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1、辣椒素对水浸束缚应激大鼠胃动力的作用及机制研究目的：通过研究辣椒素（capsaicin ， CAP）对水浸 - 束缚应激（ waterimmersion-restraint stress ，WIRS）大鼠胃酚红排空率的影响，检测血浆胃动素（ motilin ，MTL）水平，胃窦组织辣椒素受体（ transient receptorpotentialvanilloid subtype1 ，TRPV1）、P 物质（ substance P ，SP）及酪氨酸激酶受体（ c-kit ）的表达，胃窦组织 c-kit mRNA及干细胞生长因子（ stem cell factor ， SCF）mRNA的转录
2、水平，探讨 CAP对大鼠胃动力的作用及机制。方法：（ 1）自制 CAP饲料：精确称取 95的 CAP105.3mg（含 CAP100mg），完全溶解于30ml 的食用油中，再加入食用面粉100g，混匀，所得即为CAP含量为 1mg/g 的饲料。（2）WIRS大鼠模型的建立： SD大鼠 20 只，随机分为正常组与模型组。模型组每日 WIRS1小时，连续 4 周，正常组自由进食，连续4 周。（3）CAP干预实验动物分组： SD大鼠 40 只，随机分为 4 组：A 组（正常对照组），B 组（ WIRS组），C 组（WIRS+CAP组），D组（CAP组）。（ 4）具体方法： A组自由摄食进水，连续4
3、周； B组每日 WIRS1小时后自由摄食进水，连续4 周；C组每日 WIRS1小时后喂食 CAP饲料（ CAP含量为 1mgg）5g kg只，待 CAP饲料食用完后，再给予普通饲料喂养，连续4 周； D组每日喂食 CAP饲料（ CAP含量为 1mgg） 5gkg只，待 CAP饲料食用完后，再给予普通饲料喂养，连续 4 周；4 周后所有大鼠禁食 24 小时，于次日早晨给予浓度为 50mgdL 的酚红溶液灌胃， 2ml/ 鼠，灌胃 30min 后麻醉处死大鼠。（5）检测指标：收集胃内容物，测定胃酚红排空率。 腹主动脉取血 2ml，4离心后提取上清液，用Elisa法检测血浆 MTL水平。肉眼观察大鼠
4、胃粘膜损伤指数并进行病理组织学检查。取胃窦组织包埋、切片后用免疫组化方法检测TRPV1、SP及 c-kit的表达。取胃窦组织用 RT-PCR方法检测 c-kitmRNA、SCFmRNA的转录水平。结果：1. 模型验证：（ 1）动物一般情况：实验过程中，正常组大鼠一般状态好，活动灵活，进食正常，大小便正常，无死亡；模型组大鼠精神状态差，行动迟缓，进食较少，大便干结，但无死亡。（2）大鼠胃酚红排空率：正常组、WIRS模型组大鼠胃酚红排空率分别为：61.76% 1.22%，53.07%2.19%，WIRS模型组胃酚红排空率显著低于正常组（P 0.05 ）。2. CAP干预的结果：（1）动物一般情况：
5、 实验过程中各组大鼠无死亡，其中 A 组大鼠一般状态好，活动灵活，进食正常，大小便正常； B 组大鼠精神状态差，行动迟缓，进食较少，大便干结； C 组大鼠一般状态良好，活动稍迟缓，进食正常，大小便正常； D 组大鼠一般状态好，活动灵活，进食较多，大小便正常。（2）大鼠胃酚红排空率： A 组 62.91%1.10%，B 组 55.33%1.79%，C组61.88% 2.07%，D组 70.78%2.42%，其中 B 组胃酚红排空率显著低于A 组、 C组、 D组（ P0.05 ），D 组胃酚红排空率显著高于A 组（ P0.05 ），A 组胃酚红排空率与 C 组比较差异无统计学意义（P0.05 ）。
6、（ 3）大鼠血浆 MTL水平： A 组190.30 1.68pg/ml ， B 组 179.75 1.72pg/ml ，C组 200.06 2.06pg/ml ，D组201.37 1.45pg/ml ，其中 B组血浆 MTL水平显著低于 A组、C组及 D组（ P 0.05 ），A 组血浆 MTL水平显著低于 C组、 D 组（ P0.05 ），C组血浆 MTL水平与 D组比较差异无统计学意义（ P0.05 ）。（4）免疫组化方法检测结果：大鼠胃窦组织TRPV1表达积分结果： A 组2.30 0.48 分， B 组 2.20 0.42 分， C组 3.30 0.48 分， D 组 3.60 0.5
7、2 分，其中 A 组 TRPV1表达水平显著低于C 组、 D组（ P0.05 ），B 组 TRPV1表达水平显著低于 C 组及 D 组（P0.05 ），A 组 TRPV1表达水平与 B 组差异无统计学意义（ P 0.05 ），C组 TRPV1表达水平与 D组差异无统计学意义（ P0.05 ）。大鼠胃窦组织 SP表达积分结果： A 组为 2.00 0.47 分， B 组为 1.20 0.42 分，C组为 3.20 0.63 分，D组为 3.50 0.53 分，其中 B 组 SP表达水平显著低于 A 组、C组及 D组（ P 0.05 ），A 组 SP表达水平显著低于C 组及 D 组（ P0.05
8、），C 组SP表达水平与 D组差异无统计学意义（ P0.05 ）。大鼠胃窦组织 c-kit表达积分结果： A 组 1.30 0.48 分，B组 0.80 0.42分， C组 1.50 0.53 分， D 组 1.70 0.48 分，其中 B 组 c-kit表达水平显著低于 A 组、 D组（ P0.05 ）， A 组 c-kit 表达水平与 C 组、 D组差异无统计学意义（ P 0.05 ），B组 c-kit 表达水平与 C组差异无统计学意义（P0.05 ），C组 c-kit表达水平与 D 组差异无统计学意义（ P0.05 ）。（ 5）RT-PCR方法检测结果：大鼠胃窦组织 c-kit mRNA
9、 表达量结果： A 组为 0.624 0.016 分， B 组为 0.606 0.011 分，C组为 0.622 0.011 分，D组为 0.633 0.013 分，其中 B组 c-kitmRNA转录水平显著低于A 组、 D组（ P0.05 ），A 组 c-kit mRNA 转录水平与 C 组、 D组差异无统计学意义（ P0.05 ），B 组 c-kit mRNA 转录水平与 C组差异无统计学意义（P0.05 ），C组 c-kitmRNA转录水平与 D组差异无统计学意义（ P 0.05 ）。大鼠胃窦组织 SCFmRNA表达量结果：A组为 0.894 0.011 分，B组为 0.853 0.00
10、9 分，C组为 0.932 0.009 分，D组为 0.949 0.012 分，其中 B 组 SCFmRNA转录水平显著低于A 组、 C组及 D组（P0.05 ）， A 组 SCFmRNA转录水平显著低于 C 组、 D组（ P0.05 ）， C 组 SCF mRNA转录水平与 D 组差异无统计学意义（ P 0.05 ）。（ 6）胃粘膜损伤指数及病理组织学检查结果：胃粘膜损伤评分 （Guth标准改良评分）：A 组 0.40 0.52 分，B 组 2.90 0.74分，C 组 1.40 0.52 分，D组 0.50 0.53 分，其中 B 组胃粘膜损伤评分显著高于A 组、 C 组及 D 组（ P0
11、.05 ），C组胃粘膜损伤评分显著高于A 组、D 组（ P0.05 ），A 组胃粘膜损伤评分与 D 组差异无统计学意义（ P0.05 ）胃粘膜病理组织损伤积分（Masuda标准方法）：A 组 0.30 0.48 分， B 组 3.70 1.89 分， C组 1.60 0.70 分， D 组0.40 0.52 分，其中 B组病理组织损伤积分显著高于A组、C组及 D组（P0.05 ），C组病理组织损伤积分显著高于A 组、 D 组（ P0.05 ），A 组病理组织损伤积分与 D 组差异无统计学意义（ P0.05 ）。结论：（ 1） WIRS能成功建立胃动力障碍动物模型。 （ 2）正常大鼠摄食小剂量 CAP饲料 4 周可促进胃动力。（3）WIRS大鼠摄食小剂量CAP饲料 4 周可改善胃动力。（4）CAP影响正常及 WIRS大鼠的胃动力可能与 CAP调节 TRPV1、SP的表达及 MTL的释放有关。（5）CAP可能对 SCF的表达有一定影响，但与 c-kit 、Cajal 间质细胞的相关性尚不明确。