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1、1.2.1 啶虫脒 /羧甲基壳聚糖 -海藻酸钠凝胶球的制备 配制一定浓度的海藻酸钠溶液,加入吐温80乳化剂50 mL,孚L化5 min,按比例1 : 3加入羧甲基壳聚糖和啶虫脒混合物,混合后海藻酸钠的浓度为 3%,啶虫脒的浓度为 1%,制成 100 mL 悬浮液。该悬浮液用 5 mL 注射器 （8#针头）滴入磁力搅拌下滴入100 mL 氯化钙溶液中 ,再将 25 mL 1%的戊二醛倒入与其交联,40 C交联50 min后,去除交联液 用100 mL去离子水洗涤凝胶球 数次,常温下干燥至恒定质量 ,得黄色凝胶球。2 海藻酸钠 /壳聚糖微胶囊的制备及其影响因素2.1 制备原理薛伟明等 通过理论分析
2、与试验研究，认为Ca2+引起海藻酸钠凝胶机理为:1个Ca2+与海藻 酸钠分子链段中 2 个 GG 片段通过 4 个配位键形成配合物 ,即“蛋格 （Egg-box） ”结 构（图1）,其中，由 G单元的5-C00-和2-OH参与配位键形成。由于壳聚糖分子链上有大量的伯氨基 ,海藻酸钠的分子链上有大量的羧基 ,在静电力作用下 , 可以通过正、负电荷吸引形成聚电解质膜（图2）。李沙等7通过差示扫描量热法（DSC）探讨ACA 的成型机理 ,证实各组分不是以各自独立的形式存在于样品中,而是发生了静电相互作用,以新的相互结合状态存在 ;Ribeiro 等8研究表明海藻酸钠羧基和壳聚糖氨基之间的静电 相互作
3、用是复杂结构的主要力量。2.2 制备方法制备海藻酸钠胶珠最常用的方法是锐孔-凝固浴法 9-11, 但该法受针头直径和海藻酸钠溶液黏度的限制 ,制备的凝胶珠粒径较大 ,为了克服这些缺点 ,出现了一些改进技术。 如静电液滴生 成技术 12-14, 在针头和凝胶浴之间形成静电场 ,从而增加了电场力 ,可更容易地克服针孔内 壁的黏滞阻力及液滴自身的界面张力 ,由此得到颗粒更小的凝胶珠。此外 ,还有离心喷雾造粒 法15、喷雾法与高压静电场结合法16、乳化法17-19 、气体搅拌乳化 （内源凝胶 ）与膜乳化法20 等。聚电解质络合原理制备海藻酸钠/壳聚糖微胶囊 （ACA）, 是以海藻酸钠 （钙）胶珠作为微
4、胶囊的内核 ,在外部要包覆聚合物膜层才能最终形成微胶囊。其方法可分为一步法、两步 法和复合法。2.2.1 一步法 主要有 2 种方式 :一种方式是将壳聚糖和氯化钙的混合溶液直接滴入海藻酸钠溶液中 ,最终形成含海藻酸钙凝聚层、壳聚糖 /海藻酸钠络合层、壳聚糖沉淀层 3 层膜,内部是液态的微胶囊。王娜等21采用此法制备 ACA,固定化木聚糖酶，使酶的热稳定性、重复操 作稳定性和贮藏稳定性有了明显提高。另一种方式是反向操作 ,即将海藻酸钠溶液滴入壳聚 糖和氯化钙的混合溶液中形成微胶囊,这种方式较为常用。付加雷等22用此法制备干扰素-tau（IFN-tau） 微囊 ,得到的载药微囊外层较致密、内芯较疏
5、松,最外层是沉淀出的壳聚糖外层 ,一般不含 IFN-tau; 中层是均匀分散有 IFN-tau 的壳聚糖 /海藻酸钠的复合膜 ;内芯是均匀分散有 IFN-tau 的海藻酸钙芯料。陶呈斐等 23用此法制备酮咯酸氨丁三醇海藻酸钠微囊 ,优化工艺 条件后制得的微囊包封率达到 90%,载药量 44%,在水中的释药行为符合 Higuchi 方程。熊何 健等24对茶多酚的包埋 ;李强等 25对八角茴香油的包埋 ;程超等 26对鸭跖草黄酮类物质 的包埋 ,均采用这种方式制备海藻酸钠/壳聚糖微胶囊。2.2.2 两步法 类似于传统的 APA 微胶囊的制备方法 ,首先将海藻酸钠溶液滴到氯化钙溶液中钙化成核 ,然后
6、分别用壳聚糖、海藻酸钠溶液进行包覆成膜27。陈爱政等 28用 ACA 固定化细胞发酵木糖醇 ;付颖丽等 29用 ACA 固定化培养大肠杆菌 ;张杰等 30用 ACA 固定化 克雷伯氏杆菌 ;白雪莲等 31用 ACA 固定化苹果酒酵母 ;熊鹰等 32 用 ACA 包埋人卵巢癌细 胞;张武杰等 33 用 ACA 包埋载间充质干细胞 ;刘利萍等 34 用 ACA 包埋姜油树脂 ,而他们制 备 ACA 的方法均采用两步法。2.2.3 复合法 复合法是在一步法和两步法基础上建立起来的 ,先制备海藻酸钠 /壳聚糖微胶囊, 然后再以双功能团分子 （常用戊二醛、 1,6-己二异氰酸脂或苯四甲酸二酐溶液）对微胶囊的表面进行修饰 ,形成壳聚糖和双功能团分子的交联层 35 。孙万成等 36-37研究了 ACA 作为 固定化磷脂酶 A1的载体，加入1%戊二醛在4C环境进行表面修饰10 h,壳聚糖氨基可与戊二醛基形成 shiff 氏碱,在胶囊表面形成一层致密的保护膜。