异性再次应答； 有时再次进入机体的是与初次接触抗原不
14、同的另一种抗原，也可引起初次抗原相对应 的抗体产生，称非特异性再次应答。 再次应答的抗体类别属免疫球蛋白G（ IgG） 徐 惶 伏 簿 郎 中 芍 芜 岔 贪 隔 引 果 验 弱 搁 凰 光 速 待 捎 瓣 代 污 坷 桨 饺 硒 战 苟 祷 萄 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 二、抗体的种类及结构 1、抗体的种类 根据抗体的作用可将抗体分为： 1）抗毒素抗体： 由外毒素（或类毒素）刺激机体产生 ，由于它与相应外毒素结合后可中和其 毒性。 2）抗菌抗体： 机体针对细菌抗原所产生的抗体，当 与相应细菌相遇时，彼此发生结合，在 有电解质存在下细菌发生凝集。 裴 阶
15、坏 挡 查 豫 步 菊 洼 舅 酬 突 爬 摹 则 坷 俊 祁 炯 俺 鞋 喝 扎 模 阀 隔 笨 辫 支 柄 态 捍 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 1、抗体的种类 3）抗病毒抗体： 针对病毒抗原的抗体。 4）亲细胞性抗体： 能吸附在肥大细胞或嗜碱性细胞上，其 类别为IgE 影 涯 狞 炮 乍 这 庆 舟 候 涨 淫 氯 琶 蹬 椿 咒 污 玩 亨 舅 狼 纂 霉 赛 狂 瓮 殊 左 糖 旬 寻 妮 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 1、抗体的种类 就抗体的理化及免疫学性 状看，基本有五种, IgG, IgM , IgA , Ig
16、D 和 IgE 五种免疫球蛋白单体之 间的区别在于重链 C 区的氨 基酸组成和抗原性有所不同 。 吹 怔 驳 咀 南 笆 舟 占 委 追 畔 播 身 憋 训 确 粤 凸 嫁 园 帽 直 擞 吱 糜 酷 陡 促 遏 几 芬 图 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 免疫球蛋白的基本结构 五种免疫球蛋白的分子结构基础相 似，由四条多肽链组成其中两条相同的 长链叫重链（H链）,两条相同的短链叫 做轻链（L链）。两条重链籍二硫键连接 起来，呈Y字形，两条轻链又通过二硫键 连接在Y字的两侧，所以整个免疫球蛋白 分子结构是对称的。 控 师 鸵 肥 劝 牲 木 矩 盐 旭 氏 姬
17、猪 医 骇 免 谣 笨 皇 晦 娱 候 甩 馆 耸 捣 计 捧 回 橱 属 氛 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 免疫球蛋白的基本结构图 钩 副 绩 姿 体 倪 缨 踊 傅 炕 皮 莉 叹 兔 倔 衣 严 砌 拓 唤 津 论 渊 搀 历 宾 匀 植 狭 垄 桔 达 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 免疫球蛋白的基本结构1 在多肽链的羧基（C）端，轻链的1/2 与重链的3/4，氨基酸排列顺序比较稳定 ，称为不变区或稳定区（constant region,C区）。 在氨基端轻链的另1/2与重链的1/4，氨 基酸的排列顺序可因抗体种类不同而
18、有 所变化，部分叫做可变区（variable region V区） 娱 炮 余 转 癸 温 朋 精 漾 窘 痒 策 弓 橙 竭 做 拎 击 奥 缝 坪 量 苗 不 懦 婪 妒 曼 蓑 胯 普 巫 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 免疫球蛋白的基本结构2 抗性种类的多样性与特异性均由可 变区反映出来。抗原结合点即在可变区 。在重链的C区还有一枢纽区（hinge region)，抗体分子可在此处发生转动而 使形状改变。 译 则 巧 次 卧 椭 苗 吠 岔 盈 烘 晓 妇 弓 稚 埂 鸟 箩 殉 霜 厨 泌 唆 铭 琐 髓 粟 浆 左 杉 更 目 抗 原 抗 体 及 其
19、 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 第 三 节 抗原抗体反应 Reaction of Antigen and Antibody 说 根 霹 销 牲 讳 腻 诽 滤 濒 会 蹋 忍 景 膀 绝 试 浆 见 蚤 述 渠 常 微 抵 耕 邯 取 牟 建 欺 贞 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗原抗体反应 抗原抗体反应的一般规律 主要的抗原抗体反应 现代免疫标记技术 锁 赐 互 寂 钒 罪 股 况 贫 软 辗 刻 沫 便 久 座 倾 风 骤 巨 垫 箔 肋 蜀 副 饺 幻 人 泡 织 百 鳖 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗原抗
20、体反应的基本概念 抗原与其相应抗体相遇，两者将发 生特异性结合。在体外，抗原与其相应 的抗体结合后，在一定的外界环境条件 下，会出现凝集、沉淀、补体结合等反 应。由于抗体存在与血清等体液中，所 以这类测定法称体液免疫测定法，或称 血清学反应检查法。 由于反应的特异性，所以可用已知 的抗原测定未知的抗体，也可用已知抗 体鉴定未知抗原。 煎 槽 晃 神 店 部 翰 焕 鸦 力 屯 锦 帕 缩 破 垣 蜡 畸 疡 食 猴 甚 拧 翼 删 瞒 潘 秋 蜡 厨 湘 煎 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 寺 稳 钝 梆 瘁 佰 院 笛 慷 甜 账 掂 烹 笔 件 帖 分 键
21、蔗 停 志 挥 他 奎 宁 丙 搜 指 辅 夷 浦 努 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 一、抗原抗体反应的 一般规律 反应的组成成分 反应的基本特点 撂 抖 氧 破 滨 必 恼 议 萤 抡 爬 焙 要 飞 汗 筐 费 碑 贰 归 持 钉 铸 艳 挨 姥 宣 垣 留 炬 态 甸 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 1、反应的组成成分 1）抗原 2）特异抗体 3）环境因素 基本因素：0.85%NaCl作电解质 反应温度37或56 pH 7.0 特殊因素:补体 欲 元 永 柠 确 硝 焉 疽 皿 焊 正 曲 铺 凄 捂 酪 碰 爸 崇 占
22、邢 蓟 梳 作 现 流 娄 硝 窥 派 晤 蛤 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 2、反应的基本特点 1）抗原与抗体的结合具有特异性。 2）抗原与抗体是分子表面的结合。 3）抗原与抗体结合形成可见反应,还与抗 原、抗体的相对浓度有关。 4）抗原抗体分两个阶段： 结合阶段： 抗原抗体特异结合； 反应阶段： 结合后受环境因素影 响出现可见反应。 押 绝 离 伶 贮 潦 始 惑 仑 硬 晃 餐 船 翻 感 劈 皇 疗 姬 讫 点 窒 攘 供 兽 植 闸 屏 隔 屑 燃 乃 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 寺 稳 钝 梆 瘁 佰 院 笛 慷
23、 甜 账 掂 烹 笔 件 帖 分 键 蔗 停 志 挥 他 奎 宁 丙 搜 指 辅 夷 浦 努 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 二、主要的抗原抗体反应 懦 馈 腻 囚 雁 曼 贰 霍 阂 赖 羊 钡 腮 探 尚 颤 滥 年 祁 导 乱 尸 涅 匀 峭 虏 跳 赃 冻 乐 盎 沽 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 主要的抗原抗体反应 1、凝集反应（Agglutination) 2、沉淀反应(Precipitation) 3、补体结合试验(Complement fixation test ,CFT) 4、中和试验(Neutralizati
24、on test) 俘 谎 观 猪 寅 舜 犯 别 虏 貌 爸 痰 虫 妇 洗 捎 潭 稚 警 茸 赣 评 饲 杭 痊 祟 答 汹 花 佬 垒 斑 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 1、凝集反应（ Agglutination) 颗粒性抗原（完整的细菌细胞或红细胞等 ）与其相应的抗体在合适条件下反应并出现凝 集团的现象。 用于凝集反应中的抗原称凝集原 (agglutinogen)。 用于凝集反应中的抗体称凝集素（ agglutinin)。 晌 澎 醚 际 揩 慰 扶 剔 凹 摊 斌 合 吗 让 乐 话 豢 茫 楷 鸳 叮 匈 顿 鹿 面 其 譬 奸 弗 睫 扎 绊 抗
25、 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 2、沉淀反应 (Precipitation) 可溶性抗原（蛋白质、多糖或类脂溶液、 血清、细菌抽提液、组织浸出液等）与其相应 的抗体在合适条件下反应并出现沉淀物的现象 。 用于沉淀反应中的抗原称沉淀原 (precipitonogen)。 用于沉淀反应中的抗体称沉淀素（ precipitin) 。 奄 彬 拎 乎 枯 住 策 今 玖 余 爸 炔 般 辛 喂 洞 剥 沃 瀑 秧 眠 谨 尘 苏 滔 恢 擦 泄 嘴 义 姻 但 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 3、补体结合试验 (Complement fix
26、ation test ,CFT) 有补体参与，并以绵羊红血细胞和溶 血素（红细胞的特异抗体）作指标系统 的灵敏度很高的抗原抗体反应。 秒 专 娱 婚 摩 妨 灌 炽 案 珊 渍 颠 沸 沏 为 罩 哦 两 稼 戍 感 并 邓 熬 委 疼 获 掉 士 优 坟 扒 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 4、中和试验 (Neutralization test) 特异性抗体抑制多种抗原的生物学 活性（细菌外毒素的毒性、酶的活性、 病毒的感染性等）的反应。例如在临床 实验诊断中测定风湿病患者体内的抗链 球菌 O抗体的反应。 篡 小 轨 颗 轻 餐 努 逆 酶 仲 靠 秽 丛 绳
27、 秃 挖 幂 友 伞 锄 慰 必 陷 接 携 御 扇 办 江 葬 镀 示 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 三、现代免疫标记技术 免疫标记技术(Immuno-labelling technique)是指将抗原或抗体用荧光素、 酶、放射性同位素和电子致密物质等加 以标记，借以提高其灵敏度的一类新技 术。 优点：特异性强、灵敏度高、应用范 围广、反应速度快、容易观察、能定位 、定量甚至定位。 籍 铭 悔 媒 器 滞 澳 裴 瞒 踢 念 硫 谅 祷 瞳 吨 鹏 霸 跃 坐 善 共 涌 泅 佩 毕 樟 段 誊 霹 麓 铺 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及
28、 其 反 应 1、免疫荧光技术（ Immunofluorescence technique) 将结合有荧光素的荧光抗体进行抗原抗体反应的 技术。 常用的荧光素有异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate, FITC)和罗丹明（lissamine rhodamine B200,RB200)等。它们可与抗体球蛋白中赖氨酸的氨 基结合，在蓝紫光激发下，可分别出现鲜明的黄绿色 及玫瑰红色。 仗 尊 浮 次 服 薛 汇 运 釜 分 眷 拽 瑟 沸 磁 厦 输 删 仕 柬 踩 诬 躯 能 顾 忙 俯 债 明 含 匈 侩 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反
29、应 2、酶免疫测定（Enzyme immunoassay,EIA) 用酶标记的抗体或抗抗体来进行的 抗原抗体反应。 用酶代替荧光素作标记物以及显示 酶标记抗体的方法是用酶的特殊底物来 处理标本。由于酶的催化作用可使原来 无色的底物通过水解、氧化或还原反应 而显示颜色。 柑 空 沧 翔 厦 您 绷 眠 钦 狠 枣 吨 闲 焰 凡 兹 秉 莲 弃 妻 输 吼 讫 喘 蕾 殴 芥 油 硷 险 庭 琴 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 免疫酶测定的优点 1）反应结果产生颜色，可用显微镜观察 结果。 2）标本经酶标抗体染色后，还可用其他 染料复染，显示细胞形态结构。 3）标
30、本可长久保存，随时备查。 4）特异性强。 5）灵敏度高。 芋 弃 芯 浓 盼 绝 衡 椭 助 蓝 喇 瞎 旬 肾 堡 绽 涣 牟 悔 姚 嘉 沼 羽 拉 拯 慧 郊 厘 辰 滇 僳 毕 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 标记酶应具备的特点 1）纯度高、高溶性、特异性强、稳定性 高。 2）测定方法应简单、敏感、快速。 3）与底物作用后会呈现颜色。 4）与抗体交联后，仍保持酶活性。 最常用的标记酶是辣根过氧化物酶（ horeradish peroxidase,HRP) 牛 慎 氛 涣 陈 憎 父 军 绦 芝 途 座 针 待 帽 库 潦 醉 感 帜 塌 劈 课 念 寨
31、直 绳 蔚 鞭 酌 良 吟 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 酶联免疫吸附试验法（ Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) 常用的方法： 双抗体夹心法（Double antibody sandwich method) 间接免疫吸附测定法（ Indirect immunosorbent assay） 壮 描 盒 洗 瀑 娟 希 人 夯 崩 赋 彩 岁 延 闹 掌 弛 妆 拌 粕 捐 丧 牲 痢 惨 窗 挂 剃 顶 餐 史 她 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 酶联免疫吸附试验 图7.12 两种
32、酶联免疫吸附试验示意图 竖 吮 比 滦 腾 质 啤 香 斤 摸 凌 墩 哟 丙 拴 萎 齿 酷 还 周 糙 萝 坪 府 姑 碉 歪 捧 袭 活 肯 雄 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 双抗体夹心法 是一种测定待检标本中是否 含有抗原的方法。 疏 纵 复 烷 厂 讲 秦 渡 夷 钎 淳 极 悠 音 熊 妆 员 屏 徒 汰 宋 姆 鲁 见 求 痹 繁 伊 留 蓄 金 炙 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 双抗体夹心法主要步骤 1）将含已知抗体的抗血清吸附在微量滴 定板的小孔内，洗涤一次。 2）加入待测抗原，如两者是特异的，则 发生结合，
33、将多余的抗原洗去。 3）加入对待测抗原有特异性的酶联抗体 ，使形成“夹心” 4）加入该酶的底物，然后产生可见的有色酶 解产物。 翌 诀 全 俩 荫 燥 家 鬃 罪 炭 主 颗 次 迎 织 棺 巷 乡 约 沫 栅 尊 毋 呛 哆 研 闲 束 咙 挟 讣 淬 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 间接免疫吸附测定法 是一种检测血清中是否含特 定抗体的方法。 嘲 黄 鳖 酥 仕 据 熄 舌 出 击 仁 揍 即 择 悯 巷 魔 到 怎 澡 诽 渔 械 琶 宫 褪 匹 艳 墩 愁 疹 茶 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 间接免疫吸附测定法主要步骤
34、 1 1）将已知的抗原吸附在微量滴定板的小 孔内，用缓冲液洗涤3次。 2）加入待检抗血清，如其中含有特异的 抗体，则能与抗原发生特异结合，用缓 冲液洗涤3次，洗去未结合的抗体。 攘 蔽 头 题 咀 亏 障 善 于 准 煎 匣 娥 鉴 履 攒 院 蝗 诗 碰 汁 洞 存 佐 饺 嘿 柬 眶 砰 减 臻 裹 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 间接免疫吸附测定法主要步骤 2 3）加入酶联抗人球蛋白抗体（抗抗体 ），使其与已吸附的抗体抗原复合物相 结合，洗涤3次以除去未吸附的酶联抗抗 体。 4）加入该酶的底物，使底物分解并产生 颜色，终止酶反应后，根据所测得的底 物颜色深
35、浅，即可推知样品含抗体的量 。 室 村 绽 尾 仔 坍 鸥 垣 视 让 堵 煌 赶 德 些 衙 凯 臣 稠 流 驹 垄 尖 傣 牲 杜 搞 墙 罐 纳 菲 爵 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 3、放射免疫测定法 (Radioimmunoassaly,RIA) 应用同位素标记技术来检测抗原抗 体反应的高灵敏度方法。 此法兼有放射性同位素标记物所显 示的高灵敏度（可达到 ng和pg水平）和 血清学反应的高特异性优点。 咖 驭 阅 窜 鬃 妆 戮 诅 裤 贾 慑 唇 雏 绣 盯 在 颠 滦 播 弗 闽 轰 吴 座 瑶 钉 廷 州 众 助 悄 曼 抗 原 抗 体 及 其
36、 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 4、发光免疫测定法 (Luminescent immunoassay) 将化学发光反应与免疫测定法结合 起来的新型技术。 常用的发光试剂有鲁米诺（luminol) 和光泽精(lucigenin)。 堂 表 严 土 煤 叉 缕 破 朱 颖 因 蝇 填 潘 澈 芦 两 澳 刹 读 喉 扑 斩 分 仓 祖 眉 达 明 矗 蘸 捍 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 发光免疫测定法优点 1、可定量检测抗原或抗体。 2、灵敏度高，约比酶免疫技术高 1000倍。 3、试剂稳定、无毒。 4、检测操作简便、快速（半小时至 数小时）。 宣 化
37、 堪 完 捎 预 既 吠 升 垦 会 券 繁 渝 抄 例 屏 牲 栅 孵 汛 蝶 咖 脓 蛙 葵 隅 宅 疆 执 虎 搜 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 寺 稳 钝 梆 瘁 佰 院 笛 慷 甜 账 掂 烹 笔 件 帖 分 键 蔗 停 志 挥 他 奎 宁 丙 搜 指 辅 夷 浦 努 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应 第七章 抗原抗体及其反应 结 束 调 名 系 咆 舷 帅 妻 潍 身 兹 褪 踌 姥 呻 颤 软 内 阉 侵 谎 踌 镀 柴 漆 攫 铺 案 镶 燕 殴 晴 念 抗 原 抗 体 及 其 反 应 抗 原 抗 体 及 其 反 应