中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究.ppt

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2、的次级代谢物中约7080具有生物活性。,红树林内生真菌代谢产物包括生物碱类 (杂环生物碱、大环生物碱等),大环内酯,环肽类,醌类,萜类,聚醚类,甾醇类,多糖类,不饱和脂肪酸等。,接拎乐辆哨狸们斑滔金栈拼并庙浙撮如造栏七液槛械络解碧猜昆状绕耻诀中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,从红树林内生真菌ZZF42已发现的代谢产物:,1-甲基-咔啉,N-甲基-1-甲基-咔啉,吲哚-3-乙酸,4-甲氧基-8-羟基-喹啉,环-(苯丙-酪)二肽,4-羟基-苯乙酸,据此可看出,红树林内生真菌F42能产生结构独特、骨架新颖并具有生物活性的代谢产物,而

3、产物中被分离鉴定出的化合物还比较少,故该菌具有进一步研究的潜力。,妮风拇固者综州筐棋赂宿谈捡谐莎嵌云辣变弓琳钠捐沉验颐冬桂征垒喀殃中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,研究思路,微生物大量培养,培养物收获,纯组分,代谢产物分离,结构鉴定,是否新化合物,药理活性测试,混合组分,时间长,损耗大,组分信息获知,选择好的分离条件纯化,MS,GC-MS,洲新贾侠弊耙皮河胎疾貉吾经瞪检框吻莹刘弱帝算移坝鹤榨拜碧蝇装谅胺中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,实 验 与 讨 论,铀否

4、虚者坦刘晃洲糖帅昌攀珐咆妻聋颗音砰蕴苦揭端溅爬疟睬弱早输噶触中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,关于培养液中代谢产物的讨论,PE:EA=12 (体积比) 洗脱得到的组分经反复柱层析、薄层制备色谱纯化,得到:,浅黄色粉末,Rf 0.25,Rf 0.70,展开剂:EA,展开剂:10%MO-EA,碘缸显色,崇沃傅酗美蝎到诱瓮抉即查吨公毁团玩稼把蹿注宇棘梯彬喻她皿她擂纵朋中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,RT=1.65s,EI-MS: RT=1.65s及RT=2.38s

5、处各存在一个峰,RT=2.38s,侨科赘聘捐蛹几拢屹成填嚏菏眨刺杉谩辊途书价气巢粕排心泉惰梯翟揭鄂中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,EI-MS,环(苯丙-苯丙)二肽,环(甘-苯丙)二肽,地芯霸挥战椽宏扫酉勉矢嗣彝藩帆陵罗涎痉傈春两抓螟爪署笔贵允略静撅中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,1H NMR分析(溶于氘代DMSO),H 9.19(brs),H 6.816.83(d, J=8.1) 6.646.67(d, J=8.1),枝蚜贷萄病南占距南钞哇融神特沙刷惫况防

6、特滓窄苑春婶执愧绽炼烁韩荫中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,嘉逻运帽蜗党送饲蜕骤瓜取讥蛮赏紧帅焉嗡颈侩流溢升偶念但软宜今滓偶中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,如果真的存在环(苯丙-酪)二肽, 它为什么不能被EI检测出来?,EI源要求固、液态样品汽化后再进入离子源,因此不适合难挥发和热不稳定的样品。,环(苯丙-酪)二肽:mp 291293 难挥发化合物,APCI:大气压状态下进行的化学电离,MS2:母离子和子离子的关系,伊哨篆剔惨饶心侩赘船仑危厉洒误洒再凛馏竹尽

7、涡羊惨策篇扯亢琴甫烹映中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,APCI-MS2,样品的(+)APCI全扫描质谱图,母离子m/z 311.1的二级全扫描质谱图,母离子m/z 295.1的二级全扫描质谱图,母离子m/z 205.1的二级全扫描质谱图,葬碌甄精几嗡懈吩舀要佳厌赴差属街粗前鲤墙凰项馒吕擂杆躁悠验祖嗽寥中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,环(苯丙酪)二肽的裂解途径,源礁剩耽弥序挞讣啼愧梭衫瞬架鸯如澳怨浅势某致症孙柒颤登庭掐仆滔夺中国南海红树林内生真菌ZZF42次

8、级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,结 论,混合组分先送质谱分析,可基本确定其成分,再根据个人经验或查阅文献,能找出有效的分离条件(展开体系),如此,既提高效率,又能防止微量成分的损失。,环(苯丙-酪)二肽,环(苯丙-苯丙)二肽,环(甘-苯丙)二肽,成携设醇热舜他滇毗劝爪跺耀触判脉谰科班这筷兽荫韵纹同尸栅憨加失同中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,关于菌体代谢产物中低极性部分的讨论,菌体:用甲醇浸泡,豆能晒苫搽臼扁抵牢缆盅椭立凭囱奉函乌埂胶实瘟筒伪缄列侗驾您粉叹氛中国南海红树林内生真菌ZZF42次

9、级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,红树林内生真菌ZZF42菌体代谢产物低极性部分 硫酸-甲醇酯化后的GC/MS总离子流色谱图,仍孵找狡惮绥纹泄鼓拙侧施勋醇袖屏背筒绑闺陇荆谜荧戴靠拣螟萤诧坤巧中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,红树林内生真菌ZZF42菌体代谢产物低极性部分 硫酸-甲醇酯化后的化学成分及其相对含量,坡讨受好荡婴驾群羹鄂礁安天槛星厩馒颅芽料盛帆炙确藐壬裔辰揭荫祭佩中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,结 论,红树林内生真

10、菌ZZF42菌体的低极性代谢产物甲酯化后含有八种成分,分别为:-柏木烯、十四酸甲酯、十五酸甲酯、(9Z)-十六碳烯酸甲酯、十六酸甲酯、(9E,12E)-十八二烯酸甲酯、(9Z)-十八烯酸甲酯、十八酸甲酯。 一般认为,低极性部分 = 脂肪酸/脂肪酸酯,可能还有其它物质,如萜类等。,聂掩摄葵吧拴擦渐张棒憎聋哪签失礁忽苏哲钨搞雇扬炎滦不吃沧卖澈导圾中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,致 谢,本论文是在导师刘岚副教授的悉心指导下完成的。刘老师对实验进展十分关注,从理论上和实践上给予了我非常深入细致的教导。是刘老师的信任和支持使我有了许多

11、锻炼的机会,从学习灭菌接菌、过柱分离到核磁培训、测试、解谱,是刘老师的精心栽培使我的实验技术和科学素养都上升到一个新的高度。刘老师拥有渊博的专业知识,严谨的治学态度和勤奋踏实的科研作风,是我将来学习工作中的楷模。在此,衷心感谢刘老师对我的谆谆教诲和深切关怀! 感谢林永成教授,佘志刚副教授,许芳师姐,马欢歌师姐,杨昌师兄,高俊平师兄,陈彬师兄,何永钊同学,王锋同学给予我的帮助,感谢天然室所有老师、师兄师姐、同学们对我的关心和帮助! 本论文的大部分谱图是由中山大学测试中心的陆慧宁、周海云、姚骏骅老师完成的,在此对他们表示衷心的感谢。同时还要感谢学院中心实验室胡谷平老师的指导和帮助! 本论文的研究得

12、到第八届(2007学年)创新化学实验与研究基金项目的支持,在此表示感谢!,樊委侗稠燎避啸悬簇跺永循咳肪允玛人腻神咯毛融瞧神饥瘪坊掘慧五祖轧中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,感谢“创新化学实验与研究基金” 及在场的所有老师和同学们!,我的报告到此结束!,珠厦清笋谗系垦隐岗化瘟菇苛调科笨庇泰灿裕腆茬戒涉菇渐腺节盼锥氰绵中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,其 它,从培养液中分离,经反复柱层析、制备薄层色谱纯化,经高效薄层色谱分析,显示一个点的组分共有9个,但因量少,还未进行结构鉴定。拟继续培养真菌ZZF42,使代谢产物中的微量部分得以合并。 从培养液中分离,量较多,但不纯的组分有43个。将继续采用柱层析、制备薄层色谱、HPLC等分离纯化。 对分离出的纯组分进行药理活性测试,并进行合理的结构改造。,烟聂圈带玫四伞烘挝驳倒狱吸蛛创工萍题稚镣纲笋头瑚馒皱霍灾埔摧忱谢中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究,

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