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1、 山东大学实验报告姓名：XXX 系年级：2013级XXXX 学号：201300XXXXXX科目：细胞生物学实验 题目：细胞膜的通透性 日期：2014/9/23细胞膜的通透性一 实验目的1. 了解溶血现象及其发生机制。2. 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度二 实验原理 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞涨破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间也不同。因此，发生溶血现象所需的时间长短
2、可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。三. 实验用品1材料鸡血2试剂0.85%的Nacl溶液，0.085%的Nacl溶液，0.8mol/L的甲醇溶液，0.8mol/L的丙三醇溶液，6%的葡萄糖溶液，2%的Triton X-100溶液3器材6支试管，离心机，滴管，试管架四实验步骤1. 取鸡血6ml，加0.85%Nacl溶液4ml，在1000r/min条件下离心五分钟。（RBC体积量不少于0.6ML）2. 将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50%的浓度。（总体积应不少于1.2mL）3. 每组取6支试管，分别加入
3、如下溶液各3Ml(1) 0.85%Nacl溶液 (2) 0.085%Nacl溶液(3)0.8mol/L甲醇溶液 (4) 0.8mol/L丙三醇溶液(5) 6%葡萄糖溶液 (6) 2%Triton X-1004向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻摇混匀，观察试管中是否有溶血现象发生（观察时间1小时）,记录溶血时间，并于显微镜下观察各溶液中的细胞。五实验结果不同溶液处理导致红细胞溶血的现象试管编号123456溶液0.85%Nacl溶液蒸馏水0.8mol/L甲醇溶液0.8mol/L丙三醇溶液6%的葡萄糖溶液2%Triton X-100是否溶血否是是是是是溶血时间/s8.9s9.6s1h1
4、h6.9s结果分析该溶液为鸡血红细胞的等渗溶液，不会发生溶血。该溶液为鸡血红细胞的低渗溶液，细胞会吸水涨破甲醇溶液为亲脂性的小分子溶液，易通过细胞膜进入细胞，提高细胞的渗透压，使外界的水分子进入细胞，引起细胞吸水涨破该溶液为高渗溶液，细胞内的水分子会向外流出，小分子丙三醇会进入细胞，但因为丙三醇分子量较大，进入细胞速率较慢，所以不易看到细胞发生溶血现象高渗溶液，虽然葡萄糖可以进入细胞，但因为分子量比较大，进入速率非常慢，不易见到溶血现象的发生该溶液可将细胞膜上的蛋白质脱离下来，使细胞发生溶血，同时细胞悬液变得有点浑浊由表格中溶血时间可看出，蒸馏水和2%Triton X-100处理的红细胞悬液，
5、细胞溶血很快，其次是0.8mol/L甲醇溶液，而0.8mol/L丙三醇溶液和6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液，细胞溶血时间很慢。不同溶液处理后离心管中鸡血红细胞悬液的透明情况比较。 0.85%Nacl溶液与0.8mol/丙三醇溶液0.85%Nacl溶液与蒸馏水0.85%Nacl溶液与0.8mol/L甲醇溶液0.85%Nacl溶液与6%的葡萄糖溶液 0.85%Nacl溶液与2%Triton X-100蒸馏水处理后的红细胞，细胞悬液迅速变澄清，证明细胞已发生明显溶血；0.8mol/L甲醇溶液处理的红细胞悬液也很快变澄清，但透明度不如蒸馏水处理的红细胞悬液：0.8mol/丙三醇溶液处理的红细胞悬液变
6、澄清很慢；6%的葡萄糖溶液处理的红细胞悬液变澄清最慢；2%Triton X-100处理的红细胞悬液变澄清比较快，但透明度不高，远低于对照试管透明度，说明Triton试剂将蛋白脱离下来，蛋白游离在溶液中。不同溶液处理后的鸡血红细胞的形态变化 0.8mol/L甲醇溶液蒸馏水 0.85%Nacl溶液2%Triton X-1006%的葡萄糖溶液 0.8mol/丙三醇溶液不同作用时间下的细胞形态0.8mol/丙三醇溶液 （1） （2） （3） （4）6%的葡萄糖溶液 （1） （2） （3） （4）1 0.85%Nacl溶液中的细胞，细胞保持正常形态2 0.085%Nacl溶液中的红细胞大都吸水涨破3 0
7、.8mol/L甲醇处理的红细胞，部分破裂，部分保持原状4 0.8mol/丙三醇溶液处理15min后的红细胞，大致保持正常形态；0.8mol/丙三醇溶液处理30min后的红细胞，细胞突显；0.8mol/丙三醇溶液处理45min后的细胞，部分细胞边缘开始产生缺口；0.8mol/丙三醇溶液处理60min后的红细胞，多数细胞开始破裂。5 6%的葡萄糖溶液处理15分钟后的红细胞悬液，细胞无明显变化；处理45分钟后的细胞，细胞数目明显减少，说明已经失水；处理60分钟后的细胞，一些细胞已经发生明显变形，表明细胞已经开始破损。6 2%Triton X-100溶液处理的红细胞，细胞明显变小。六 讨论与结论1 从
8、1和2号试管，即0.85% Nacl溶液和蒸馏水处理的细胞悬液中，可得出结论：细胞在低渗溶液中容易发生溶血，并且细胞膜内外浓度差越大，细胞越容易溶血。2 从3和4号试管中，即0.8mol/L甲醇溶液和0.8mol/L丙三醇溶液处理的悬液中，可得出结论：脂溶性物质容易穿过细胞膜，并且物质分子量越小，个头越小，越容易穿过细胞膜，引起细胞溶血。3 从5号试管中，可得出结论：分子量较大的极性分子，不容易穿过细胞膜引起细胞溶血。4 从6号试管中，可得出结论：Triton X-100试剂可抽取细胞膜中的蛋白质，使细胞通透性增强，从而使细胞发生溶血。5 1号试管，即0.85%Nacl溶液处理的红细胞悬液，放置很长时间之后，也会出现溶血现象。