1、 李李 奎奎 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所撰写国家自然科学基金申请书的几撰写国家自然科学基金申请书的几点体会点体会-兼论课题组长在基金申报中的作用兼论课题组长在基金申报中的作用兼论课题组长在基金申报中的作用兼论课题组长在基金申报中的作用(个人观点、个人理解,不能作为依据,仅供参考)个人观点、个人理解,不能作为依据,仅供参考)第一部分第一部分撰写申请书的体会撰写申请书的体会国家自然科学基金国家自然科学基金国家自然科学基金国家自然科学基金申报评审程序申报评审程序申报评审程序申报评审程序(申报人角度)(申报人角度)形式审查形式审查形式审查形式审查专家函评专家函评专
2、家函评专家函评 (海外专家)海外专家)海外专家)海外专家)基金委根据专家点评结果确定会评项目基金委根据专家点评结果确定会评项目基金委根据专家点评结果确定会评项目基金委根据专家点评结果确定会评项目会议评审(答辩)会议评审(答辩)会议评审(答辩)会议评审(答辩)基金委确定资助项目基金委确定资助项目基金委确定资助项目基金委确定资助项目一、国家自然科学基金申报评审程序一、国家自然科学基金申报评审程序 二、仔细研究基金委当年指南二、仔细研究基金委当年指南确定申请类型确定申请类型面上项目面上项目面上项目面上项目 青年基金青年基金青年基金青年基金 地区基金地区基金地区基金地区基金 重点项目重点项目重点项目重
3、点项目 重大研究计划重大研究计划重大研究计划重大研究计划 地区联合基金地区联合基金地区联合基金地区联合基金 优青优青优青优青 杰青杰青杰青杰青 创新创新创新创新 海外及港澳青年合作基金海外及港澳青年合作基金海外及港澳青年合作基金海外及港澳青年合作基金 国际合作国际合作国际合作国际合作国家自然科学国家自然科学国家自然科学国家自然科学基金项目分类基金项目分类基金项目分类基金项目分类【注注】:(:(1 1)不同项目有不同的写法,种类很多机会也很多,认真研究指南确定不同项目有不同的写法,种类很多机会也很多,认真研究指南确定 重要申报类型。重要申报类型。(2 2)重点项目、重大研究计划、地区联合基金、重
4、大国际合作,按)重点项目、重大研究计划、地区联合基金、重大国际合作,按 指南申报,首先是争取立项,写入指南。指南申报,首先是争取立项,写入指南。三、选择申报学科(不同学科,不同写作思路)三、选择申报学科(不同学科,不同写作思路)n n选择选择自己人脉广的学科;自己人脉广的学科;n n选择专业对选择专业对口的学科;口的学科;n n选择选择自己有自己有优势优势的学科;的学科;n n慎重慎重选择选择两个学科(主、两个学科(主、辅辅学科);学科);n n同一同一课题组课题组相近相近项项目最好目最好选择选择不同学科;不同学科;n n根据学科根据学科调调整写作思路。整写作思路。四、全面了解基金项目评审要点
5、四、全面了解基金项目评审要点2012201220122012年度指南中指出:年度指南中指出:年度指南中指出:年度指南中指出:生命科学部一直坚持积极鼓励开展具有创新性学术思生命科学部一直坚持积极鼓励开展具有创新性学术思想和新技术、新方法的研究,尤其是对原创性的,对学科想和新技术、新方法的研究,尤其是对原创性的,对学科发展有重要推动作用的项目申请,或是在长期研究基础上发展有重要推动作用的项目申请,或是在长期研究基础上提出的新理论、新假说和学科交叉的申请项目给予特别的提出的新理论、新假说和学科交叉的申请项目给予特别的重视。今后生命科学部将继续关注生命科学研究中的重要重视。今后生命科学部将继续关注生命
6、科学研究中的重要前沿和新兴领域,注重学科均衡、协调发展;前沿和新兴领域,注重学科均衡、协调发展;生命科学部鼓励科学家长期围绕关键科学问题开展系生命科学部鼓励科学家长期围绕关键科学问题开展系统性、原创性的研究工作。统性、原创性的研究工作。n n根根据据自自己己的的研研究究基基础础,认认真真思思考考,确确定定拟拟申申报报选题选题 (具体明确的科学(具体明确的科学问题问题););n n全面广泛全面广泛阅读阅读国内外相关文献;国内外相关文献;n n全面了解基金委前期全面了解基金委前期资资助助项项目;目;n n确定确定拟拟申申报报研究科学研究科学问题问题;n n创创新新(学学术术思思想想、方方法法),标
7、标新新立立异异,与与众众不不同同,不不跟跟风风赶赶时时髦髦,避避免免争争议议,避避免免与与国国家家重重大大计计划重复。划重复。五、量身定做五、量身定做,慎重选题慎重选题六、国家自然科学基金项目申请书存在的问题六、国家自然科学基金项目申请书存在的问题n n技术转移类申报项目技术转移类申报项目技术转移类申报项目技术转移类申报项目;n n缺乏实质性的源头创新或创新思想,立意偏于保守;缺乏实质性的源头创新或创新思想,立意偏于保守;n n大、空,深度不够;大、空,深度不够;n n立项依据不充分,无近三年文献;立项依据不充分,无近三年文献;n n写作格式问题、错别字等写作格式问题、错别字等申请书粗糙、不严
8、谨。申请书粗糙、不严谨。(一)题目:(一)题目:(一)题目:(一)题目:1.1.反映主要研究内容和创新之处;反映主要研究内容和创新之处;2.2.起点高、面要窄、吸引人、有新意、具体明起点高、面要窄、吸引人、有新意、具体明 确;确;3.3.根据题目确定关键词,从而确定立论依据的根据题目确定关键词,从而确定立论依据的 写法。写法。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项【举例举例举例举例】:1 1)20032003年重点项目:年重点项目:年重点项目:年重点项目:猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差异表达猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差异表达 基因的结构与功能基因的结构与
9、功能2 2)20082008年重点项目:年重点项目:年重点项目:年重点项目:中外猪种胎儿骨骼肌表型差异分子基础及其影响产肉性中外猪种胎儿骨骼肌表型差异分子基础及其影响产肉性 状形成的比较发育遗传学研究状形成的比较发育遗传学研究3 3)20042004年青年基金题目(主持人朱正茂博士):年青年基金题目(主持人朱正茂博士):年青年基金题目(主持人朱正茂博士):年青年基金题目(主持人朱正茂博士):人鼠中未检测到同源序列的一个猪中新基因的结构与功能人鼠中未检测到同源序列的一个猪中新基因的结构与功能4 4)20062006年青年基金题目(主持人唐中林博士):年青年基金题目(主持人唐中林博士):年青年基金
10、题目(主持人唐中林博士):年青年基金题目(主持人唐中林博士):细胞外基质通路对猪骨骼肌的细胞社会学行为及产肉性细胞外基质通路对猪骨骼肌的细胞社会学行为及产肉性 状形成的分子调控状形成的分子调控(二)(二)400字摘要(十分关键)字摘要(十分关键)层次分明,全面准确反映项目来龙去脉、研究内容与创新之处,语句讲究、凝炼、通顺、重要性、研究方法、研究?内容?达到?目标、学术思想,科学意义:1)在方面非常重要 2)将用研究方法3)研究内容 4)实现目标 5)会有科学意义【举例举例】:猪矮小性状相关猪矮小性状相关miR-200s基因簇功能及表观遗传调控基因簇功能及表观遗传调控研究研究(2011年青年基金
11、任红艳博士年青年基金,任红艳博士)我国小型猪具有体型小、遗传稳定等特点,已作为理想的实验动物模我国小型猪具有体型小、遗传稳定等特点,已作为理想的实验动物模我国小型猪具有体型小、遗传稳定等特点,已作为理想的实验动物模我国小型猪具有体型小、遗传稳定等特点,已作为理想的实验动物模型和生物医学材料应用于多个领域,但其矮小性状的调控机制仍然是一个型和生物医学材料应用于多个领域,但其矮小性状的调控机制仍然是一个型和生物医学材料应用于多个领域,但其矮小性状的调控机制仍然是一个型和生物医学材料应用于多个领域,但其矮小性状的调控机制仍然是一个谜。果蝇的谜。果蝇的谜。果蝇的谜。果蝇的microRNA-8micr
12、oRNA-8基因是调控果蝇体型大小的重要因子,能够与胰岛基因是调控果蝇体型大小的重要因子,能够与胰岛基因是调控果蝇体型大小的重要因子,能够与胰岛基因是调控果蝇体型大小的重要因子,能够与胰岛素信号通路上关键因子互作影响细胞增殖和个体生长。但关于该基因在哺素信号通路上关键因子互作影响细胞增殖和个体生长。但关于该基因在哺素信号通路上关键因子互作影响细胞增殖和个体生长。但关于该基因在哺素信号通路上关键因子互作影响细胞增殖和个体生长。但关于该基因在哺乳动物体型大小调控中的研究迄今国内外尚无报道。本课题组首次发现该乳动物体型大小调控中的研究迄今国内外尚无报道。本课题组首次发现该乳动物体型大小调控中的研究迄
13、今国内外尚无报道。本课题组首次发现该乳动物体型大小调控中的研究迄今国内外尚无报道。本课题组首次发现该基因在猪中存在同源类似物(基因在猪中存在同源类似物(基因在猪中存在同源类似物(基因在猪中存在同源类似物(microRNA-200microRNA-200基因簇),而且证实其序列、基因簇),而且证实其序列、基因簇),而且证实其序列、基因簇),而且证实其序列、结构和表达特征与果蝇结构和表达特征与果蝇结构和表达特征与果蝇结构和表达特征与果蝇miR-8miR-8极为相似。据此我们提出假设:猪极为相似。据此我们提出假设:猪极为相似。据此我们提出假设:猪极为相似。据此我们提出假设:猪miR-200smiR-
14、200s具有同果蝇具有同果蝇具有同果蝇具有同果蝇miR-8miR-8类似的功能,在猪矮小性状调控中起作用。为证实这一类似的功能,在猪矮小性状调控中起作用。为证实这一类似的功能,在猪矮小性状调控中起作用。为证实这一类似的功能,在猪矮小性状调控中起作用。为证实这一假说,本研究拟在已建立的五指山小型猪资源群体基础上,从分子、细胞、假说,本研究拟在已建立的五指山小型猪资源群体基础上,从分子、细胞、假说,本研究拟在已建立的五指山小型猪资源群体基础上,从分子、细胞、假说,本研究拟在已建立的五指山小型猪资源群体基础上,从分子、细胞、个体和群体四个层面对个体和群体四个层面对个体和群体四个层面对个体和群体四个层
15、面对miR-200smiR-200s基因簇分子特征、结构、功能和表达调控基因簇分子特征、结构、功能和表达调控基因簇分子特征、结构、功能和表达调控基因簇分子特征、结构、功能和表达调控机制进行深入研究,明确机制进行深入研究,明确机制进行深入研究,明确机制进行深入研究,明确miR-200smiR-200s在猪矮小性状调控中的作用机理,提出在猪矮小性状调控中的作用机理,提出在猪矮小性状调控中的作用机理,提出在猪矮小性状调控中的作用机理,提出猪矮小性状调控的新机制。猪矮小性状调控的新机制。猪矮小性状调控的新机制。猪矮小性状调控的新机制。猪泛素猪泛素-蛋白酶体途径关键酶蛋白酶体途径关键酶E3的基因间相关、
16、蛋白的基因间相关、蛋白质互作及与经济性状的关联质互作及与经济性状的关联 泛素泛素泛素泛素-蛋白酶体途径与抗原提呈、转录调控等许多重要生命活动密切蛋白酶体途径与抗原提呈、转录调控等许多重要生命活动密切蛋白酶体途径与抗原提呈、转录调控等许多重要生命活动密切蛋白酶体途径与抗原提呈、转录调控等许多重要生命活动密切相关,且仍有许多未知因素有待研究和发现。本申请项目在申请人主持的相关,且仍有许多未知因素有待研究和发现。本申请项目在申请人主持的相关,且仍有许多未知因素有待研究和发现。本申请项目在申请人主持的相关,且仍有许多未知因素有待研究和发现。本申请项目在申请人主持的前二项国家自然科学基金项目有关猪蛋白酶
17、体相关基因研究工作基础上,前二项国家自然科学基金项目有关猪蛋白酶体相关基因研究工作基础上,前二项国家自然科学基金项目有关猪蛋白酶体相关基因研究工作基础上,前二项国家自然科学基金项目有关猪蛋白酶体相关基因研究工作基础上,采用基因芯片、采用基因芯片、采用基因芯片、采用基因芯片、RNAiRNAiRNAiRNAi和和和和SNPSNPSNPSNP联合模型,从几个层次研究猪泛素联合模型,从几个层次研究猪泛素联合模型,从几个层次研究猪泛素联合模型,从几个层次研究猪泛素-蛋白酶体途蛋白酶体途蛋白酶体途蛋白酶体途径连接酶径连接酶径连接酶径连接酶E3E3E3E3的基因间相关,筛选获得一些的基因间相关,筛选获得一些
18、的基因间相关,筛选获得一些的基因间相关,筛选获得一些E3E3E3E3的重要基因。并利用申请人已的重要基因。并利用申请人已的重要基因。并利用申请人已的重要基因。并利用申请人已拥有的通城猪试验群体、英国拥有的通城猪试验群体、英国拥有的通城猪试验群体、英国拥有的通城猪试验群体、英国PICPICPICPIC公司资源群体和荷兰资源群体共公司资源群体和荷兰资源群体共公司资源群体和荷兰资源群体共公司资源群体和荷兰资源群体共1286128612861286个个个个样本,研究重要基因与经济性状的关联,确定一些与经济性状相关的基因样本,研究重要基因与经济性状的关联,确定一些与经济性状相关的基因样本,研究重要基因与
19、经济性状的关联,确定一些与经济性状相关的基因样本,研究重要基因与经济性状的关联,确定一些与经济性状相关的基因标记。标记。标记。标记。此外,还将采用酵母双杂交技术,初步研究此外,还将采用酵母双杂交技术,初步研究此外,还将采用酵母双杂交技术,初步研究此外,还将采用酵母双杂交技术,初步研究E3E3相关蛋白质的互作。相关蛋白质的互作。相关蛋白质的互作。相关蛋白质的互作。本项目从一个途径着手,从基因网络和蛋白质互作的角度出发,有助于更本项目从一个途径着手,从基因网络和蛋白质互作的角度出发,有助于更本项目从一个途径着手,从基因网络和蛋白质互作的角度出发,有助于更本项目从一个途径着手,从基因网络和蛋白质互作
20、的角度出发,有助于更准确地揭示猪重要经济性状(数量性状)的分子基础。同时也将加深对泛准确地揭示猪重要经济性状(数量性状)的分子基础。同时也将加深对泛准确地揭示猪重要经济性状(数量性状)的分子基础。同时也将加深对泛准确地揭示猪重要经济性状(数量性状)的分子基础。同时也将加深对泛素素素素-蛋白酶体途径的认识和对猪基因组的了解。蛋白酶体途径的认识和对猪基因组的了解。蛋白酶体途径的认识和对猪基因组的了解。蛋白酶体途径的认识和对猪基因组的了解。人鼠中未检测到同源序列的一个猪中新基因的结构人鼠中未检测到同源序列的一个猪中新基因的结构与功能与功能在验证了猪新基因在验证了猪新基因在验证了猪新基因在验证了猪新基
21、因m218m218在杜洛克和通城猪胚胎不同发育阶段骨在杜洛克和通城猪胚胎不同发育阶段骨在杜洛克和通城猪胚胎不同发育阶段骨在杜洛克和通城猪胚胎不同发育阶段骨骼肌组织中表达的显著差异,完成了该基因的物理定位,得到了该基因大部骼肌组织中表达的显著差异,完成了该基因的物理定位,得到了该基因大部骼肌组织中表达的显著差异,完成了该基因的物理定位,得到了该基因大部骼肌组织中表达的显著差异,完成了该基因的物理定位,得到了该基因大部分的分的分的分的cDNAcDNA序列和部分序列和部分序列和部分序列和部分SNPSNP多态信息并初步对多态信息并初步对多态信息并初步对多态信息并初步对SNPSNP位点进行了性状关联分析
22、位点进行了性状关联分析位点进行了性状关联分析位点进行了性状关联分析的基础上,获得的基础上,获得的基础上,获得的基础上,获得m218m218基因的全长基因的全长基因的全长基因的全长cDNAcDNA及启动子序列,剪切点信息,推导蛋及启动子序列,剪切点信息,推导蛋及启动子序列,剪切点信息,推导蛋及启动子序列,剪切点信息,推导蛋白质序列。转染入白质序列。转染入白质序列。转染入白质序列。转染入C2C12C2C12细胞系,研究其蛋白质亚细胞定位,合成特异性抗细胞系,研究其蛋白质亚细胞定位,合成特异性抗细胞系,研究其蛋白质亚细胞定位,合成特异性抗细胞系,研究其蛋白质亚细胞定位,合成特异性抗体,研究蛋白质表达
23、模式和活性蛋白形式,在本室猪实验群体和体,研究蛋白质表达模式和活性蛋白形式,在本室猪实验群体和体,研究蛋白质表达模式和活性蛋白形式,在本室猪实验群体和体,研究蛋白质表达模式和活性蛋白形式,在本室猪实验群体和PICPIC(国际(国际(国际(国际猪改良公司)公司家系中深入研究其对产肉性状的影响。猪改良公司)公司家系中深入研究其对产肉性状的影响。猪改良公司)公司家系中深入研究其对产肉性状的影响。猪改良公司)公司家系中深入研究其对产肉性状的影响。率先研究人鼠中未检测到同源序列的猪中新基因率先研究人鼠中未检测到同源序列的猪中新基因率先研究人鼠中未检测到同源序列的猪中新基因率先研究人鼠中未检测到同源序列的
24、猪中新基因m218m218的结构,功能和的结构,功能和的结构,功能和的结构,功能和表达,获得具有我国知识产权的猪功能基因。研究结果为揭示猪肌肉生长和表达,获得具有我国知识产权的猪功能基因。研究结果为揭示猪肌肉生长和表达,获得具有我国知识产权的猪功能基因。研究结果为揭示猪肌肉生长和表达,获得具有我国知识产权的猪功能基因。研究结果为揭示猪肌肉生长和肌肉品质等产肉性状的分子机理提供新知识,为标记辅助选择提供新的基因肌肉品质等产肉性状的分子机理提供新知识,为标记辅助选择提供新的基因肌肉品质等产肉性状的分子机理提供新知识,为标记辅助选择提供新的基因肌肉品质等产肉性状的分子机理提供新知识,为标记辅助选择提
25、供新的基因资源。资源。资源。资源。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项(三)立项依据:(三)立项依据:(三)立项依据:(三)立项依据:1.1.引出科学问题(研究领域的重要性);引出科学问题(研究领域的重要性);2.2.研究进展,着重指出研究瓶颈及问题,最后落研究进展,着重指出研究瓶颈及问题,最后落 脚到你要解决该问题的创新思路;脚到你要解决该问题的创新思路;3.3.研究成功实现目标的科学意义(科学价值研究成功实现目标的科学意义(科学价值 理理 论意义和潜在的实践意义论意义和潜在的实践意义/应用前景)。应用前景)。4.4.每一段开头都有一个总结性的小标题:每一段开头都有一个总结性
26、的小标题:(1 1)胎盘生长发育差异的分子机制研究是解析中胎盘生长发育差异的分子机制研究是解析中外猪种繁殖性状差异的重要方面;外猪种繁殖性状差异的重要方面;(2 2)猪胎盘印记基因功能的研究可深入了解胎盘和)猪胎盘印记基因功能的研究可深入了解胎盘和胎儿的生长发育分子机理;胎儿的生长发育分子机理;七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项(3 3)申请人前一国家基金研究结果表明二花脸和申请人前一国家基金研究结果表明二花脸和大白猪胎盘发育后期一批基因表达差异显著,且大白猪胎盘发育后期一批基因表达差异显著,且其中部分基因为印记基因,其中部分基因为印记基因,NNATNNAT可能是其中一个可能
27、是其中一个与胎盘功能相关的重要印记基因;与胎盘功能相关的重要印记基因;(4 4)NNATNNAT基因及其相关通路在猪胎盘及胎儿生基因及其相关通路在猪胎盘及胎儿生长方面及作为影响初生重的基因和标记的发掘方长方面及作为影响初生重的基因和标记的发掘方面极具研究价值。面极具研究价值。(四)研究目标:(四)研究目标:(四)研究目标:(四)研究目标:要集中,不宜写得过大,集中解要集中,不宜写得过大,集中解 决一个问题决一个问题(五)研究内容:(五)研究内容:(五)研究内容:(五)研究内容:1.1.正确定位:基础或应用基础;正确定位:基础或应用基础;2.2.假说驱动;假说驱动;3.3.确定研究的问题,查文献
28、确定研究的问题,查文献+预实验;预实验;4.4.提出假设,实验设计,验证及分析;提出假设,实验设计,验证及分析;5.5.提出解决问题的新思路、新理论、新方法;提出解决问题的新思路、新理论、新方法;6.6.避免过多过大、层次分明、围绕目标。避免过多过大、层次分明、围绕目标。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项(六)参考文献:(六)参考文献:(六)参考文献:(六)参考文献:参考文献要新(近参考文献要新(近3 3年,一直到今年年,一直到今年 年初年初的)的)标注参标注参考文献时一定不要遗漏重要参考文献)。考文献时一定不要遗漏重要参考文献)。(七)研究方案:(七)研究方案:(七)研究方
29、案:(七)研究方案:文字描述,技术路线(图)清晰,方法得当。文字描述,技术路线(图)清晰,方法得当。(八)可行性分析:(八)可行性分析:(八)可行性分析:(八)可行性分析:针对关键难点技术。前期研究已进行、立论理论和实针对关键难点技术。前期研究已进行、立论理论和实验依据充分;已掌握关键技术;好的研究经验及研究验依据充分;已掌握关键技术;好的研究经验及研究基础;硬件条件具备。基础;硬件条件具备。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项(九)创新性:(九)创新性:(九)创新性:(九)创新性:1.1.题目有新意,内容新(目前热点等);题
30、目有新意,内容新(目前热点等);2.2.研究思路与理论上创新;研究思路与理论上创新;3.3.研究视角独特、解决问题方式新颖;研究视角独特、解决问题方式新颖;4.4.“目前研究很少目前研究很少”,“无人问津无人问津”等问题出现等问题出现是是 因为:研究意义不大?问题已经解决?或根本因为:研究意义不大?问题已经解决?或根本行不通?行不通?5.5.提出了新假说?对某未知领域的新探索?为解提出了新假说?对某未知领域的新探索?为解决某重要科学问题提供新思路和途径?学术思想决某重要科学问题提供新思路和途径?学术思想的创新性的创新性?下丘下丘下丘下丘脑脑弓状核中雌激素受体弓状核中雌激素受体弓状核中雌激素受体
31、弓状核中雌激素受体a(Era)a(Era)a(Era)a(Era)表达量在表达量在表达量在表达量在滩滩羊季羊季羊季羊季节节性繁殖性繁殖性繁殖性繁殖调调控中的作用控中的作用控中的作用控中的作用 (2011(2011(2011(2011年青年基金,狄冉博士年青年基金,狄冉博士年青年基金,狄冉博士年青年基金,狄冉博士)本本本本项项目的特色与目的特色与目的特色与目的特色与创创新之新之新之新之处处:(1 1 1 1)学)学)学)学术术思想思想思想思想创创新新新新:从:从ERER表达量的角度探索表达量的角度探索乏情期乏情期下丘下丘脑对脑对雌激素雌激素负负反反馈馈作用敏感性增作用敏感性增强强的原因,并的原因
32、并对对乏情期和乏情期和发发情期下情期下丘丘脑脑“促促进进中枢中枢”和和“抑制中枢抑制中枢”ERER数量影响数量影响绵绵羊羊发发情状情状态态的的调节调节机制提出了假机制提出了假设设。另外,通。另外,通过过本研究可推本研究可推测绵测绵羊下丘羊下丘脑脑“促促进进中中枢枢”和和“抑制中枢抑制中枢”所在的位置,目前国内外学所在的位置,目前国内外学术术界界对对它它们们的位置的位置还还无定无定论论。(2 2 2 2)研究方法特色:)研究方法特色:)研究方法特色:)研究方法特色:本本项项目将最新的目将最新的RNARNA原位原位杂杂交技交技术术(Quanti-Gene ViewRNAQuanti-Gene V
33、iewRNA)应应用到用到季季节节性繁殖性繁殖调调控机制控机制研究中,研究中,以期得到最准确的以期得到最准确的实验结实验结果。果。细胞外基质通路对猪骨骼肌细胞社会学行为及产肉细胞外基质通路对猪骨骼肌细胞社会学行为及产肉性状形成的分析调控性状形成的分析调控本项目的特色与创新之处:本项目的特色与创新之处:本项目的特色与创新之处:本项目的特色与创新之处:(1 1)率先将细胞社会学引入动物遗传育种研究领域,具有学科)率先将细胞社会学引入动物遗传育种研究领域,具有学科)率先将细胞社会学引入动物遗传育种研究领域,具有学科)率先将细胞社会学引入动物遗传育种研究领域,具有学科交叉性,在研究思路上具有创新。交叉
34、性,在研究思路上具有创新。交叉性,在研究思路上具有创新。交叉性,在研究思路上具有创新。针对细胞外基质通路相关基因,申请者从基因社会学、细胞针对细胞外基质通路相关基因,申请者从基因社会学、细胞社会学角度,研究基因互作遗传网络和细胞外环境与社会学角度,研究基因互作遗传网络和细胞外环境与 细胞的互作。细胞的互作。并借用并借用“还原论还原论”的思想,从分子水平还原到细胞和组织水平,的思想,从分子水平还原到细胞和组织水平,研究细胞外基质生化通路相关基因对猪骨骼肌细胞社会性的调控。研究细胞外基质生化通路相关基因对猪骨骼肌细胞社会性的调控。通过表达网络模型构建,对通路中关键基因的表达调控机制通过表达网络模型
35、构建,对通路中关键基因的表达调控机制进行探讨。而传统的思路是从单基因着手,并片面重视骨骼进行探讨。而传统的思路是从单基因着手,并片面重视骨骼肌细胞结构基因及肌生成因子,而忽视细胞外环境的作用,肌细胞结构基因及肌生成因子,而忽视细胞外环境的作用,或只在单一的分子水平对基因进行研究。或只在单一的分子水平对基因进行研究。本研究提出了从细本研究提出了从细本研究提出了从细本研究提出了从细胞社会学角度探索细胞外环境和细胞互作对家畜动物复杂性胞社会学角度探索细胞外环境和细胞互作对家畜动物复杂性胞社会学角度探索细胞外环境和细胞互作对家畜动物复杂性胞社会学角度探索细胞外环境和细胞互作对家畜动物复杂性状形成的分子
36、机制进行研究的新思路。这是该课题的一个重状形成的分子机制进行研究的新思路。这是该课题的一个重状形成的分子机制进行研究的新思路。这是该课题的一个重状形成的分子机制进行研究的新思路。这是该课题的一个重要特色与创新之处。要特色与创新之处。要特色与创新之处。要特色与创新之处。(2 2 2 2)申请项目起点较高,此研究是前期国家自然科学基)申请项目起点较高,此研究是前期国家自然科学基)申请项目起点较高,此研究是前期国家自然科学基)申请项目起点较高,此研究是前期国家自然科学基金重点项目研究成果的深入。金重点项目研究成果的深入。金重点项目研究成果的深入。金重点项目研究成果的深入。申请者博士论文研究的内容是受
37、国家自然科学基因重申请者博士论文研究的内容是受国家自然科学基因重点项目点项目“猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差异表达基因的结构与功能异表达基因的结构与功能”(项目编号:(项目编号:3033044030330440,李奎,李奎主持)资助。研究发现,在胚胎骨骼肌发育过程中,细胞主持)资助。研究发现,在胚胎骨骼肌发育过程中,细胞外基质通路相关基因是通城猪和长白猪两品种差异最大的外基质通路相关基因是通城猪和长白猪两品种差异最大的一类基因。因此,本课题立项起点高,是前期国家自然科一类基因。因此,本课题立项起点高,是前期国家自然科学基金重点项目资助所取得
38、成果的深入,具有很好的延续学基金重点项目资助所取得成果的深入,具有很好的延续性。性。(3 3 3 3)科学问题的提出是基于申请者博士论文的新发现,课题)科学问题的提出是基于申请者博士论文的新发现,课题)科学问题的提出是基于申请者博士论文的新发现,课题)科学问题的提出是基于申请者博士论文的新发现,课题立项具有原始创新性立项具有原始创新性立项具有原始创新性立项具有原始创新性 申请者在对自己研究新发现的基础上,通过文献论证,申请者在对自己研究新发现的基础上,通过文献论证,确证细胞外基质在骨骼肌生长发育中具有重要作用,确证细胞外基质在骨骼肌生长发育中具有重要作用,大胆提大胆提大胆提大胆提出假设:细胞外
39、基质通路相关基因可能是中外猪产肉性状遗出假设:细胞外基质通路相关基因可能是中外猪产肉性状遗出假设:细胞外基质通路相关基因可能是中外猪产肉性状遗出假设:细胞外基质通路相关基因可能是中外猪产肉性状遗传差异产生的重要分子机制,而通过进一步的大量文献检索,传差异产生的重要分子机制,而通过进一步的大量文献检索,传差异产生的重要分子机制,而通过进一步的大量文献检索,传差异产生的重要分子机制,而通过进一步的大量文献检索,细胞外基质对骨骼肌的生长发育具有重要作用。细胞外基质对骨骼肌的生长发育具有重要作用。细胞外基质对骨骼肌的生长发育具有重要作用。细胞外基质对骨骼肌的生长发育具有重要作用。(十)研究基础:(十)
40、研究基础:(十)研究基础:(十)研究基础:项目前期进展可用图表等表述项目前期进展可用图表等表述 (直接与间接直接与间接)不)不 是只写申报者一个人的工作基础,而是指整个团是只写申报者一个人的工作基础,而是指整个团 队和这个学校(设备)基础。队和这个学校(设备)基础。(十一)个人简介:(十一)个人简介:(十一)个人简介:(十一)个人简介:学历、简历、研究工作(方向与成果)简介、人学历、简历、研究工作(方向与成果)简介、人 才培养与学术兼职、重要学术论文与成果。才培养与学术兼职、重要学术论文与成果。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项(十二)(十二)(十二)(十二)特别是青年基金,
41、主要看申请人的科研潜力特别是青年基金,主要看申请人的科研潜力 与项目的创新思路,而科研潜力则主要通过简历与与项目的创新思路,而科研潜力则主要通过简历与 工作基础来体现。工作基础来体现。(十三)(十三)(十三)(十三)如果主持人成果较弱,只有很少文章时,不如果主持人成果较弱,只有很少文章时,不 妨写写这些文章的意义及别人给出的评价。妨写写这些文章的意义及别人给出的评价。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项(十四)文字上:(十四)文字上:(十四)文字上:(十四)文字上:科学术语规范、文笔流畅、简洁概括、逻辑清科学术语规范、文笔流畅、简洁概括、逻辑清晰、晰、无错别字,体现认真、严谨,
42、让评委从申请书无错别字,体现认真、严谨,让评委从申请书看出看出申请人是一个能胜任科学研究的人。申请人是一个能胜任科学研究的人。(十五)工作条件和研究队伍:(十五)工作条件和研究队伍:(十五)工作条件和研究队伍:(十五)工作条件和研究队伍:根据目标和研究内容、方法、写出工作条件和研根据目标和研究内容、方法、写出工作条件和研 究队伍,每一部分工作有相应的条件和人员担任。究队伍,每一部分工作有相应的条件和人员担任。(十六)(十六)(十六)(十六)经费写上限。经费写上限。七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项 (十七)基金委鼓励围绕某一科学问题开展连续系(十七)基金委鼓励围绕某一科学问题
43、开展连续系(十七)基金委鼓励围绕某一科学问题开展连续系(十七)基金委鼓励围绕某一科学问题开展连续系 统深入的研究:统深入的研究:统深入的研究:统深入的研究:七、撰写申请书时的注意事项七、撰写申请书时的注意事项猪生长激素基因的定位与多态性及其与生产性状的关系猪生长激素基因的定位与多态性及其与生产性状的关系19911991年国家基金,彭中镇教授年国家基金,彭中镇教授猪猪GHGH基因及其连锁群的基因及其连锁群的PCR-RFLPPCR-RFLP和和PCR-SSCPPCR-SSCP研究研究1993 1993 年国家基金年国家基金 ,彭中镇教授,彭中镇教授用用PRINSPRINS技术构建猪技术构建猪121
44、2号二价染色体高精度框架图的研究号二价染色体高精度框架图的研究1995 1995 年国家基金,李奎年国家基金,李奎猪猪1212号染色体上新基因的号染色体上新基因的CATSCATS法分离及其定位和效应研究法分离及其定位和效应研究1998 1998 年国家基金年国家基金,李奎李奎猪猪PA28PA28相关基因的结构、表达、功能及与免疫性状的关联相关基因的结构、表达、功能及与免疫性状的关联2002 2002 年国家基金年国家基金,李奎李奎猪泛素猪泛素-蛋白酶体途径关键酶蛋白酶体途径关键酶E-3E-3的基因间相关、蛋白质互作及与经济性状的关联的基因间相关、蛋白质互作及与经济性状的关联2005 2005
45、年国家基金年国家基金,李奎李奎 猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差猪脂肪和肌细胞发育或分化阶段比较转录谱和差 异表达基因的结构与功能异表达基因的结构与功能异表达基因的结构与功能异表达基因的结构与功能申请单位:华中农业大学动物科学技术学院申请单位:华中农业大学动物科学技术学院申申 请请 人:人:李李 奎奎八、关于重点项目八、关于重点项目(一)(一)学术思想学术思想1.1.综合运用分子生物学、生物信息学和数量遗传学综合运用分子生物学、生物信息学和数量遗传学方法,揭示猪瘦肉生长和脂肪沉积的分子基础。方法,揭示
46、猪瘦肉生长和脂肪沉积的分子基础。2.2.既研究脂肪和肌细胞系分化前后差异表达基因,既研究脂肪和肌细胞系分化前后差异表达基因,又研究我国优良地方猪不同生长阶段差异表达基因,又研究我国优良地方猪不同生长阶段差异表达基因,以及中外猪品种间差异表达基因,构建猪瘦肉生长以及中外猪品种间差异表达基因,构建猪瘦肉生长和脂肪沉积基因差异转录谱。和脂肪沉积基因差异转录谱。3.3.克隆、鉴定猪瘦肉生长和脂肪沉积相关的基因。克隆、鉴定猪瘦肉生长和脂肪沉积相关的基因。4.4.将肌肉生长和脂肪沉积调控作为一个整体,同时将肌肉生长和脂肪沉积调控作为一个整体,同时研究基因生物学功能及基因间互作。研究基因生物学功能及基因间互
47、作。(二)方法及(二)方法及技术路线技术路线SAGE文文库的构的构建建:选择锚定定酶酶和和标签酶酶,完成,完成序列的拼接,形序列的拼接,形成多成多连体序列体序列标签(二)方法及技术路线(二)方法及技术路线研究猪脂肪和研究猪脂肪和肌细胞分化发肌细胞分化发育基因互作机育基因互作机制技术路线制技术路线 (三)(三)特色与创新之处特色与创新之处1.1.将将脂脂肪肪和和肌肌细细胞胞生生长长发发育育调调控控作作为为一一个个有有机机整整体体,系系统统研研究究脂脂肪肪和和肌肌细细胞胞发发育育过过程程中中基基因因表表达达调调控控关关系系,以阐明基因的互作机制。以阐明基因的互作机制。2.2.用用细细胞胞系系研研究
48、究猪猪脂脂肪肪和和肌肌肉肉细细胞胞转转录录谱谱及及猪猪基基因因生生物学功能。物学功能。3.SAGE3.SAGE技技术术高高通通量量分分析析猪猪基基因因表表达达,能能较较大大规规模模筛筛选选和发现新的重要功能基因。和发现新的重要功能基因。4.4.拓展比较转录谱内涵、实验流程和相关统计方法。拓展比较转录谱内涵、实验流程和相关统计方法。中外猪种胎儿骨骼肌表型差异分子基础及其影响产肉性中外猪种胎儿骨骼肌表型差异分子基础及其影响产肉性中外猪种胎儿骨骼肌表型差异分子基础及其影响产肉性中外猪种胎儿骨骼肌表型差异分子基础及其影响产肉性状形成的比较发育遗传学研究状形成的比较发育遗传学研究状形成的比较发育遗传学研
49、究状形成的比较发育遗传学研究申请人:李申请人:李 奎奎申请单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所申请单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所符合重点项目符合重点项目“农业动物(畜禽及水生经济动物)和牧草农业动物(畜禽及水生经济动物)和牧草种质资源的遗传基础研究种质资源的遗传基础研究”方向方向(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题n n确定中外猪种妊娠中后期胎儿骨骼肌发育最大差确定中外猪种妊娠中后期胎儿骨骼肌发育最大差异时间点异时间点?(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题n n中外猪种胎儿骨骼肌发育相关调控通路差异分析中外猪种胎
50、儿骨骼肌发育相关调控通路差异分析骨骼肌发育相关调控骨骼肌发育相关调控骨骼肌发育相关调控骨骼肌发育相关调控通路的差异分析通路的差异分析通路的差异分析通路的差异分析骨骼肌组织的骨骼肌组织的基因表达表型基因表达表型在中外猪种之间在中外猪种之间差异极为显著差异极为显著下一步下一步中外猪骨骼肌中外猪骨骼肌比较转录组比较转录组引起这种基因表达引起这种基因表达差异的原因差异的原因(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题n n表观遗传及非编码表观遗传及非编码RNARNA对肌肉发育差异的调控对肌肉发育差异的调控(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问题(一)关键科学问