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1、第三节 色谱法,高效液相色谱,一、概述 1、基本概念：又称层析法。是利用混合物中各成分的物理化学性质差异，使各成分得到分离的一种方法。,2、分类： 按两相所处的状态分：,液相色谱,液固色谱,液液色谱,气固色谱,气相色谱,气液色谱,按原理分:,离子交 换色谱,吸附色谱,凝胶色谱,分配色谱,按操作形式分:,柱 色 谱,纸色谱,薄 层 色 谱,一、吸附色谱法： 主要是指以吸附剂作为固定相，以液体作为流动相的液固色谱法。,（一）基本原理： 利用固定相吸附剂对混合物中各成分的吸附能力的差异，以及流动相对各成分解吸附能力的差异，而使各成分得以分离。流动相解吸附。,吸附解吸附再吸附再解吸附,（二）、吸附剂、
2、移动相与被分离成分 1、吸附剂：应具有较大的表面积和足够的吸附能力，颗粒要均匀，具有一定的细度；不与流动相、溶剂及样品中各成分发生化学反应，在流动相及所用的溶剂中不溶解。,常用的吸附剂：,氧化铝,硅胶,氧化铝： 碱性 分为： 中性 酸性 硅胶：含水越高，吸附能力越小。,2、移动相：是由一种或几种溶剂按一定比例组成的溶剂系统，在色谱过程中的主要作用是解吸附。 根据被分离成分的极性选择移动相。极性小选择极性小的溶剂；移动相的极性越大，成分的迁移速度越快。,3、被分离成分：在吸附色谱中当吸附剂和移动相固定时，被分离成分的被吸附情况取决于它的结构和性质。通常极性越大的成分被吸附剂吸附性越强；同系物中碳原子少者比碳原子多者被吸附性强；分子中双键或共轭双键多者被吸附性强；母核相同时，取代基的极性越大被吸附性越强。,（三）操作技术：,原点至斑点中心的距离 Rf = 原点至溶剂前沿的距离,a A成分的Rf = c,作业：P4380,