DF-1细胞培养.doc

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_DF-1 细胞的传代培养和保存(一)材料DMEM细胞培养液: 10%的 DMEM细胞培养液,含10%胎牛血清。培养温度 :39.0 °C; ( 最大 . 40.0°C, 最小 . 38.0°C)胰酶 -EDTA消化液: 0.25% (w/v)胰酶 - 0.53 mM EDTA 溶液。(二)方法1. 弃掉细胞培养液。2. 用胰酶 -EDTA消化液冲洗细胞单层,除掉残余的细胞培养液。3. 向细胞瓶内加入 2.0 到 3.0 ml 的胰酶 -EDTA消化液,在倒置显微镜下观察细胞直到细胞单层分散开来(一般5-15 分钟)。注意 :消化细胞时禁止剧烈拍打或摇晃细胞瓶,不易消化的细胞可以放到 39°C助消化。4. 加入 6.0 到 8.0 ml 的 DMEM培养基至细胞瓶,轻轻吹吸混匀消化细胞。5. 取出部分细胞加入到新的细胞瓶中培养。6. 在 39 °C培养。传代率 : 一般推荐 1:2到 1:10 传代。注: 1:2 指一瓶传两瓶。(三)保存 :10%CS的 DMEM细胞培养液加入5% DMSO。保存温度 :液氮保存精品资料_Welcome ToDownload !欢迎您的下载,资料仅供参考!精品资料

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