《不同浓度1,二磷酸果糖对IL-1β损伤的乳鼠胰岛细胞功能.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《不同浓度1,二磷酸果糖对IL-1β损伤的乳鼠胰岛细胞功能.doc（7页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、收稿日期：2004-03-11修回日期：2004-06-14基金项目：四川省教育厅青年基金（2002B14文章编号：1001-6325（200502-0183-02研究短文不同浓度1,6-二磷酸果糖对IL-1B损伤的乳鼠胰岛细胞功能的影响郑倩1力海立2,张能2,曹弟勇3,康健4,敬华娥1（1.川北医学院生理教研室，四川南充6370072重庆医科大学生理教研室，四川重 庆 400016川北医学院；3.药理教研室;4.解剖教研室，四川南充637007中图分类号:R587文献标识码:A1,6-二磷酸果糖（Fructose-1,6-Disphosphate ,FDP能在分子水平上调节细胞代谢中若干酶活
2、性，恢复和改善细胞代谢，对多种组织 细胞有明显的保护功能。本实验室已报道 510mmol /L FDP对白介素-1 B （也1 B损 伤的胰岛有保护作用1,但是笔者也发现低浓度和高浓度的 FDP不具相同作用。提 示应用FDP需注意剂量对其效应的影响。1材料和方法1.1胰岛细胞分离与培养出生13d的Wistar大鼠20只,无菌取出胰腺，清洗,剪碎,V型胶原酶溶液消 化,Hanks液终止消化，清洗离心，加入含15%小牛血清的RPMI-1640培养液，制成细 胞悬液，调节细胞浓度至1X109L -1,置96孔板培养。随机分为：正常对照组、IL-1B 损伤组、IL-1B +FDP组，每组6孔。正常对照
3、组以培养液培养，其余各组加入20U /mL的IL-1 B作用20h后,于保护组中分别加入不同浓度的 FDP继续培养30h进行各项检测。1.2细胞活性检测：用MTT法。1.3胰岛素分泌量测定：用放免法检测胰岛素的基础分泌量和高糖刺激胰岛素分 泌量。1.4细胞培养液中NO含量和NOS活性的检测：用NO和NOS试剂盒检测。1.5Ca 2+i 测定：Fura-2荧光检测技术。2统计学方法结果以均数妳准差（x ±表示，采用方差分析。SAS软件处理完成。3结果3.1不同浓度FDP对IL-1 B损伤胰岛细胞活性影响：表1损伤组与正常对照组比较光密度值（A值明显降低（P <0.01表明细胞活性
4、下 降;FDP组与损伤组比较A值改变无明显变化。3.2胰岛素分泌量测定IL-1B作用后胰岛细胞：基础分泌胰岛素量和高糖刺激分泌量显著下降（P <0.01而低、高浓度FDP组未见明显变化。3.3细胞上清液中NOS和NO 2-/N0 3-的测定：损伤组与正常对照组比较可见细胞上清液中NOS活性与NO 2-/N0 3-含量均明显升高（P <0.01与FDP作用后,NOS的活性和NO 2-/NO 3-的含量无明 显变化（表1。3.4细胞内钙离子浓度的变化:FDP加入IL-1B作用后的胰岛细胞，与损伤 组比较细胞内Ca 2+i明显降低（P <0.01 （表 1。表1不同浓度FDP对IL
5、-1 B损伤细胞活性、基础胰岛素分泌量和葡萄糖刺激胰岛 素分泌量、NOS活性、NO 2-/NO 3-含量及细胞内钙离子浓度的影响Table 1Effects of differe nt concen tratio ns of FDP on cell viability ,basal and glucose- stimulated insulin levels ,NOS activity ,NO 2-/NO 3-content and Ca 2+i in supernatent in islets（x ± ,n =6groups FDP mmol /L A velue basic in
6、 suli n levelpU /mL glucose stimulated insulin level U /mL NOQU /mL NO 2-/NO 3-卩mol /L Ca 2+icontrol -0.25 0.020425.67 ±.85204.50 1±.788.69 07384.67 ±.2373.42 1d79IL-group - 0.12 ±012*237.00 22.21*90.17 6+11*19.92 1d56*457.64 1±.29*328.50 2±.28*IL-1B +FDP110.13土 0.00823
7、0.83 ± 11.5896.62 ± 8.6416.63 ± 0.99292.16 ± 13.99152.72 ± 11.86#IL-1B +FDP2250.13± 0.015225.16 ± 12.4687.66 ± 8.2418.23 ± 1.24429.01 ± 19.82216.39 ± 15.32# IL-1 B +FDP3500.10 ±.016220.50 i5.6385.46 9.5911.09 3.26186.50 12.34233.61 21.76#*P
8、<0.01compared with control ;#P <0.01compared with IL-1 Bgroup 2005年2月第25卷第2期基础医学与临床Basic & Cli nical Medici ne February 2005Vol.25No.24讨论510mmol/L FDP可使IL-1 B损伤的的胰岛细胞线粒体酶活性提高；基础和高糖 刺激的胰岛素分泌量增加。其机制可能与 FDP抑制NOS活性，使NO生成减少，及 降低细胞内游离Ca2+i有关1。但本实验证实1、25和50mmol/L FDP未能使已降低的细胞活性升高 并且不能反转受损的胰岛细胞分泌功
9、能。提示低和高浓度FDP对IL-1 B破坏的胰岛细胞可能不具保护作用，Fujii E2等认为FDP对窒息的羊胎的海马神经元无保护 作用，与本结果相似。其机制可能与 FDP钠盐已被水解成果糖和二磷酸，而同量的果 糖和二磷酸无保护作用；通过戊糖-磷酸途径分流,FDP调节NADP生成NADPH;限 速酶集中在局部以及存在其它中介影响有关2。实验显示低浓度和高浓度FDP不 能降低NOS的活性,NO的生成未减少，这可能是FDP不提供保护作用的原因之一。 但是相同浓度FDP仍可降低细胞内钙离子浓度，其机制需进一步研究。本结果提示 在临床应用中FDP的剂量对其效应的影响应予以重视。参考文献：1 郑倩方海立,
10、张能.1,6-二磷酸果糖对IL-1 B致胰岛细胞损伤的保护作用J.中国糖尿病杂志，2003,11(3:218-219.2 Fujii E,Kodama Y,Takahashi N,et al.Fructose-1,6-diphos-phate did not affect hippocampal damage caused by10 min of complete umbilical occlusi on in fetal sheepJ.Neurosci Lett, 2001,309(1:49-52.他汀类药治疗显著降低血液透析病人死亡风险据发表于1月美国肾病杂志(Am J Kid ney D
11、is,2005;45:119-126上的一项研 究称，他汀类药显著降低了血液透析病人的心性或非心性死亡风险。研究者提供的 资料显示，他汀除了有心脏保护作用，还有抗增生、消炎、抗氧化、抗凝和免疫抑制 作用。以新型微创技术进行的腭手术安全减少了打鼾德慕尼黑大学医院的默拉 Joachim t.Maurer和同事发表于1月的耳鼻喉科学- 头、颈外科杂志（Otolaryngol Head Neck Surg,2005;132:125-131的一项研究表明, 以一种微创外科技术在软腭内植入柱状种植体可以安全、有效地治疗原发性打鼾。太多维生素E损健康据英国BBC新闻（BBC NEWS11月11日报道，一项最
12、新研究发现，服用大量 补充维生素E可能会危害身体健康。维生素E是一种抗氧化剂，大多数人认为补充维生素E可以帮助他们延缓衰老， 可以保护心血管预防心脏病。不过，研究人员说，大多数复合维生素片一般含3540 个国际单位维生素E,这对健康也许会有 些微的益处”。但他认为，如果能从食物中 摄取足够的维生素E,服药补充毫无必要。坚果、食用油、全谷食物和绿叶蔬菜中 都富含维生素E。DHEA减少老年人腹部脂肪及改善胰岛素敏感性据美国华盛顿大学医学院的维拉利尔（Dennis T.Villareal发表于11月10日美 国医学会杂志（JAMA,2004;292:2243-2248上的一项报告，DHEA治疗似乎减
13、少了 老年男女的腹部脂肪，并改善了胰岛素敏感性。新的抗病毒技术可抑制小鼠的 RSV感染据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2005/1/24报道,发表于2005年1月的自 然医学（Nature Medicine中的研究报告称，南佛罗里达大学健康科学中心的研究人 员研发出一种新的抗病毒治疗，结合了纳米微粒和基因沉默技术以对抗呼吸道融合 瘤病毒（RSV这种病毒会造成严重支气管炎和哮喘。研究人员利用一项革命新技术，又称为RNA干扰或基因静默，可以关闭让RSV 在肺部复制的重要蛋白质之一 一NS1。研究证实RNA干扰可以瞄准病毒的NS1基因对于RSV治疗是很有效的，因为特别制造的RNA可以经过设计抑制蛋白质NS1。没有了 NS1,宿主的抗病毒就可以保持完整，使病毒无法复制。481 基础医学与临床 Basic&Clinical Medicine2005.25(2