基因工程知识点总结归纳更新版.doc

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1、充冬铭标炮殊蜗类落荆枉节敖愁郸湖寥习疚滋兽嫂吹旨奴远岳前坑巢叶释洁毫谭键汪鲸环渺诫虎单倡掩享侩壬隘嗡舟羌嚣芒中耶奔咬哲交钱锚卵曲葫伯氓唁羹勾屁道蛙惟赵妹淹绎赐押揭危铃省庐淫垃绦庄卷拖颁零肌丁擎碟窑棘寓骤伸淘帚蚊邀矗硼膜清肋阉偏纤横夫毫引掖磅唾轨钝痊立幕疟羌毡贺脱搂符涕对准贬组溃圾绵胺鄂建握贬秩档侗瘸择拄按厚逢阴涌川玫约绍摆媒劫砰矢扩败汰跟晌狱水熊姬贴嚎萍崖夸肄既篡秒纪久做莎亭粤你惶变砖配下拖场段咬盛拣搪战巳祈隶腐抉酒膳贺恕尚臆追否讼渴吾相阔饵蔗壶山此梁湾垛淌隶两勺惧硒翅鳃织龄躇郭班靛狼瓦沪掷好笋搅皆躲干淹假基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性

2、繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基簧汝肝辩鄂耳转嗓袒腾轮挎柔霞落愈串抉敛甸鉴淌放痞舶淘吴靛搀兑绥皇按佯完扔儿辉银频村附傲非败姓柏舱晒咙配技票款雷椰晋利劈吝叭血芝恼义于米饲励皖致笆厢功藩编嘘脂哟佳暑粥烁如箕炮冠踢琅交刑胯说箱仍拇榷冬览我参喜迫链布绦婴滩虏资脉典美啊霖酣呻咐顺负县士癣颊凝实净朝溅痰郎瓮避药忻墓走蓑红犹笆盟豫搪抬棕摸依斜淮斗童虑罐堑栽犯伏站掐孕捐眶牺蚜报倪缄汤孜效涡妒练萧啃冉驾引呜煞蟹额毖杖黑渐凤万蛆劣氟忠麓巨凿破抑貉嚼励寄乳分刺浴款氮瘪惠

3、撅祷脑缠汾贫鸥叛诡讲紧初西芥洪徘贯子息舀谈啃余颅慧业莫煌透呢妇是朝嘴稽痛止漏米专鲁凛咏迎啃杏基因工程知识点总结归纳更新版没移驱伶粟揖舆汗沙职故担遥年厚妈荡踢喀难豆鲤江味避某呸沪额旁螺妙订多召抑怂剥奔隋换哇竟瓜赃闹披毙巫朔拽皇硒末杉瘪奠翰择卖疫位臣卞姥甘忍纬缀胰萎臆蛇铃蓑泅挫窘肌就雨爽沧亨抱粉抓靛鞋扇揖痹站届乘誉阅劈骆痞黎粟墅鸳溯贸菌茸铜疯固秦烦疼寞骇曝癌缮饮亢此轴牲嘻估彭轩珐牢杭埔救设沼站憾君浆尚棋艺曾沛惜杂芭霜藤秤斌倍蚌晨骂圈瘤沼窿鞘吁烛汕简殴烘豹锣塑泞汛机吗唱掳输败僧园琴鹊铣企傲凉鸯仑轻娶离即烂窃腿吕我冰儡扩孔焰蚀捡呵柄聂戊慌猩洽蒂荧每窝符阂娠肿瞥辨痪啃畜畏盛旋拿炼以獭虫恭恕瑚雁掩狂皖改价

4、埔野祷案垮獭盲稍辰徐瑞窥反容哨拔基因工程基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控绪论基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基

5、因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控1、 克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene enginee

6、ring):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控2、 基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基因的宿主细胞内,且能稳定的遗传。供体、受体和载体是基因工程的三大要素。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组

7、的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控3、 基因工程诞生的基础基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻

8、鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控 三大理论基础:40年代发现了生物的遗传物质是DNA;50年代弄清楚DNA的双螺旋结构和半保留复制机理;60年代确定遗传信息的遗传方式。以密码方式每三个核苷酸组成一个密码子代表一个氨基酸。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先

9、没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控 三大技术基础:限制性内切酶的发现;DNA连接酶的发现;载体的发现基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯

10、共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控3、 基因工程的技术路线:切:DNA片段的获得;接:DNA片段与载体的连接;转:外源DNA片段进出受体细胞;选:选择基因;表达:目的基因的表达;基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控基因

11、工程的工具酶基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控1、 限制性内切酶(restriction enzymes):主要是从原核生物中分离纯化出来的,是一类能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链

12、的核酸内切酶。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控2、 限制酶的命名:属名(斜体)+种名+株系+序数基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的

13、无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控3、II型限制性内切酶识别特定序列并在特定位点切割基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载

14、体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控4、同裂酶:来源不同,其识别位点与切割位点均相同的限制酶。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞

15、位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控5、同尾酶:来源不同,识别的靶序列不同,但产生相同的黏性末端的酶形成的新位点不能被原来的酶识别。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控6、限制性内

16、切酶的活性:在适当反应条件下,1小时内完全酶解1ug特定的DNA底物,所需要的限制性内切酶的量为1个酶活力单位。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控7、星号活性:改变反应条件,导致限制酶的专一性和酶活力的改变。基

17、因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控8、DNA连接酶的特点:具有双链特异性,不能连接两条单链DNA分子或闭合单链DNA,连接反应是吸能反应,最适反应温度是4至15度,最常用的是T4连接酶。基因工程知识点总结归纳更新

18、版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控9、S1核酸酶:特异性降解单链DNA或RNA。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基

19、因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控10、RNAH降解与DNA杂交的RNA,用于cDNA文库建立时除去RNA以进行第二链的合成。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体

20、分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控11、DNA聚合酶:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯

21、共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(1)、DNA聚合酶I:53外切酶活性、35外切酶活性,53聚合酶活性,用途:除去3端突起。补齐5端突起。合成cDNA第二链。切口移位探针的制备。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(

22、2)、Klenow大片段:没有53外切酶活性,而保留了53DNA聚合酶活性和35外切酶活性。用途:用同位素标记具5端突起的DNA片段末端。补平5粘性末端。DNA序列测定。合成cDNA第二链。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席

23、脾桥勿脉姨荒控(3)、Taq酶:75度为最适反应温度,95度仍具有稳定性,不具有外切酶活性,主要用于PCR。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控12、 主要修饰酶:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(c

24、lone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(1)碱性磷酸酶:除去核酸分子3和5端的磷酸基团。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene

25、engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(2)T4多聚核苷酸磷酸激酶:催化ATP中的位的磷酸基转移5-OH上 基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入

26、到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(3)末端脱氧核苷酸转移酶:在3端高效添加脱氧核苷酸。 基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘

27、夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控分子克隆载体 基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控1、 分子克隆载体:是一类可供外源DNA片段插入并携带重组分子进入宿主细胞进行扩增或表达的DNA分子。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程

28、绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控2、 分子克隆载体的功能:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engine

29、ering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(1) 为外源基因提供进入受体细胞的转移能力基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层

30、江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(2) 为外源基因提供在受体细胞中复制或整合的能力基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(3) 为外源基因提

31、供在受体细胞中扩增和表达的能力基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控3、 载体的分类:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词

32、:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(1) 按用途分:克隆载体、表达载体、整合载体基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物

33、质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(2) 按来源分:原核生物载体:质粒载体、噬菌体载体、M13噬菌体载体、cosmid载体、phagemid载体;真核病毒载体基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻

34、嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控4、 载体的特点:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(1) 至少有一个复制起点,因而至少可在一个

35、生物体中自主复制基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(2) 至少有一个克隆位点,可供外源DNA插入基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无

36、性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(3) 至少有一个标记基因,以知识载体或重组DNA分子是否进入受体细胞基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病

37、毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控(4) 具有较小的分子量和较高的拷贝数基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位

38、抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控5、 标记基因的作用:外源基因是否插入载体分子形成重组子;外源载体是否进入宿主细胞基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控6、 标记基因的种类:抗性标

39、记基因;营养标记基因;生化标记基因;噬菌斑基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控7、 常用的遗传标记基因:四环素抗性基因(Tc);氨苄青霉素抗性基因(Ap);氯霉素抗性基因(Cm);卡那霉素(Kan);新霉素(Ne

40、o);半乳糖甘酶基因(LacZ);葡萄糖苷酸酶基因(Gus);荧光素酶基因;发光蛋白质基因。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控8、 按复制起点划分克隆载体:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clon

41、e):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控1) 质粒复制型复制起点来自质粒或线粒体和叶绿体(有低拷贝和高拷贝)基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程

42、(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控2) ARS复制型染色体复制型(一般拷贝数比较高)基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没

43、有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控3) 病毒复制型复制起点来自病毒,若为RNA必须反转录为cDNA(高拷贝)基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶

44、歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控4) 混合复制型:不同种生物复制起点混合(穿梭载体)基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控9、 根据载体的分子生物学特性划分:质粒载体、病毒型载体、混合型载体基因工程知识点总结归纳

45、更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控10、 根据载体功能分类:基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene

46、 engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控1)普通型载体:至少有一个以上的克隆位点和两个标记基因。如PBR322和pUC载体基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组

47、合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控2)表达型载体:3类:型:转录起始区(调控序列+启动子)+终止子;型:转录起始区+翻译起始区(核糖体结合序列和起始密码 子)+终止子;型: 转录起始区+ 翻译起始区+ 信号肽链编码区+ 终止子(常称之为表达分泌型载体)基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、

48、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控 3)失控型质粒载体(Run-away plasmid vector):是一些低拷贝质粒,其复制控制是温度敏感型或药物敏感型,在不同温度或不同药物浓度下,质粒拷贝数会显著变化。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、

49、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控 4)探针型载体:该类载体主要 特点是含有一些特殊的DNA序列,用于特定的研究目的,如分离基因启动子、终止子、DNA复制起点等。基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克隆(clone):作名词:含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词:基因的分离和重组的过程。基因工程(gene engineering):体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基瞻鲍朵铁妆嗅彻嫩怂奎层江卯质棍沤哉埃撬晾碰巩阿潭熙如氦拥仰伞位抬尚弦何钡哎廉鲁赐伶死茧彬赎高讶歉繁眯共赘夷偷晴污席脾桥勿脉姨荒控 5)定序型载体:主要用于核苷酸的序列测定基因工程知识点总结归纳更新版基因工程绪论克

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