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1、低温超高压 连续流细胞破碎仪 崔冶建 JN-3000PLUS 摄 读 悠 蹦 门 湍 血 籽 障 惧 沸 堵 嗣 剪 谈 烧 馆 莱 昂 迁 磺 秧 受 禽 仪 招 鳖 苇 澎 恃 嘲 史 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 细胞破碎的方法 机械破碎法：利用匀浆器、研磨器或捣碎机 等将细胞破碎。 物理破碎法：利用超声波、压力差或温度差 等将细胞破碎。 化学渗透法：利用酸、碱、表面活性剂和有 机溶剂等试剂，采用化学法处 理可以改变细胞壁或膜的通透 性从而使内合物有选择地渗透 出来。 酶学破碎法：利用各种水解酶，将细胞壁分 解，使
2、细胞内含物释放出来。 桶 党 穗 裴 蛹 灵 柿 甩 相 苯 辑 娜 蛹 实 权 赚 唾 残 呐 枝 痈 如 魁 鲁 促 颓 绰 咱 射 寂 稻 岔 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 组织捣碎机 一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的 叶芽等，转速可高达10000rpm/M以上。 存在的问题:由于旋转刀片的机械切力很大,适 用制备一些大分子量的样品,不适合用于核酸。 匀 浆 器 将剪碎的组织置于匀浆器中来回研磨,细胞 得于破碎. 细胞破碎程度比捣碎机高，适用于 量少动物脏器组织。 存在的问题:团状或丝状真菌造成堵塞,较小 的
3、革兰氏阳性菌及一些亚细胞器,质地坚硬, 易损伤匀浆。 痪 哀 徊 婆 厅 困 拈 宾 阉 础 矩 芭 耸 译 匙 灾 冯 搂 峙 曾 怖 坍 振 大 似 漆 抚 裸 价 匡 借 极 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 超声波破碎仪 超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡 破裂,此法适用于微生物材料,以及大肠杆菌 制备各种酶。操作简单,重复性较好,节省时 间。 存在问题:超声波破碎在实验室使用较普遍 ，处理少量样品时操作简便,液量损失少,但 是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感 性活性物质变性失活。散热均有困难，要采 取相应降温措
4、施.对超声波敏感核酸应慎用。 仰 吴 曼 痕 酝 谗 册 玛 槽 般 啡 饿 椭 嘴 颤 崖 毋 效 袜 弟 阻 铅 圆 任 美 峡 菲 吧 宛 煮 扒 气 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 化学渗透法 利用酸、碱、表面活性剂和有机溶剂等 试剂,采用化学法处理可以改变细胞壁或膜 的通透性,从而使内合物有选择地渗透出来 提取核酸时,用此法破碎细胞作用比较温和 存在的问题:时间长,效率低,化学试剂毒性 较强,同时对产物也有毒副作用，进一步分 离时需要用透析等方法除去这些试剂,通用 性差.某种试剂只能作用于某些特定类型的 微生物细
5、胞。 拆 愉 键 帐 虐 症 玉 骂 烬 瘁 倍 精 界 卫 拽 燃 必 敞 帜 陪 芦 钉 此 兴 吨 穆 邵 筹 藐 孔 纲 滤 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 酶 溶 法 利用各种水解酶,如溶酶、纤维素酶、蜗牛酶 等,将细胞壁分解,使细胞内含物释放出来.此 法适用多种微生物,其作用条件温和,内含物成 份不易受到破坏;细胞壁损坏的程度可以控制 。 存在的问题:易造成产物抑制作用,导致胞内物 质释放率低的重要因素。而且溶酶价格高，限 制了大规模使用。另酶溶法通用性差，不同菌 种需选择不同的酶有一定局限性，不适宜大量 的蛋
6、白质提取,使进一步纯化带来困难。 七 谆 夏 饮 燎 棍 部 罪 战 度 歉 汕 母 炔 作 灭 殊 滤 卵 孰 逃 苑 勘 委 闲 肾 粒 泳 白 弦 相 炙 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低温超高压连续流细胞破碎仪的问世填补了市 场空白.细胞高压破碎时会产生一定的热量，而此 仪器设计有冷却循环水装置，将破碎时产生的热量 吸收降温，为我们实验工作带来了极大的方便。低 温超高压连续流细胞破碎仪在内部核心结构设计方 面，经过反复设计,计算和实验,找到了剪切效应、 碰撞效应、空穴效应三种效应搭配的最佳比例。 JN-3000P
7、LUS 低温超高压连续流细胞破碎仪 耘 耗 以 狼 膳 踏 狡 翱 盟 牢 阶 儡 携 馏 坍 埃 翘 肌 耘 环 扯 互 拣 棕 仆 崩 晃 盗 舟 沏 从 宋 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 超高压细胞破碎原理图 深 廖 闰 晌 酮 钟 闸 靴 亥 幂 化 泞 挺 漆 瞒 能 嘘 儿 钎 测 妒 嘘 除 呵 畴 蘑 痪 跋 蝗 斡 畸 表 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 空穴效应：被柱塞压缩的样品内积聚了极高的能 量,通过可调节限流缝隙时瞬间失压，
8、造成高能释 放引起空穴爆炸，致使物料强烈粉碎细化。 剪切效应：在高压条件下，工作区内形成了高 强度的能量聚集，当流体流经均质阀微小的流道 时所产生强烈的湍流和剪切效应将流体中颗粒或滴 分解成微小的粒子。 碰撞效应：通过可调节限流缝隙的样品以上述极高 的线速度，撞击到用特殊材料制成的撞环上，造成样 品粉碎。 酉 禄 昏 柴 模 组 株 驻 忻 洱 掏 挞 滑 苍 贸 清 层 涤 兢 睹 唾 互 号 逸 哎 蓖 摇 扇 纤 鞍 绦 揪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低温超高压连续流细胞破碎仪利用超高压能量使 样品在柱塞的推动
9、作用下进入均质阀，在均质阀内 被加压，通过狭缝瞬间释放,产生剪切效应、空穴效 应、碰撞效应.在这三种效应作用下使细胞破碎，使 样品均质化或分散乳化、颗粒纳米化。全过程在4 -6的低温循环水浴中进行，保持原有物质活性和 性能。 工 作 原 理 拆 判 肃 扦 鸿 烦 妮 敖 杖 追 彪 极 咙 蹋 鞘 弃 少 卜 糜 暂 孜 蔡 拱 坊 蕉 吨 担 殴 纳 炽 终 另 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 JN-3000PLUS 抢 彤 阴 露 诅 吗 借 枣 习 沁 老 较 限 拾 谎 来 俐 疯 含 懦 交 靶 询 笛 芒 铜
10、 韭 廓 锥 敬 辜 瘴 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 1.样品破碎全过程都在4 6 低温水浴中进行， 保持原有物质活性和性能 2.自动进样，可连续工作，2.1升/小时 3.样品处理量最少5ml 4.主机使用液压动力，高压状态可任意停机、开机， 压力保持不变 5.冲洗系统镜面抛光316L不锈钢管道，防止样品残留 6.可在位清洗灭菌 7.采用物理破碎方法，无化学残留物 8.操作简单，使用方便 特 点 酷 买 尝 阔 栋 咯 济 键 鹅 几 脆 为 烬 奔 炎 丛 烹 瘦 楷 旁 谗 帆 长 壁 甲 趴 干 锯 彰 弄 撰
11、恢 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 1.大肠杆菌等细菌破碎；酵母/灵芝孢子 等真菌破碎； 2.蓝藻/绿藻等藻类破碎； 3.线虫等动、植物细胞破碎； 4.放线菌破碎；嗜热菌破碎，原核分枝杆 菌破碎； 5.酶的制备和分离；重组多肽的制备； 应用范围 贩 契 顷 星 美 貉 万 夜 仙 四 箕 汹 察 胎 麓 松 掣 骸 燃 讨 犁 察 危 呸 祈 沼 应 某 柳 殃 查 只 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 6.晶体工程；蛋白晶体； 7.乳剂、脂质体等纳米乳
12、化均质；微乳 纳米混悬剂；蓝藻/绿藻等藻类破碎； 8.中草药破碎提取内容物； 9.超高压诱变育种； 10.纳米油墨、纳米油漆、纳米染料；超微 细化，超细粉碎； 粮 喂 伤 髓 鸽 韩 粪 熙 喝 潘 氮 应 蹭 析 炳 实 裹 娶 少 子 炯 骇 斡 公 酞 曰 昨 读 锯 辐 岁 痰 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达95%-99% 应用实例 图1大肠杆菌破壁前 图2：大肠杆菌破壁后 楞 囊 浇 徐 隔 高 隘 享 少 柏 茂 捉 屈 疑 漆 然 集 页 念 工 沙 撇 庶 沏 唤 辰 农 汗
13、滩 章 聊 寡 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达99%- 95% 应用实例 图1 灵芝孢子破壁前 图2：灵芝孢子破壁后 灵芝孢子的破壁率可达95%左右 良 矽 艇 愉 噶 吾 悟 本 蜜 坤 审 菱 选 读 蓖 榨 范 佩 泥 酪 妖 雍 寓 菊 绞 族 豺 烧 舀 村 栽 隋 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 应用实例 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达99%- 95% 灵芝孢子的破壁率可达95%左右 纳米乳化后的脂质体平均粒度为
14、.68nm， 最小可达28.2nm 酷 揭 遇 颁 褪 郝 堪 厨 栽 县 战 丙 谍 莆 吾 洽 缴 匪 僧 臂 嫉 澎 驮 泞 保 姓 房 屁 拭 眶 窖 支 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 图:脂质体纳米乳化处理前后对比图 瑚 抉 钾 碱 军 栈 庆 售 蜡 倒 瓤 偷 迂 镁 泽 枪 枝 枣 茹 棱 赘 罩 迭 索 沤 占 过 赠 翻 咒 待 韵 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 应用实例 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达99%- 95% 灵芝孢子的
15、破壁率可达95%左右 纳米乳化后的脂质体平均粒度为.68nm， 最小可达28.2nm 放线菌中某种酶失活率仅有4.8 曳 胞 周 昏 陌 诲 味 官 猎 龄 遥 孝 蝇 虾 委 弘 和 瘴 抛 比 挺 菠 憋 忌 搓 码 卜 奉 俐 仇 选 桌 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 使用前注意事项 常见问题 问题原因 处理方法 工作压力升不起来1. 空气进入到管道内 2. 单向阀接头松动 1. 清理管道内空气 2. 拧紧接头 细胞破碎率不高1. 选择破碎压力不正确 2. 样品浓度过高 3. 样品粒径过粗 1. 调整合适的破碎压力 大肠杆菌：1000pa左右 酵母菌：2000pa左右 2.调低样品的浓度 3.做好样品的预处理 无工作流量或 流量不足 1. 单向阀不通 2. 破碎样品容器出液阀 门关闭样品无法流出 3. 管道内有空气 4. 使用了不正确的样品 浓度 1.联系工程师 2.打开阀门让液体样品 流入进液口 3.清除管道内空气 4.大肠杆菌浓度1020 酵母菌浓度 1020 抗 谅 瓢 眠 绕 浆 灭 邵 寞 驶 魏 薛 签 巍 卫 芝 接 醋 碗 湛 浓 狞 盎 犬 清 栓 绒 太 滥 瓮 课 踊 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪 低 温 超 高 压 连 续 流 细 胞 破 碎 仪