免疫组化在肿瘤诊断的应用课件.ppt

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1、免疫组化在肿瘤诊断的应用,免疫组化在肿瘤诊断中的,免疫组化在肿瘤诊断的应用,(一)对“未分化”恶性肿瘤的分类 如在HE(苏木精-伊红染色法)切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞起源的特征,不能分类,但临床上又必须根据肿瘤的种类作出治疗与预后判断,这种情况下可用到免疫组化。在进行免疫组化前病理医生应根据肿瘤发生部位、组织学的蛛丝马迹及临床特征正确地选择抗体。如发生于直肠的上皮样包含大细胞的未分化肿瘤,其鉴别诊断主要考虑为未分化癌、淋巴瘤、恶性黑色素瘤, 可以使用表X-1列出的免疫组化抗体:,免疫组化在肿瘤诊断的应用,表X-1 未分化癌、淋巴瘤和恶性黑色素瘤的免疫组化抗体 未分化癌 淋巴瘤 恶

2、性黑色素瘤 细胞角蛋白(CK) + - - 上皮细胞膜抗原(EMA) + - - 波形蛋白(Vimentin) - +/- + HMB45 - - + S-100 - - + 白细胞共同抗原(LCA) - + -,免疫组化在肿瘤诊断的应用,1角蛋白(Keratin):一种中间丝蛋白,分为: (1)表皮角蛋白(Epidermal keratin,EK)鳞状上皮或高分化鳞癌标记; (2)细胞角蛋白(cytokeratin,CK)低分子角蛋白,对腺癌、移行细胞部及低分化鳞癌标记。一般用广谱型角蛋白抗体为好,常用。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,2上皮膜抗原(Epithelial membrane ant

3、igen,EMA):这亦是常用的上皮细胞标记抗体,细胞膜阳性,用Zankers、Bouin或B5固定液中固定为好。其在低分化和未分化上皮中表达好,但亦可在间变性大细胞淋巴瘤、恶性横纹肌样瘤中表达。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,3波形蛋白(Vimentin,Vim):是一种细胞中间丝蛋白抗体,在多数软组织肿瘤均可表达,但纤维细胞较明显,在一些上皮性肿瘤也有阳性反应。常用作间叶源与上皮源肿瘤的第一线鉴别抗体 4. S-100蛋白:是一种周围神经雪旺氏细胞特异标记抗体,后发现对脂细胞、朗格罕氏细胞、肌上皮细胞、黑色素细胞及其肿瘤均可阳性。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,免疫组化在肿瘤诊断的应用,免疫组化在

4、肿瘤诊断的应用,1. 结蛋白(Desmin,Des):平滑肌、横纹肌均可阳性。 2. 肌特异性肌动蛋白(muscle-specific actin,MSA):平滑肌为阳性。 3. 平滑肌肌动蛋白 (smooth muscle actin,SMA):平滑肌为阳性。 4. 第8因子,CD34:对血管内皮细胞肿瘤,胃肠道间质瘤标记较特异。 注:(1)国际上将百余种标记抗体统称为CD(Cluster Designation)系列。 (2)淋巴细胞标记与R-S细胞多数为膜阳性,而Ig与组织细胞标记为胞浆阳性。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,(三)、对恶性间皮瘤的鉴别 病理医生常碰到的问题是发生于胸、腹膜的肿

5、瘤是转移性腺癌或是其它浆膜腔肿瘤,还是恶性间皮瘤。 可以鉴别腺癌与间皮瘤的一组抗体 可以鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体,免疫组化在肿瘤诊断的应用,X-3 鉴别腺癌与间皮瘤的抗体 腺癌 间皮瘤 细胞角蛋白(cytokeratin CK) + + 波形蛋白(Vimentin) +/- +/- 癌胚抗原(CEA M7072) +/- - LeuM1 +/- - B72.3 +/- - Ber-Ep4 +/- - 钙网膜蛋白(Calretinin) - + CK5 - + HBME-1 - + *血小板调节素(TM) - + *上皮膜抗原(EMA) + + 分泌成分 + - 人胎盘产乳素 + - L

6、ewis blood group antigen + - *血小板调节素(Thrombomodulin TM)在内皮细胞、间皮细胞、巨噬细胞、室管膜细胞、缄默细胞阳性。 *EMA间皮瘤以胞膜阳性为主,腺癌以胞浆阳性为主。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,X-4 鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体 血管源性肉瘤 恶性(纤维型)间皮瘤 良性(局限纤维型)间皮瘤 CK - + - ACTIN +/- + - CD34 + - + 第八因子 + - -,免疫组化在肿瘤诊断的应用,(四)肿瘤细胞增殖活性与细胞凋亡标记抗体 瘤细胞增殖指数反应细胞增殖活性,是瘤细胞新生(恶性)状况的客观指标,与凋亡指数呈反比关系。

7、常用抗体有: 1增殖细胞核抗原(proliferative neuclear Antigen,PCNA),核阳性。 2Ki-67,Brdu抗体:原要求新鲜组织,新近有Ki-67石蜡切片标记抗体问世。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,3细胞凋亡(Apoptosis)标记抗体:开始发现细胞凋亡发生于正常细胞受基因调控性自然性死亡。后发现肿瘤细胞亦可发生,而且某些药物放、化疗亦可诱发细胞凋亡,故成了研究肿瘤发生、发展、治疗的热点。其标记抗体有: (1)凋亡抑制基因蛋白抗体:Bcl-2、Bcl-XL、mtp53。 (2)促凋亡基因蛋白抗体:Fas/FasL系统,wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel标记。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,(五)癌基因与抗癌基因,促转移与转移抑制基因蛋白抗体标记。 目前应用很多,因方法比分子生物学技术简单,但是这种结果不能直接反应肿瘤基因的活性,只能间接反应肿瘤基因代谢活性,要注意正确评价它的价值。,免疫组化在肿瘤诊断的应用,谢谢,

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