1、消毒消毒与与灭菌的效果菌的效果监测检验科检验科 邵春红邵春红医疗机构消毒技术规范医疗机构消毒技术规范解读解读医医疗机机构构消毒技消毒技术规范范1.1.消毒消毒与灭与灭菌的基本原菌的基本原则则；2.2.清清洗洗与清洁与清洁，消毒，消毒与灭与灭菌方法；菌方法；3.3.清洁清洁、消毒、消毒与灭与灭菌的效果菌的效果监测监测。院感相院感相关关标本本压力蒸汽灭菌空空气气样本的采集本的采集采采样样要求要求提出选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本的采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。（注意：采（注意：采样样前，前，关闭门关闭门、窗，在无人走、窗，在无人走动动的情的情况况下，下，
2、静静止止10min10min后采后采样样。）。）采采样样高度（沉降法）高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m1.5m处。空空气气样本的采集本的采集布点方法布点方法室内面积30，设一条对角线上取3点采样，即中心一点，两端各距离墙1m处各取一点；室内面积30，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙1m。采采样样方法方法将直径9cm普通营养琼脂平板放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5min5min后盖上平皿盖及时送检。空空气气样本的本的检测与与报告告检测检测培培养养将送检平皿置361恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。结结
3、果果处处理理计算所有平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌，则挑取可疑菌落进行鉴定。计计算公式算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿暴露时间）报报告告:沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿暴露时间）例如：2cfu/(5min直径9cm平皿)。空空气气样本的本的结果判定果判定.洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循50333.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数cfu（直径平皿）。.儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输
4、血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数 4cfu/(5min直径9cm平皿)。物体表面物体表面标本的采集本的采集采采样时间样时间在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。物体表面物体表面标本的采集本的采集采采样样方法方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将拭子放入装有10ml物表采样液试管中送检。门把手等小型物体则利
5、用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采采样样物体表面有消毒物体表面有消毒剂残剂残留留时时，采，采样样液液应应含相含相应应中和中和剂剂。物体表面物体表面标本的本的检测与与报告告检测检测方法方法：充分震荡采样管后，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40-45的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，37恒温箱培养48h,计数菌落数，怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。计计算公式算公式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数采样液稀释倍数/采样面积。报报告方式告方式：菌落数cfu/cm2 小型物体表面的结果用cfu/件表示物体表面物体表面标本的本的结果判定果判定1.1.洁
6、净洁净手手术术部、其他部、其他洁净场洁净场所，非所，非洁净洁净手手术术部（室）、非部（室）、非洁净洁净骨髓移植病房、骨髓移植病房、产产房、房、导导管室、新生管室、新生儿儿室、器官移植室、器官移植病房、病房、烧伤烧伤病房、重症病房、重症监护监护病房、血液病病病房、血液病病区区等；物体表等；物体表面面细细菌菌落菌菌落总数总数5cfu/cm5cfu/cm2 2。2.2.儿儿科病房、母科病房、母婴婴同室、同室、妇产妇产科科检查检查室、人流室、治室、人流室、治疗疗室、室、注射室、注射室、换药换药室、室、输输血科、消毒供血科、消毒供应应室、血液透析中心（室、血液透析中心（室）、急室）、急诊诊室、化室、化验
7、验室、各室、各类类普通病室、感染疾病科普通病室、感染疾病科门诊门诊及其病房等，物体表面及其病房等，物体表面细细菌菌落菌菌落总数总数10cfu/cm10cfu/cm2 2压力蒸汽力蒸汽灭菌效果的菌效果的监测标标准指示菌株准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢采采样样方法：方法：将指示剂放置于标准试验包中，置于压力蒸汽灭菌器内最最难灭难灭菌的位置菌的位置处，执行正常灭菌过程，完毕后将指示剂送检。压力蒸汽力蒸汽灭菌效果的菌效果的监测检测检测方法方法：将指示菌片捏碎，放入56培养箱培养48h，观察结果。如指示菌片颜色为紫色紫色，说明无嗜热脂肪杆菌生长；如指示剂颜色为黄黄色色则说明有嗜热脂肪杆菌生长。报报告方式告
8、方式：“检出/未检出嗜热脂肪杆菌”。结结果判定果判定：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。皮皮肤肤表面表面标本的采集本的采集采采样时间样时间按照产品使用说明规定的作用时间，达到消毒效果后及时采样。采采样样方法方法同物体表面标本，不规则的皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。医医护人人员手表面手表面标本的采本的采样采样时间采样时间在接触病人或从事医疗活动前进行采样。医医护人人员手表面手表面标本的采本的采样采样面积及方法采样面积及方法被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的无菌拭子在 双手
9、指曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹面积30cm30cm2 2），剪去手接触部位，将拭子放入装有10ml物表采样液的试管中送检。皮皮肤肤表面表面标本本检测检测方法方法计计算公式算公式 同物体表面同物体表面 报报告方式告方式计计算公式算公式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数采样液稀释倍数/采样面积。皮皮肤肤表面表面标本的本的结果判果判断断结结果判定果判定：皮肤消毒效果的判定标准遵循WS/T313中外科手消毒卫生标准。a)卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应10cfu/cm10cfu/cm2 2。b)外科手消毒，监测的细菌菌落总数应5cfu/cm5c
10、fu/cm2 2。消毒液的送消毒液的送检采采样样要求要求采集使用中的消毒剂。采集方法采集方法用无菌注射器抽取1ml被检样液，加入9ml消毒中和液，混匀。消毒液的培消毒液的培养与养与报告告培培养养方法方法：同物体表面标本计计算公式算公式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落数10稀释倍数报报告方式告方式：菌落数CFU/mL。结结果判果判断断：使用中灭菌用消毒液：无菌生无菌生长长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10CFU/mL10CFU/mL；其他使用中消毒液染菌量 100CFU/mL100CFU/mL。清清洁用品的采用品的采样采采样时间样时间 消毒后、使用前进行采样。采采样样方法方法 布巾、地
11、巾等物品可用无菌的方法剪取1cm3cm，直接投入10ml含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。清清洁用品的用品的报告告与与结果判果判断断检测检测方法方法：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。报报告方式告方式：检出/未检出细菌或真菌，报告为“检出菌”。结结果判定果判定：未检出致病菌为消毒合格。其他其他标本本内镜样内镜样本的采本的采样样用10ml中和液反复冲洗镜后取回收液于试管中送检。透析液的采透析液的采样样用灭菌试管无菌操作采集透析液5ml送检。内内镜标本的本的检测与与报告告培培养养方法方法：同物体表面标本，若临床要求培养致病菌，则收到标本后，取0.1ml均匀接种于普通琼脂培养基表面，放入35培养箱培养48h，观察结果。检出细菌时，则挑取可疑菌落进行鉴定。计计算公式算公式：内镜细菌菌落总数（cfu/件）=平板上菌落的菌落数10报报告方式告方式：“菌落数cfu/件”。院感院感标本送本送检时间空空气气培培养标养标本：周一至周三本：周一至周三其他其他标标本：周三上午本：周三上午谢谢谢谢 谢谢谢谢
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