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1、肺炎克雷伯菌耐药性分析(作者:_单位: _邮编: _) 作者:李红林 卢月梅 吴劲松 吴伟元 刘侠【摘要】 目的 比较产超广谱内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌与非产ESBLs菌株的耐药情况。方法 收集2007年112月深圳市人民医院住院患者分离的肺炎克雷伯菌76株。采用KB法对其进行药敏试验,ESBLs确证采用CLSI(临床实验室标准化委员会)推荐的纸片扩散法表型确证试验。结果 所有分离株均对亚胺培南敏感;产酶株对抗生素的耐药率高于非产酶株;产酶株对哌拉西林和头孢克洛100%耐药。结论 肺炎克雷伯菌的耐药状况严重,内酰胺类抗生素和酶抑制剂联合用药、阿米卡星、头孢西丁和碳氢霉烯类药物可控制产E
2、SBLs肺炎克雷伯菌感染。 【关键词】 肺炎克雷伯菌; ESBLs; 耐药性随着抗生素在临床应用的不断增多,细菌的耐药性也日益严重,尤其是革兰阴性杆菌产生的超广谱内酰胺酶(extendedspectrum lactamases,ESBLs)引起的耐药及其流行成为临床关注的焦点。ESBLs是由质粒介导并导致细菌对青霉素类,一、二、三、四代头孢菌素以及单环类抗生素耐药的一类酶,这类酶主要由肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,KP)和大肠埃希菌产生1。产ESBLs菌株耐药谱广,常表现为多重耐药。因此,了解这些微生物的耐药情况,对制定治疗方案、合理使用抗菌药物具有十分重要的意义。
3、本文对深圳市人民医院住院患 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株来源 收集我院2007年112月临床分离的KP无重复菌株共76株,所有菌株均经VITEKAMS 60全自动微生物分析仪鉴定,KP另加吲哚试验与产酸克雷伯菌进行鉴别。药敏试验质控株为大肠埃希菌ATCC 25922和ATCC 35218,ESBLs确证试验质控株为KPATCC 700603和大肠埃希菌ATCC 25922,均为本院微生物实验室保存菌株。 1.1.2 仪器与试剂 VITEKAMS 60全自动微生物分析仪购自法国生物梅里埃公司;两对ESBLs确证试验纸片、MH琼脂平板及药敏纸片均为英国Oxoid公司产品,药敏纸片
4、包括:哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢克洛、氯霉素、庆大霉素、阿米卡星、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、复方新诺明、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟及氨曲南,均在有效期内使用。 1.2 方法 1.2.1 ESBLs确证试验 采用CLSI推荐的表型确证方法(纸片扩散法):头孢噻肟(30 g)与头孢噻肟/克拉维酸(30 g/10 g),头孢他啶30 g与头孢他啶/克拉维酸(30 g/10 g)两对纸片中任一对或两对,加克拉维酸者比不加克拉维酸者抑菌圈直径5 mm,则判定为ESBLs阳性。 1.2.2 药敏试验 采用KB法(即琼脂扩散法),操作及
5、结果判断严格按2006年CLSI标准进行。 1.2.3 统计学方法 应用WHONET 5.3、SPSS 13.0软件进行分析,产酶株与非产酶株耐药性比较采用卡方检验。 2 结果 2.1 ESBLs的检出率 76株临床分离株共检出产ESBLs菌35株,阳性率为46.05%。 2.2 KP的科室分布 76株KP主要来源于ICU(9株),其次为呼吸科、肾内科(各8株)、脑外科(7株)、老年病科(6株)、普通外科(5株)、泌尿外科、内分泌科(各4株)、消化科、新生儿科、胸外科、门诊部(各3株)、其他(13株)。 2.3 KP的标本分布 76株KP大多分离自痰液(22株)、尿液(18株)和血液(15株)
6、,其次为腹透液(9株)、脓液(5株)、伤口分泌物(3株)、宫颈分泌物(2株)、胆汁和胸水(各1株)。 2.4 KP产酶株与非产酶株耐药情况比较 KP产酶株与非产酶株之间的耐药性存在较大差异,除对头孢西丁和氯霉素耐药率差异不显著外(P值分别为0.161和0.065),对其他14种抗生素的耐药率差异均显著(P0.05)。见表1、2。 表1 KP产酶株与非产酶株的药敏试验结果表2 KP产酶株与非产酶株耐药率比较 3 讨论 KP是临床标本中常见的细菌,也是院内感染常见的病原菌之一。该菌在正常人口咽部的带菌率为1%6%,在住院患者中该菌的携带率更高。该菌是重症患者和抵抗力低下患者发生感染的潜在危险因素,
7、所以该菌在ICU的检出率最高。本实验痰液标本中该菌的检出率最高,可能与其本身存在于咽喉部有关,在抵抗力低下时容易成为主导菌而引起肺部感染;该菌在尿液和血液中的检出率次之,常引起尿路感染和菌血症。 本研究中KP对抗生素的耐药率低于文献报道2,这可能与不同地区和医院使用的抗生素种类和数量不同有关;亦低于我院先前的报道3,4。本研究结果显示,KP除对亚胺培南和美洛培南的耐药率为0外,对其他抗生素均有不同程度的耐药,产酶与非产酶KP之间的耐药特性存在较大差异。产酶株对哌拉西林耐药率高达100%,哌拉西林加上他唑巴坦之后敏感性大大提高,耐药率只有16.2%,表明他唑巴坦对ESBLs有明显的抑制作用;在含
8、酶抑制剂的抗生素中,哌拉西林/他唑巴坦(耐药率为16.2%)对ESBLs产酶株的抑菌作用强于氨苄西林/舒巴坦(耐药率为86.1%)和阿莫西林/克拉维酸(耐药率为44.4%),临床医生治疗此类细菌引起的感染时可以选用哌拉西林/他唑巴坦,减少对高效广谱抗菌药物(如亚胺培南和美洛培南)的依赖;产酶株对阿米卡星和头孢西丁耐药率也较低(分别为29.7%和32.4%),临床医生亦可有选择地使用这两种药物。总之,在临床治疗中,根据药敏试验结果选用抗生素,是保证合理、有效使用抗生素的重要依据。 综上所述,KP在ICU出现最多;痰液和尿标本中检出率最高;产ESBLs菌株对大多数抗生素的耐药率远高于非产酶株的耐药
9、率;对于ESBLs阳性的耐药性菌株,使用添加了酶抑制剂的抗生素可以使治疗效果有比较明显的改善,用阿米卡星、头孢西丁和碳氢霉烯类药物可控制产ESBLs的KP感染。【参考文献】 1 Jacoby GA.Genetics of extendedspectrum betalactamases.Eur J Clin Microbiol Infect Dis,1994,13(suppl 1):S2S11. 2 郑港森,宋秀宇,黄朝阳,等.对肺炎克雷伯菌产内酰胺酶的检测及耐药性分析.检验医学与临床,2008,5(3):142144. 3 李文青,吴伟元,吴劲松,等.深圳地区产超广谱内酰胺酶细菌耐药谱动态观察.实用预防医学,2006,13(1):4779. 4 卢月梅,张阮章,何林,等.近4年产超广谱内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型分布及耐药性变化.中华医院感染学杂志,2005,15(10):10901093.