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1、广西扶芳藤的质量控制研究目的 : 扶芳藤在广西民间常用于风湿跌打及各种血症, 在临床上用于月经不调 , 风湿痹痛 , 腰肌劳损 , 创伤出血等。为了进一步开发和利用扶芳藤药材 , 本课题利用薄层色谱法对广西产扶芳藤中的主要有效成分进行鉴别和研究。利用响应面法对扶芳藤的成分卫矛醇进行提取工艺优化和含量测定研究, 并且对广西不同产地的扶芳藤药材进行红外指纹图谱和 HPLC指纹图谱的分析与研究。为扶芳藤的质量控制提供相关数据与参考 , 可以进一步地开发和利用这一广西民族药材而提供科学依据。方法 :1 、对采集的广西不同产地的药材进行进行定性研究 , 首先采用 TLC法进行鉴别 , 以 30%乙醇超声
2、提取方法 , 以硅胶 G板为薄层色谱板 , 点样量为 4ul, 吡啶 - 乙酸乙酯 - 水 - 甲酸 (8:15:4:1) 作为展开剂展开 2、采用红外光谱法进行鉴别 ,应用 Omnic 红外软件得到各批次扶芳藤的红外谱图, 建立红外指纹图谱和药材共有模式 , 运用 SPSS 22统计学软件对 25 批样品进行共有峰确认及相似度评价 , 并进行聚类分析。 3、在应用响应面法优化扶芳藤中卫矛醇的提取工艺中 , 通过单因素考察液相的色谱条件和提取方法得出中心值 , 按照 Box-Benhnken 的中心组合试验设计的理论 , 对实验结果采用 Design-Expert v8.0.6 统计软件进行响
3、应面回归分析。然后进行方法学考察和含量测定。4、对十批广西不同产地的扶芳藤, 通过单因素考察供试品溶液的的制备方法和液相色谱条件, 建立广西扶芳藤药材HPLC指纹图谱 , 并建立药材共有模式图 , 采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012.1 版软件对各批次扶芳藤样品进行共有峰确认和相似度评价。运用 SPSS22 统计学软件对 10 批广西扶芳藤药材的HPLC指纹图谱进行聚类分析与主成分分析。结果:1 、采用薄层色谱对不同产地的扶芳藤进行鉴别, 结果显示不同产地的扶芳藤斑点大致相同, 可以对扶芳藤药材进行定性鉴别。2、运用红外光谱对不同产地的扶芳藤进行测定, 结果显示不同
4、产地的扶芳藤红外光谱图图形相似 , 具有相同的红外光谱特征峰, 证明了扶芳藤中的特征结构,可以作为鉴别扶芳藤的一个指标。并且25 批广西扶芳藤样品指的红外纹图谱的相似度都大于0.9,通过聚类分析可将不同产地的25 批扶芳藤样品分为5 类。3、基于HPLC-ELSD法的响应面法优化扶芳藤中卫矛醇的提取工艺, 以32%乙醇 , 物料为 1:9, 提取时间为 66min 为最佳提取工艺 , 并且得出扶芳藤中卫矛醇的提取率是 2.915%,然后利用 HPLC-ELSD法测定其含量 , 经方法学论证 , 线性关系良好 , 且卫矛醇的进样量在 2.24ug22.4ug 范围内 ; 仪器的精密度和样品的稳定性良好 , 加样回收率是 99.47%。4、用色谱评价系统软件共标定出共有色谱峰十一个 , 从中选取了特征明显、吸收峰强且稳定性好的色谱峰八个 , 并作为共有峰 , 用槲皮素对照品指认了其中的 1 个共有峰 (6 号峰 ) 。10 批扶芳藤样品指纹图谱的相似度 , 除了一个样品的相似度值接近 0.9, 其余都大于 0.9 。通过聚类分析 , 可以将不同产地的 10 批样品分为 2 类, 并且 3 个主成分的累计方差贡献率为 90.26%。