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1、茚三酮比色法检测饲料中赖氨酸含量的研究一r34IXlJl1畜牧兽医1995年3月第一期Irys合量,所桂结蓑与实际值比较?相对谒差符合国标规定,检测范围达o?112.缺少氨基畦自动分析仪的单位应用此方法,县有费省垃宏的毒义-p7关键词茚三塑堡鱼鎏控遵些氨醴含量1l人们习惯于将赖(1丽t)等耆禽机露面预虿4.2CO十和HS十的反应物及反应方程为量酸:慧,苎兰,兰盐Na!c0+2H1:2NI+H:O+CO按一定比例配合生产的混合物称之为氨基酸潺加剂.一拽_.些厂家和经销者利用氨基酸与其他原料的价格差,打着NazS+2Hcl_=2Nacl+H:s氮基酸添加荆的招牌,弄虚作假,步加或不如氨基酸,损4.
2、3对最后滤藏V加热之目的:一是驱除掳l液中的害消费者利益的事件屡屡发生.因此.加强氨基酸的捡测NH;,HzO,HCO),H=S,HCL等二是蒸发除去过多水已追在眉睫.这也是贯彻质量怯.保护消费者利益的重分.蒸发除去多少术份,最后定容至多少m1数为佳,应先要措施.虽然,可用AA自动分析仪测定氨基酸的吉量,查看AA蒲加荆中对AA的说明用量,尔后确定定容量.但因购买此设备单位较少.无法开展氨羞酸项目的检测.一般地.AA用量为2,定容至100ml25用量定容笔者对此作了韧步探索,取得了较为满意的效果.至500ml5以上者定容至1000m1.1拴科原理4.4在除杂中发现撼掖过多,均可采用加热蒸发部茚三酮
3、(水合)在弱酸性(PH6.568)溶液中与氨分水分后.再进行下一步.这种作法一不会弓I起AA挥发基酸加热.发生氨化,脱氨,脱按作用,生成兰紫色茚三或蒸发-酮.氨基酸含量越高显色越深,符合比耳定律.选择适当5对AA露加卉|中lys的检测:嫂长,用分光光度计测定消光值与AA标准曲线比较得取上述样品的处理掖5ml于50ml的容量瓶?调氨基酸总量.称总量是因为氮基酸均具茚三酮反应特性,PH6?568?加0?1茚三酮5ml?在电炉上加热3rain但在A傣加剂中以添加赖氨酸为多见,困此.谫I定AA后t加水30ml,静置15mln.用术定窖至刻度,在491nm总量实际上是删定1ys,所以选择波长为1ys的波
4、长波长下测定消光值(用蒸馏术作空白).与lys标准曲线(491m)比较得样品中赖氨酸的rag数2主要仪器,量及装置2.1分光光度甘(581,721或751型)2.2分析天平(感量0.1ing)I2.3旋片式真空泵(P=0.18Kw)I2.4电炉fP=IKW),酒灯I2.5烧稚簪量瓶等2.6广搓试纸等2.7CO:十发生装置,H!s十发生装置.3主要试剂见AA添加押I样品分析前的睬杂程序置和对AA台.量测定中所列.4分析前除杂程序.由于AA添加荆中存在大量的金属离子(Cu抖,FL,Zn,Mn,Caz+,Mg,Co)和酸报离子(SO.卜,I一)等.其中有的离子直接或与茚三酮反应生成近似兰紫色物质,干
5、扰AA的测定.固此.测定前必须对样品去杂对应用除杂程序的几点说明,4.1加入荆的量或通入气体的时阿,应视不同AA添加荆而定.一般情况.o.01MBaCIj加2-5ml10的NI-I,H:O加58ml通入cO#和H:s时间是13分钟/改.样品中1的含量的计算式:lvS():l二Xl00m公式中:1ys赖氨酸.w在标准曲线上查得的样品中lys的mg数n样品处理后的定容体程乘以比色时取掖的稀释倍数之积与比色时取掖体积之比tm称取AA添加荆之质量,g6验证先将含Cu(814.6ppm),Fe(5458ppm),Zn(4892ppm),Mn(107印pm),Co(11.6ppm),Ca(35.6),Mg
6、(765.8ppm)的无机盐混合均匀(税微量元素添加荆后),再将赖氨酸接0.1,0.5,1,212的梯度(为实际值)分别加入微量元素添加荆中,生产出AA添加荆(代号为A,B,CN).再按以上弁绍方法攫喧样品中lys的含量.测定结果及统计见上表.由表申可见,茚三酮比色法测定AA添加剂中lys的含量是可行的,不仅解决了缺少AA自动分析仪仍可检测AA含量的迫切问题,而且检测范围宽.准确性高.因此,这种方法很值得加以推广应用.在应用中应注意I6.1操作要精细,在除杂程序中不得将游藏有任何损失.四川畜牧兽医1995年3月第一期堡*a表示经t检验,铡皇值与实两值差异极不显着(P<o.01)?b6.2
7、在睬杂中,为了尽可能除去各种干扰因素?可反复加入(通人)沉淀荆.多次处理.直至无干扰离子(或E示经t捡鼙,器窟值与实两值差异不显薯(P<o?os)?I高潞羊耐可先甩茚三酮比色法制定出AA总量,尔后再嗣算绋J仪器(如旋光仪)测定某一种(或几种)从的分另j【台参虹羔羊成括率.减少死亡数.加快4850支半细毛羊新品种培育步伐有重要作用.本试验于19911993年在昭觉县好各草种场进行.经过三年试验探明了4850支半细毛羊在当地生态条件下的适宜产羔月份.现将试验结果报告于后.1试验地区的气候环境试验地昭觉县好答草种场,海拔2300米.午均温l0.,7月最热.月均温18.2.极端最高温3z.9C,
8、1月最砖,月均温1.授端最低温一zo.6,年降雨量11001200毫米,相对温度6070,无霜期226天,气候特点表现为冬寒春旱,夏秋温暖湿润.牧草生长l1月枯萎,次年4月返青.产羔季节的月均气温为11l2月6.5.12月2.4.34月10.5.2试验材料与方法在昭觉县好古草种场选择4850支半细毛母羊?#支荤l四川农业土学胨圣偶最艟审阅.特壁谢3结果与分析t3.I不同月份出生羔羊初生重,斯奶重,1.5岁育成体重比较见表1.由表l看出lll2月份出生的公母羔羊比12出生的公母羔羊分别高0.34l【g和0.5kg(高8.3和l4.卫4).比34月份出生的公母羔羊分男提高1.36kg和1.55kg(高44.73和63)l断奶重比12月出生的公母羔羊分别提高3.54kg和z.64kg(高20.5和17),比34月出生公母羔羊分别提高5.37kg和4.45kg(高35.4和32.5)l育成羊体重比12月出生的公母羔羊分别提高4.50l【g和4+l8kg(高10.5和11.6),比34月出生的公母羔羊舟男提高8.82kg和8.”/Tkg(高22.8和27.9l).以上结果表明,1112月份出生羔羊的卸生重,断奶重,育成重都明显高于l2月份出生的羔羊和34月出生的羔羊.