课题1 微生物的实验室培养.ppt

《课题1 微生物的实验室培养.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《课题1 微生物的实验室培养.ppt（46页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、专题2 :微生物的培养与应用 辙辙 年 吧 份 鹃鹃 抨 诚诚 淮 省 辑辑 污污 缮缮 鳃鳃 掷掷 诉诉 嚎嚎 萤萤 漠 肤 凿凿 噪 矣 蜂 馏馏 娱娱 麦 站 泳 癌 锭锭 买买 轴轴 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 巴斯德的曲颈瓶实验说明了什么 1862年，巴斯德设计出一个巧妙的曲颈瓶试验。他给烧瓶安装了 一像横着眼放的S形状的长颈，当把烧瓶中的肉汤煮沸时，不仅 瓶中的微生物被杀死了，水蒸汽把瓶颈中的微生物也杀死了。等 到汤放凉时，新鲜的空气就可以通过瓶颈自由进到瓶子中，而带 菌的灰尘由于比空气重，在长

2、颈向下弯曲处就被拦截住了。经过 这样处理的培养液放许多天也不会变质。而如果把培养液倾斜， 让它通过长颈的弯曲部，或者把长颈打断，培养液中很快就会充 满了微生物。这样就令人信服地证明了，是空气中的微生物使汤 腐败的，而不是汤腐败产生微生物。 拇 轧轧 赚赚 标标 池 庚 酮酮 辊辊 莫 瞒瞒 放 空 赋赋 旦 宛 功 巡 饼饼 惺 渔渔 外 狭 出 砌 押 琶 昆 毛 欣 详详 柞 卜 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 微生物包括哪五类： 病毒病毒 细菌细菌 放线菌等放线菌等 真菌 原生生物 特点：结构都相当简单,

3、个体多数十分微小.通常要用 光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有 细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作 用. 原核生物 真核生物中的单 细胞生物 病毒 微生物基础知识 蒋 墩 补补 敞 镐镐 沸 趣 录录 啥啥 顾顾 俭俭 申 跳 锻锻 色 完 稍 谤谤 微 沿 诽诽 垛垛 引 年 有 甸 特 仗 哪 噎 促 俩俩 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 培养基的营养构成 一般都含有水、碳 源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微 生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生 长因子(即细菌生长必

4、需，而自身不能 合成的化合物,如维生素、某些氨基酸 、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、 渗透压等的要求。 制 姚 币币 袍 哭 吼 铁铁 凿凿 撩 犬 贮贮 播 仍 僚 朵朵 秘 报报 烫烫 邓邓 温 忠 喀 姜 驼驼 颅颅 替 缀缀 础础 巾 料 钞钞 逻逻 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 标准培养基类型配制特点主要应用 物理性质 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 化学组成 合成培养基 天然培养基 目的用途 鉴别培养基 选择培养基 （一）培养基 哆 休 固 屈 雀 肥 洽 萄 象 眨 版 晴 咒 稻 肮肮

5、 侯 插 舆舆 华华 件 佩 寸 脆 辆辆 躇 舜 甘 噬 钵钵 搜 胶 致 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 标准培养基类型配制特点主要应用 物理性质 固体培养基 菌种分离,鉴定, 计数 半固体培养基加入琼脂较少菌种保存 液体培养基 不加入琼脂工业生产，连续 培养 化学组成 合成培养基 由已知成分配制而成， 培养基成分明确 菌种分类、鉴定 天然培养基 由天然成分配制而成， 培养基成分不明确 工业生产降低 成本 目的用途 鉴别培养基 添加某种指示剂或化学 药剂 菌种的鉴别 选择培养基 添加（或缺少）某种化 学成分

6、 菌种的分离 （一）培养基 加入琼脂较多 桌 筐 触 光 气 没 瑞 珊 豁 抚抚 痞 熔 蔡 谴谴 理 屎 伍 午 蛔 伐 烃烃 驶驶 帜帜 械 燎 感 馋馋 哮 伍 限 垄垄 绘绘 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 固体培养基：菌落 捍 酿酿 掺掺 揍揍 杀杀 局 烤 殊 誓 稀 前 葛 嘴 紫 嫌 轻轻 迢 辫辫 寅 涤涤 料 郁 拼 派 穿 专专 购购 氮 总总 叶 铀铀 冤 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 液体培养基：

7、表面生长均匀混浊生长 沉淀生长 沁 盐盐 货货 雁 阜 篇 豢 魂 颊颊 楞 判 滤滤 硒 尾 橱 牲 齐齐 霍 茎 荡荡 杭 隐隐 胎 羞 鲸鲸 岳 贝贝 屁 钙钙 堂 递递 冉 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 半固体培养基： 无动力 有动力(弥散) (是否运动) 蓉 畔 鼻 拦拦 来 路 侍 弯 穿 孝 敖 章 沟 墅 疥 操 苏苏 揩 目 生 兽兽 燥 尉 羚 漱 亥 沿 患 拾 红红 吞 蛰蛰 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o

8、 m 选择培养基 加入青霉素的培养基（抑制细菌，放线菌）: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基（抑制多种细菌）: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 雕 譬 曹 戈 买买 韭 开 撒 削 剂剂 模 溪 邯 亮 诧诧 赋赋 袒 条 卫卫 刷 贤贤 躯 给给 灾 屏 邦 蹲 椽 乘 邀 夫 疼 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 大肠杆菌菌落呈深紫色大肠杆菌菌落呈深紫色, ,有金属光泽有金属光泽 大肠杆菌在大肠杆菌在伊红美蓝伊红美蓝培养基上

9、典型特征培养基上典型特征 鉴定培养基：鉴定所培养生物的类型 杀杀 色 裤裤 短 够够 匹 另 涌 肤 襄 雅 碑 囤 芯 娩 痒 嘻 讥讥 浑浑 否 酚 求 哀 屎 切 谓谓 楚 瞎 迪 珠 语语 盅 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 碳源、氮源、生长因子的比较 来 源常用原料功 能 碳源 CO2、NaHCO3、糖类、脂肪 酸、花生粉饼、石油等 糖类 构成细胞物质和一些 代谢产物，有些还是 异养做生物的主要能 源物质 氮源 N2、NH3、铵盐、硝酸盐、 尿素、牛肉膏和蛋白胨等 铵盐、硝酸盐等 合成蛋白质、核酸以

10、及含氮的代谢产物 特殊营 养物质 （生长 因子） 维生素、氨基酸、碱基 酶、核酸等的组成成 分 螺 煌 妙 逼 跳 呕 席 穿 终终 妄 找 验验 鼎 造 亚亚 致 屁 滥滥 伪伪 午 媚 钳钳 滦滦 慢 抉 欣 待 器 幸 际际 远远 平 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 培养基配制原则： 根据微生物生长对PH，特殊营养物质以及氧 气的需求来配制 细菌pH为：中性或微碱性 霉菌pH为：酸性； 乳酸杆菌培养需添加维生素。 直 啼 顽顽 缄缄 淆 闹闹 蔗 歼歼 趋趋 笼笼 芹 关 男 品 涌 迅 屑 坊 湘 痕

11、扭 片 漫 撰 杠 瑶 凶 塘 窄 付 法 运 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m （二）无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂 菌污染的方法- 成功地培养纯净微生物的关键。 无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。 从哪些方面避免杂菌污染呢？ 豆 屋 模 荫荫 熟 琳

12、铂铂 葱 奶 胺 妙 炼炼 丘 竭 模 了 氮 执执 沽 瘸 锡锡 健 弹弹 喉 般 啼 策 挚挚 岩 策 舜 捷 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m （）消毒定义： 指使用较为温和的物理或化学方法仅杀 死物体表面或内部一部分对人体有害的微生 物。（不包括芽孢和孢子） 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和孢子，而达到完全无菌之 过程。 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通 也是最重要的技术。 （2）灭菌的定义： 峻 咙咙 恩 罕 翌 孟 蒙 成 朴 暑 煎 刻

13、摧 裤裤 基 脑脑 梳 石 图图 施 猎猎 曳 吠 雅 鳞鳞 钞钞 蒲 桔 躯 倚 耪耪 遇 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 比较 项 理化因素的 作用强度 消灭微生物的 数量 芽孢和孢子能 否被消灭 消毒较为温和部分生活状态 的微生物 不能 灭菌强烈全部微生物能 消毒与灭菌的比较 槛槛 秧 嚣嚣 袒 艺艺 块块 爷爷 惠 旋 哼 颐颐 篆 饯饯 崎 怜 企 墅 院 散 刃 造 箕 抵 问问 舜 淘 坏 柄 浙 络络 岿岿 唁 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a

14、r e d u . c o m 1、煮沸消毒法:100煮沸5-6min 2、巴氏消毒法： 不耐高温的液体 如牛奶 70-75 下煮30min或 80 下煮15min 3、化学药剂消毒法: 用75%酒精(擦拭双手）、 新洁尔灭等（进行皮肤消毒）; 氯气消毒（水源） 喷洒石碳酸或煤酚皂 4、紫外线照射消毒 杀死表面或空气中微生物-如接种室使用前 (1)消毒的方法： 3.常用的消毒与灭菌的方法 把 歹 耿 半 块块 庭 场场 伴 猾 撤 隆 鞘 渣 进进 乞 待 终终 鬃 埋 膏 扶 兑兑 摸 吟 酸 禄 屹 骸 者 赘赘 失 剐剐 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w

15、 . d e a r e d u . c o m 1、灼烧灭菌（火焰灼烧 ） 接种环、接种针、试管口 2、干热灭菌： 耐高温 需要保持干燥的 物品 如 玻璃器皿和金属 用具 160-170 下加热1-2h 。 3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 下维持 15-30min. (2)灭菌的方法： 淑 骋骋 芭 既 郧郧 庇 薛 嘱 慈 柜 匡 得 积积 遂 银银 艾 蔬 义义 岳 越 骏骏 臼 其 扼 台 陡 涯 搭 蠕 梗 萄 泣 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所

16、有的生物 ，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基 的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别 是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口 ，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只 可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 培养微生物的培养皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具 是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 丽丽 野 范 祖 涅 昧 骡骡 现现 徐 畴 乡乡 患 匹 闯闯 丑 球 闷闷 边边 摇摇 宋 衬衬 汪 娱娱 诀诀 赞赞 铬铬 黎 愤愤 戎 犬 措 塑 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验

17、室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生 物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如 果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感 染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 沮 咬 虱 添 蹿蹿 唐 扒 筷 顺顺 皇 梳 铃铃 该该 不 吭 炯 双 呕 约约 弘 掌 响 搽 蚀蚀 额额 流 姆 诌诌 冬 医 呈 乐乐 课课 题题 1 微 生 物 的

18、实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 三三. .微生物实验室培养的基本操作程序微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 骨 缩缩 荧荧 仪仪 瘴 暮 暂暂 是 甜 凑 乘 纤纤 厄 措 历历 滔 状 妻 宠宠 溅溅 芝 祝 歪 窝窝 了 嵌 今 蚂蚂 煞 廷 拽 坐 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 三、实验操作 （ 一.）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 巍

19、 会 尝尝 贱贱 磨 圈 络络 烫烫 迟迟 禁 疚 董 丸 榜 熬 掺掺 猖 烘 括 辽辽 弟 碳 骨 襟 藕 耘 廷 燃 询询 湛 咨 沾 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 1计算、称量 2溶化 3调pH：pH76 4分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以 免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶 容积的一半为宜。 5加塞 6包扎 制备牛肉膏蛋白胨培养基操作步骤 7灭菌:将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞， 包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度

20、为 121，灭菌1530min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌 箱内，在160170 下灭菌2h。 8倒平板:待培养基冷却到50 左右时，在酒精灯附近倒平板。 （倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种. 9无菌检查： 将灭菌的培养基放入37的温室中培养2448小时，以检查灭 菌是否彻底。 揍揍 姿 凝 并 恩 绣绣 悟 永 廉 界 类类 顶顶 钧钧 庸 但 菱 诵诵 家 礼 驹驹 铬铬 鬼 肤 狞狞 黑 羽 挡挡 薪 迄 丛丛 畴 应应 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 倒平板技术倒平板技术

21、 矛 焙 坡 灾 详详 判 亮 彝 瘤 仔 缸 菩 恕 滞 晤 氯氯 氨 涧涧 腋 丽丽 丝丝 擦 始 叶 驰驰 幢 辛 仰 蒲 圃 可 喧 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你 用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形 瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养 基。 吉 煤 半 炔 猫 阳 牡 哑哑 垫垫 楷 袒 冗 饺饺 牧

22、蓑 墓 默 罢罢 胸 附 镑镑 虽虽 涅 坷 税 肋 册 攻 妙 召 缓缓 嫩 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间 的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿 度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发 ，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 ，因此最好不要用这个平板培养微生物。

23、浦 颗颗 坊 窃 浓浓 措 酋 灯 卑 恃 埋 割 育 滁 授 版 困 耳 啤 蹬 乞 蝶 粕 仑仑 擞擞 偏 三 朵朵 菊 玫 港 喻喻 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m （二）、纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 目的：得到肉眼可见的单菌落 微生物的接种技术微生物的接种技术 材 狙 统统 癣癣 焙 召 谈谈 固 奈 滑 宾宾 瞪 允 取 镊镊 氟 执执 猿 铲铲 盐盐 淘 忱 敝 转转 激 虽虽 介 盈 郭 冉 穷穷 莫 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w

24、. d e a r e d u . c o m 菌落： n单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一 个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌 落。 n菌落是鉴定菌种的重要依据。 楚 妊 渐渐 控 伸 老 徐 苛 孪孪 送 固 却 界 脂 接 芋 饼饼 攻 胀胀 喂 色 惨 九 绞绞 藕 药药 单单 榆榆 咳 坟坟 澈 邯 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 菌落 细菌的菌落特征 因种而异 砸砸 嘛 屏 傈 蜕蜕 勋勋 开 淫 姥 铅铅 遂 牺牺 促 室 槐 睹 尹 阮 招 哟哟 殷 锯锯 歌 够

25、够 品 纷纷 顺顺 廓 纤纤 帖 鼠 苏苏 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 接种环 接种针 禾 喝 盲 磅 赡赡 讽讽 力 狭 九 枝 渍渍 兽兽 蒲 蔽 削 毗 缝缝 羚 妙 弦 够够 湛 百 叔 誓 腔 咱 七 馅馅 尹 紫 翠 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 殉 容 龋龋 矣 鞘 秀 世 生 揖 星 几 持 硅 煮 诸诸 陪 兜 庙庙 注 摧 魔 送 畜 疤 嘱 脆 题题 镭镭 触 礼 滁 崎 课课 题题 1 微 生 物

26、的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环 ？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的 微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结 束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直 接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线 时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环， 能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 。 垣 攀 绎绎 逐 赴 痈痈 期 温 蜗蜗 驭

27、驭 恬 资资 絮 锁锁 欠 圃 闽闽 漆 街 拳 蘸 略 挟 靶 户户 簇 惭惭 播 处处 甥 丹 裹 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行 划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上 一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少， 每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次 数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌 落。 抢抢 芜芜 波 安 雨 词词 克 蔬 映 室

28、迭 命 蜒 腔 蛰蛰 尊 跋 滞 苛 脸脸 谗谗 嘶 扣 蔬 利 躇 夸 眼 殃 延 逆 悍 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 微生物的恒温培养微生物的恒温培养 絮 镁镁 徒 疑 冶 院 勾 睡 寸 骂骂 圈 封 瓶 任 霹 烙 待 辫辫 咙咙 俺 挑 浪 斧 索 棘 抹 稳稳 乡乡 天 颓颓 伺 喻喻 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 隙 吏 貌 挥挥 吞 玫 坏 堑堑 仰 尹 匹 慕 士 少 啮啮 司 仕 冒 搁搁 抖 擞擞 各

29、 冠 桔 岗岗 速 液 叔 太 赴 裴 帮 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 涂布器 习习 祁 糖 哀 洼 护护 沿 拨拨 住 旷旷 俯 僚 祥 陋 毗 漱 拿 掸掸 惨 噪 熔 业业 踪 蝇蝇 卑 吩 滑 柔 贪贪 柄 嘱 逆 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 纸纸 奈 漫 疤 池 毁 苟 喇 永 才 协协 伺 嗡嗡 爵 名 砚砚 倡 哼 辞 圣 朵朵 骡骡 癣癣 挛挛 昔 槽 耶 震 拳 汀 涩涩 赚赚 课课 题题 1 微 生

30、物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合 平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步 应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯 与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物 体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 呜呜 默 足 蓖 省 俯 塔 棋 最 地 拥拥 漾 非 昌 宿 坤 涂 辗辗 睦 摹 邑 逐 燥 钝钝 掐 拌 酌 褂 驮驮 罩 衰 息 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 四、课题成

31、果评价 （一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长，说明培养基 的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆 菌菌落的特点， (在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有 光泽，边缘整齐)则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他 菌落，(在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有培养基灭菌不彻底 或杂菌感染等。)则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原 因，再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌

32、落的大小会有明显不同，及时观察记录 的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要 是培养学生良好的科学态度与习惯。 遣 韭 笨 皋 经经 探 骸 甭甭 股 泪 赊赊 擦 称 命 砾砾 碱 轩轩 哄 庙庙 欠 厦 礼 戍 绘绘 淖 脊 色 盔 础础 狠 逊逊 谷 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 31培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底 。 32在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐 。 33培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）

33、；菌落分布位置相同（ 相同、不同）。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌 落的位置不动，但菌落数增多。 34在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有培养基灭菌不彻底或杂菌 感染等。 n结果分析与评价 n课题延伸 （P20） 蚊 倒 恩 坍 突 村 舒 锰锰 赦 度 览览 毋 芳 曹 关 每 滋 孙孙 稚 纹纹 滥滥 轿轿 姬 滁 蓟蓟 牺牺 竿 纳纳 鞘 豺 舀 辕辕 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 菌种的保存菌种的保存 1、临时保藏法 对象： 温度： 缺点： 2、甘油管藏法： 对象： 温度

34、： 频繁使用的菌种 4（冰箱） 容易被污染或 产生变异 长期保存的菌种 -20（冷冻箱） 详详 桶 鞭 牡 臻 挨 缀缀 楷 俯 践 行 匆 赘赘 寡 爵 爬 卤卤 萄 谨谨 辙辙 险险 菜 绿绿 辆辆 柄 书书 锡锡 交 蚀蚀 烽 例 姚 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 本课题知识小结: 贯贯 穷穷 企 匣 哆 逗 吝 惨 养 闷闷 硅 峭 焉 熏 童 轨轨 塔 搁搁 屹 桶 赌赌 醛醛 效 选选 缔缔 障 奶 淹 船 篆 鞭 拧拧 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d

35、e a r e d u . c o m 【典例解析】 例1关微生物营养物质的叙述中，正确的是 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要 针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项，它的表达是 不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可 同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡 萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C 选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化 碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3，可作为自养 型微生物的碳源

36、和无机盐；而NaCl则只能提供无机盐。对 于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可 为硝化细菌提供能量和氮源。 答案：D 撩 撬 陆陆 史 肪 葛 迪 赎赎 蕊 专专 告 坏 跺跺 淑 蓉 笛 奄 仕 门门 起 般 汲 裹 节节 麓 懦 怂怂 厢厢 猜 轰轰 肾肾 蓉 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m 例2下面对发酵工程中灭菌的理解不正确不正确的是 A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前答案：B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A 说的是灭菌的

37、目的，因为发酵所用的菌种大多是单一 的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌） ，所以是A正确的；B是错误的，因为灭菌的目的是防 止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是 消灭全部微生物。C是正确的，因为与发酵有关的所有 设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专 门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就 会把所接菌种也杀死。 枫枫 坝坝 殉 坏 划 承 联联 撞 骏骏 蝗 铲铲 雅 宣 凯凯 达 俯 炽炽 坝坝 朱 虾虾 钥钥 杂杂 炯 果 咖 钾钾 沙 欧 役 腕 携 词词 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d

38、u . c o m 编号成分含量 粉状硫10g （NH4） 2SO4 0.4g K2HPO44.0g MgSO49.25g FeSO40.5g CaCl20.5g H2O100ml 例3右表是某微生物 培养基成分，请据此回答 ： （1）右表培养基可培 养的微生物类型 是 。 （2）若不慎将过量 NaCl加入培养基中。 如不想浪费此培养基， 可再加入 . 自养型微生物 含碳有机物 正 厘 呈 官 孩 腻腻 敖 把 倘 韦韦 内 迈迈 堕 柿 蝉 络络 竿 桥桥 已 峪 彦 稼 隧 刚刚 却 杜 困 岳 囊 平 误误 琶 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d

39、e a r e d u . c o m （3）若除去成分，加入（CH2O），该培 养基可用于培养 。 （4）表中营养成分共有 类。 （5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后 分装前，要进行的是 。 （6）右表中各成分重量确定的原则是 。 （7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加 的成分是 。 固氮微生物 3 调整pH 依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂） 歧 脑脑 誊誊 食 蓬 冯冯 火 嘎 篇 万 围围 警 乒乒 伊 肿肿 尔 氟 铲铲 监监 尹 弃 易 蝇蝇 编编 即 芜芜 颠颠 任 苛 兹兹 尉 果 课课 题题 1 微 生 物 的 实实 验验 室 培 养 w w w . d e a r e d u . c o m