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1、酶工程设备层析设备和离子交换设备,1,第九章 层析设备和离子交换设备,酶工程设备层析设备和离子交换设备,2,一、层析法,1、定义 利用混合物中各种组分的物理化学性质不同，分离、分析多组分混合物的一种方法。 固定相：固体或液体； 流动相：气体或液体； 当流动相流过固定相时，各组分以不同的速度移动，而达到分离的目的。,酶工程设备层析设备和离子交换设备,3,2、层析法分类 按两相的状态来分： 流动相 固定相 按固定相的使用形式分： 柱层析、纸层析、薄层层析 按分离机制分： 吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤、其它层析（如亲和层析）等,酶工程设备层析设备和离子交换设备,4,二、柱层析分离基本原
2、理,（一）、吸附柱层析 原理：利用固体吸附剂对混合试样各组分的吸附力不同而使混合物中各组分分离。 吸附力：离子引力 范德华力 H键 等 固定相：固体吸附剂 常用：活性炭，氧化铝，硅胶等 流动相：洗脱剂 常用纯溶剂或混合溶剂（不含水，且不与水互溶） 吸附力较强的组分，移动的距离小，后出柱；吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。,酶工程设备层析设备和离子交换设备,5,（二）、分配柱层析 原理 分配层析是利用混合物中各组分在两种不相混溶的溶剂间分配系数K的不同，使各组分得以分离。 分配系数小的先出柱；分配系数大的后出柱 固定相：液体，常用水或水混合液体 支持剂：硅胶、硅藻土、纤维素等。 流动相：一
3、般是有机溶剂,酶工程设备层析设备和离子交换设备,6,（三）、离子交换柱层析,离子交换柱层析是以离子交换剂作为固定相，分离离子型化合物的方法。 1、原理 利用各种离子对离子交换树脂的亲和力的不同，而使离子型化合物得以分离。 亲和力大，移动慢，不易洗脱； 亲和力小，移动快，易洗脱下来,酶工程设备层析设备和离子交换设备,7,2、离子交换树脂 结构 由三部分组成： 一部分是交联的具有三维空间立体结构的网络骨架；一部分是联结在骨架上的功能基（活性基）；一部分是活性基所带的相反电荷的离子，称为可交换离子。,酶工程设备层析设备和离子交换设备,8,（2）离子交换树脂的分类 对强碱性产物宜选用弱酸性树脂,对弱碱
4、性产物宜选用强酸性树脂;弱酸性产物宜用强碱性树脂,强酸性产物宜用弱碱性树脂,酶工程设备层析设备和离子交换设备,9,3. 离子交换柱层析操作步骤 树脂选择与处理装柱样品上柱欲分离组分吸留水洗（除杂物）洗脱收集再生 常用洗脱剂：酸碱盐,酶工程设备层析设备和离子交换设备,10,（四）、凝胶层析,1、原理： 利用多孔凝胶为固定相，是根据料液中溶质相对分子质量的差别进行分离的液相层析法。 2、操作： 装柱加样洗脱 3、常用凝胶 聚丙烯酰胺凝胶、葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶,酶工程设备层析设备和离子交换设备,11,三、柱层析设备,进样系统、 层析柱、 收集器 检测系统,酶工程设备层析设备和离子交换设备,12,1
5、、进样系统 贮液罐:装流动相 材料：玻璃、不锈钢或氟塑料 泵：将液体连续输送到层析柱 恒压泵 恒流泵 进样阀：一般采用六通阀 2、层析柱,酶工程设备层析设备和离子交换设备,13,（a）自制简易层祈柱；（b）普通商品柱； （c）双底板层析柱,酶工程设备层析设备和离子交换设备,14,3、组分收集器,酶工程设备层析设备和离子交换设备,15,4、检测器 紫外吸收检测器 示差折光检测器 电导检测器 荧光检测器,酶工程设备层析设备和离子交换设备,16,四、离子交换设备,1、一般离子交换罐 外型：椭圆形底及顶的圆筒形设备 上部：溶液分布装置 底部：多孔板、筛网及滤布以支持树脂层，或者用石英石或卵石直接铺于罐
6、底 罐顶罐底各种进出口,酶工程设备层析设备和离子交换设备,17,2、反吸附离子交换罐 被交换的溶液由罐的下部导入，其流速和粘度以使树脂在罐内呈沸腾状态而不溢出罐外为宜，交换后的溶液则由罐顶的出口溢出 优点：省去菌丝过滤 、液固两相接触面大而且较均匀，操 作时不产生短路、死角，以及流速大和生产周期短 3、混合床交换罐 P138,酶工程设备层析设备和离子交换设备,18,第十章 蒸发与结晶设备,酶工程设备层析设备和离子交换设备,19,一、蒸发,（一）概述 1、定义 蒸发是利用溶质与溶剂挥发度的差异，提 高溶液浓度的一种方法。 蒸发必要条件： 不断供给热能； 不断排除蒸汽 蒸发方式： 自然蒸发； 沸腾
7、蒸发 2、蒸发目的 制取浓溶液 得过饱和溶液 纯化溶剂,酶工程设备层析设备和离子交换设备,20,3、分类 （1）按操作压力： 常压 加压 减压（真空蒸发） （2）按蒸汽利用情况： 单效蒸发：凡是在蒸发器内蒸发所产生的二次蒸汽不再加以利用，此种操作称为单效蒸发。 多效蒸发：若干个蒸发器串联起来，将前一个蒸发器产生的二次蒸汽引人后一个蒸发器的加热室作为热源加以利用，此种操作称多效蒸发,酶工程设备层析设备和离子交换设备,21,（3）按料液流程： 单程型：料液以液膜形式一次通过加热 室不进行循环蒸发 循环型：料液在蒸发器内做循环流动。 自然循环、强制循环 （4）按加热部分的结构 膜式 非膜式,酶工程设
8、备层析设备和离子交换设备,22,（二）常用蒸发设备 主体设备：蒸发器（加热器、分离器） 附属设备：冷凝器、除沫器、真空装置 疏水装置 1、单程长管膜式真空蒸发器 特点：料液不做循环流动；料液呈膜状流 动；真空操作；适用于热敏性物料 细长管束；蒸汽壳程，料液管程 根据物料流向不同分为： 升膜式、降膜式 、升降膜式（P145）,酶工程设备层析设备和离子交换设备,23,升膜式： 料液预热至接近沸点后进入蒸发器 料液高度约为管高1/51/4 P146 长管内液膜形成过程： 适用于：蒸发量大（稀溶液）、热敏性物料、易起泡物料 不适用：易结晶结垢及粘度大溶液,酶工程设备层析设备和离子交换设备,24,降膜式
9、： 结构与升膜式相似；关键：液体分布装置 适用于：热敏性及浓度较大物料,酶工程设备层析设备和离子交换设备,25,升降膜式 稀溶液先经过升膜区的浓缩，进入器顶，进行汽液重新分布后，初步浓缩后粘度较大的溶液再经过降膜区，进一步浓缩，然后引入分离器进行汽液分离。,酶工程设备层析设备和离子交换设备,26,2、循环式薄膜蒸发器 升膜式自然循环P147 图7-3 降膜式借助泵循环 3、刮板式薄膜蒸发器 薄膜由机械作用形成 下段（加热蒸发）+上段(气液分离) 下段：夹套+搅拌轴+刮板 料液在加热蒸发段顶部加入，在重力及旋转刮板作用下以螺旋状液膜形式下降，下降过程中被浓缩，产生的二次蒸汽所带溶液被刮板甩至器壁
10、，重新被浓缩,酶工程设备层析设备和离子交换设备,27,4、离心式薄膜蒸发器 P148 图7-5 主要结构：离心盘 工作过程：料液经泵送至蒸发器后由喷嘴喷至离心盘背面，在离心力作用下形成薄膜且迅速向盘的周边运动；离心盘夹套内通入蒸汽后，对其表面液膜进行加热蒸发，所得浓缩液汇集于周边液槽内由泵排出；蒸汽放热后成冷凝水，受离心力作用甩至夹套下边缘汇集，由中心轴疏水装置排出；形成的二次蒸汽经离心盘中央汇集上升，由真空泵抽出,酶工程设备层析设备和离子交换设备,28,5、蒸发器附属设备 （1）气液分离器（除沫器） 装于蒸发器顶盖下面的分离器,酶工程设备层析设备和离子交换设备,29,装于蒸发器外面的分离器,
11、酶工程设备层析设备和离子交换设备,30,（2）冷凝器 作用：冷凝二次蒸汽 分离二次蒸汽中不凝性气体 间接式、直接式（常用）（P149图7-8） （3）真空装置 喷射泵、往复式真空泵,酶工程设备层析设备和离子交换设备,31,6、多效蒸发 （1）工作原理： 将若干个蒸发器串联起来，利用将各效蒸发器操作压力依次降低使相应的液体沸点也降低，从而使二次蒸汽作为下一效蒸发器的加热蒸汽，通过若干次二次蒸汽利用而进行的操作。 （2）流程：P150 并流：溶液与蒸汽的流向相同，称并流。 逆流：溶液与蒸汽的流向相反，称逆流。 错流：溶液与蒸汽在有些效间成并流，而在有 些效间成逆流。 平流：每一效都加入原料液的方法
12、。,酶工程设备层析设备和离子交换设备,32,二、结晶,1、定义 指溶质从过饱和溶液中析出晶体，形成新相的过程 2、饱和曲线和过饱和曲线 未饱和溶液：若添加固体则固体溶解 饱和溶液：溶液恰好饱和，溶质既无溶解也无结晶，即溶质与溶液处于平衡状态，此溶液称为饱和溶液 过饱和溶液：溶质浓度超过饱和溶解度时，该溶液称之为过饱和溶液,酶工程设备层析设备和离子交换设备,33,酶工程设备层析设备和离子交换设备,34,3、结晶过程 形成过饱和溶液P155 形成晶核 晶核：过饱和溶液中首先形成的极细微的单元晶体 形成晶核过程理论上可分为两类： 溶液过饱和之后自发形成的称一次成核 加入晶种诱发的称二次成核 晶体生长
13、：晶核成长为一定形状晶体,酶工程设备层析设备和离子交换设备,35,4、工业常用的起晶方法 自然起晶法：溶剂蒸发进入不稳定区形成晶核，当产生一定量的晶种后，加入稀溶液使溶液浓度降至介稳区，新的晶种不再产生，溶质在晶种表面生长。 刺激起晶法：将溶液蒸发至介稳区后，冷却，进入不稳定区，形成一定量的晶核，此时溶液的浓度会有所降低，进入并稳定在介稳区使晶体生长。 晶种起晶法：将溶液蒸发后冷却至介稳区的较低浓度，加入一定量和一定大小的晶种，使溶质在晶种表面生长,酶工程设备层析设备和离子交换设备,36,5、常用结晶设备 根据结晶方法不同可分为： 冷却结晶器：采用降温来使溶液进入过饱和，并不断降温，以维持溶液一定的过饱和浓度进行育晶，常用于温度对溶解度影响比较大的物质结晶。P156图7-12、7-13 蒸发结晶器：采用蒸发溶剂，使浓缩溶液进入过饱和区起晶，并不断蒸发，以维持溶液在一定的过饱和度进行育晶。P156图7-14 真空结晶器：一般没有加热器或冷却器，料液在结晶器内闪蒸浓缩并同时降低了温度，因此在产生过饱和度的机制上兼有蒸除溶剂和降低温度两种作用。P156图7-15,