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1、实验三细菌芽抱及荚膜染色观察实验目的：1、学习并掌握芽抱及荚膜的染色方法;2、初步了解芽砲杆菌及细菌荚膜的形态特征。芽砲是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成芽砲以及芽砲的形状、芽施在芽砲囊内的位置，芽砲囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。$个芽袍形成一个细菌眉透性低不易着色，用染料进行单 染 色，而芽砲囊内的芽砲不着色十由于芽砲壁ifi色时，菌体和芽一砲 或仅显很淡的颜色。为了呷吏芽苞着色便于观察，可用芽 胞染色法。芽抱染色的原理是：用弱碱性染色剂孔雀绿，在加热 条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽砲内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽砲一经着
2、色难以被水洗 脱。当再用对比度大的复染剂染色后，芽砲仍保留初染剂 的颜色，而菌体和芽胞囊被染成复染剂的颜色，使芽砲和菌体更易于区分。離塑哋却翩hi分为多糖或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色.易在用水冲洗时被除去，所以通常用衬托染色法染色，使菌体和背景着色,而荚膜不着色,在菌体周围形成一透明圈，由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观察。三、实验材料;菌种：苏云金芽砲杆菌、钾细菌染色剂：5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液;石炭酸复红，黑色素等实验方法:一芽抱染色K制片:涂片-干燥-固2、染色：加数滴孔雀绿染液于涂片上，用木夹夹住载 玻片 一端，在微火上加热至染料冒蒸气并开始
3、计时，维 持5min （其间补充染液防蒸干）。）3.4缓流水洗复染:用番红染液复染2分钟。缓流水洗、干燥5镜检：用油镜观察（芽砲呈亮绿色，菌体呈红色，或 可 观察到伴砲晶体）6x芽抱菌体二）、荚膜染色1、制片：取一滴无菌水于载玻片上，用接种环取 钾细菌在水滴中，制成涂片，晾干。（不可加热！2、染色：用石碳酸复红染色液染色3-4分钟，用水轻轻 冲洗，晾干。3、刮片：在玻片一端加一小滴黑色素，另外取一块干净的载玻片与黑色素接触，将黑色素在涂片上轻轻刮过，形成一薄层，自然干燥。4、镜检：菌体呈红色，荚膜无色，背景灰色。五、实验结果：1、绘图表示芽抱杆菌的形态特征。2、绘图说明你所观察到的细菌的菌体和荚膜的形思考题：1、为什么芽砲染色要加热？为什么芽砲及营养体能染 成不同的颜色？2、组成荚膜的成分是什么？涂片一般用什么方法固 定，为什么？