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1、免疫浊度测定 及其临床应用,免 疫 测 定 IMMUNOASSAY I A,免疫测定原理 利用抗原抗体反应检测标本中微量物质 抗原+抗体 抗原抗体复合物 Ag +Ab Ag * Ab,免疫测定特点 特异性 抗原性不同的物质不干扰 敏感性 g-ng-pg 可测物 蛋白质，酶，激素，药物 ， 毒品,免疫测定分类,免疫浊度测定 g ng 标记免疫测定 ng pg,免疫浊度测定,免疫沉淀反应,海德堡曲线 Heidelbergs Curve,抗体过剩,抗原过剩,Ag * Ab,免疫浊度测定分类 透射浊度法 散射浊度法,透射浊度法和散射浊度法的光路,检测器A,(透射浊度法),检测器B,(散射浊度法),I0
2、,I,浑浊 样品,光源,散射浊度法,Analyte Antibody Other stuff,Analyte-antibody complexing,What happens inside the flow cell?,Fluid in the cell has causes little scatter,Adding sample increases scatter slightly,Adding antibody causes a large increase in light scattering,免疫浊度测定分类2,终 点 法 速 率 法,终 点 法 固定时间法,速率散射浊度法,速率峰
3、的测定,速率峰的测定,抗原过剩的测定,RATE of SCATTER,抗体过量时的反应,抗原过量时的反应,60,85,0,反应时间(秒),ARRAY抗原过量自动检测,加入校正液,药物浓度测定,免疫浊度抑制测定 (小分子物质),免疫浊度测定试剂,抗体试剂的要求,1 特异性,2 亲和力,3 反应时保持抗体过剩,测定范围应包括高于及低于 正常值的50%,5 测定的精密度应在5%左右,校正曲线：聚乙二醇的增强作用,抗原浓度,C1,C2,C3,吸光度,4%聚乙二醇,不加聚乙二醇,试剂组成配方举例,试剂1 100mmol Tris或磷酸缓冲液 pH7.2 8.2 4% 聚乙二醇(分子量6000或10000
4、) 1%非离子型表面活性剂 150mmol氯化钠或硫酸钠 0.1 g/l 叠氮钠,试剂2 100mmol Tris或磷酸缓冲液 pH7.2 8.2 20% 多克隆羊抗血清 150mmol氯化钠 0.1 g/l 叠氮钠,抗体过剩,抗原过剩,Ag * Ab,技术特性,并行的检测系统: Rate NIPIA Rate Nephelometry,NIPIA：近红外颗粒速率法免疫分析,Benefits Ability to expand the menu into high sensitivity assays including: Ferritin, Digoxin, and IgE. NIR eliminates the interference of biological substances such as biliribin and hemoglobin.,NIPIA：近红外颗粒速率法免疫分析,优点 扩展检测菜单，增加高敏项目分析： 如铁蛋白，地高辛 ，IgE，超敏CRP等 近红外波长分析消除生物物质如胆 红素和血色素的干扰,NIR：940nm波长 近0oC检测角 检测颗粒大小：200500nm直径 速率法测定,NIPIA： 940nm LED光源 速率散射法：670nm 激光光源,蛋白应用分类,心血管功能监测 载脂蛋白A1 载脂蛋白B 脂蛋白a,