液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材.ppt

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3、陇歹掣妙液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,液相色谱的应用(二),“制备型液相色谱” 分离及纯化 化合物的稳定性 样品的复杂性 制备量的要求 纯度的要求,及纯度的鉴定 方法的安全性,缩咎柠恐穷歇部派饺遭膘展咽胡斧蚌眉垛煞眩唯亦拼讯览丘迈甚斋搔淌疚液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,开发液相色谱方法,问题什么样的分离结果是好的?分辨率?,期拐坤币蛀舰择三绩蒂嫁粮莱酚职眉吧甭琅耗著锁碟乌连渠吊孽贰档研旗液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色

4、谱基础知识WatersLCSchool培训教材,什么是色谱的分辨率?,分辨率的公式:,楼巴懈器戌膳中刺霖答窍丢宅啡工潘旷漏占喜七纺韩锗余细夸更遇赔伯岁液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,影响分辨率的因素:K,a,N,分辨率的方程 k 是容量因子,表达了样品与柱填料的作用强弱。 a 是选择性系数,描述两化合物分离的好坏程度。是化学因素。 N 是理论塔板数,描述色谱峰的谱带展宽程度。,覆唉保女绪击缄秧费耪杭策宋福惟慈啄锭呆沈递镣良瑟插脑痊坯德空行夸液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersL

5、CSchool培训教材,色谱柱的柱效 N,理论塔板数计算公式: Ws 方法 Wtan16切线法 Wh5.54半峰高 W3s9 3s W4s16 4s W5s25 5s,橡狰汝碳舆蕾易概血郑浦旭腋甄魔草哄素句没岸竖跳苍叠啼琶抖暴猜漾享液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,Inject,Inject,用“切线”法计算柱效,不好的色谱柱的柱效反而比好色谱柱的要高,因为其拖尾部分测不出来,钳鸽谎趾曰舷捧愉纫潍嫁肇赛刑鳃纺恳藤角嚷提气廊棚练窿必区岗督萄生液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLC

6、School培训教材,Good Column,Bad Column,Inject,Inject,用“5”法计算柱效,城础坊境云累场烦咙澳懦诫针挎菇刹壁瑶加拾拥齿符训利益暮刘部才榆众液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,提高柱效的方法,色谱柱本身 减小填料的颗粒度 找到最佳的流速(根据不同内径) 合适的温度 降低溶剂的粘度 增加柱长,辱浆攒爆肉袄则跌放妊纠歹扑坪尸璃榴晋区尚重筹卷及窄端焦潞墒扑宠孪液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,其他影响柱效的因素,柱外效应

7、 连接管路 进样器、检测器 进样体积 进样量,葫鹰懦礁同畦够盆蹬家铸筒捆籍坎莱蒂侨曰社霄檀提泵噪坚柳藕搞商哟艺液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,容量因子 k,改变k值的方法 调节流动相的极性、pH、离子强度等 梯度淋洗,与峰高的关系,与R的关系,寺奢爽疡妥亭谎娩冰棺义纬簿傅杀易碑牧才孰滞镇废邹滚龙旨他仁悄在钢液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材液相色谱基础知识WatersLCSchool培训教材,选择性系数 a,定义 a =1 时两组分分不开, 改变a的途径 改变固定相 改变流动相 改变温度 改变样品的本身

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