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1、课题85：动物细胞的融合与单克隆抗体【课标要求】动物细胞融合和单克隆抗体。【考向瞭望】动物细胞培养、单克隆抗体的制备及应用。【知识梳理】一、细胞融合指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。参与融合的细胞基因型可相同也可不同，但细胞杂交只能发生在基因型不同的细胞间。二、诱导融合的因素灭活的仙台病毒、聚乙二醇、电刺激等。三、应用杂交瘤技术制备单克隆抗体。四、植物体细胞杂交和单克隆抗体制备植物体细胞杂交动物细胞融合（单克隆抗体制备）理论基础（原理）细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶）注射特定抗原免疫处理正常小鼠促融（1）物理法：电刺激等（2
2、）化学法：聚乙二醇（PEG）（1）物化法：与植物细胞融合相同（2）生物法：灭活的仙台病毒过程第一步原生质体的制备（酶解法）正常小鼠的免疫处理第二步原生质体融合（物化法）动物细胞融合（物化生法）第三步杂种细胞的筛选与培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯优点克服植物远缘杂交不亲和的障碍从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中获得单抗【基础训练】1、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ B ）A、将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B、用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C、用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
3、融合D、筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体2、将小鼠细胞和人体细胞融合成杂交细胞后，各自的表面蛋白质平均分配到膜表面（如图），该实验说明了细胞膜（ B ）A、由蛋白质分子和磷脂分子组成B、具有一定的流动性C、具有选择透过性D、具有保护细胞内部的作用3、科学家从某些能无限增殖的细胞细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下相关问题。（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒。（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是
4、筛选出杂交瘤细胞。第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。（3）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答：酶A是指限制性核酸内切酶，酶B是指DNA连接酶。对已导入重组质粒的“”进行“检测”的目的是检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达（或检测受体细胞是否显示出目的基因控制的性状）。题目中所指的细胞是浆细胞，所指的细胞具有的特点是既能无限增殖又能产生特定的抗体。（4）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示用文字表示该过程：（5）可利用单抗作为特异探针，来研究相应抗原蛋白的结构和功能。【高考模拟】4、（2007
5、天津理综5）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ D ）A、用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B、体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C、将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D、利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者5、（2008全国卷5）下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ D ）A、电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B、去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C、小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制务单克隆抗体D、某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同- 2 -用心 爱心 专心