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1、 Amersham AKTAbasic层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。一系统组件及系统功能介绍1系统组件泵Pump系统泵：(system pump)双泵(A、B泵)，缓冲液及大体积样品输送。上样泵：(sample pump)样品输送。(2)阀 Valve七通阀：(INV-907)两个。1 .上样阀(sample valve),用于上样环切换 (load/inject)和系统泵清洗时废液管(waste) 切换；2 .流向切换阀(flow direction valve)
2、 ,用于层析柱流向切换 (downflow/upflow) 。其它组件梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900)。2系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。(1)缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备(Gradient)A、B泵分别放置A B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。(2)层析柱柱顶连接进样(七通)阀 1号口，柱后连接紫外流通池。上样上样阀上样：将样品储存在样品环(Sample loop),再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由系统泵将样品泵入层析柱。收集(选购)收集器收集：设置收集体积 (Frac size),可自动按条件收集。二开机程序1 开启电脑；2 打开AK
3、TAbasic电源；3 启动UNICOR瞅件，输入用户名 (User name) 和密码(Password),默认用户(default) 密码为default ,待AKTA自检结束后，在 system control窗口中显示系统准备就绪(Instruments are ready) 。三UUNICORN软件简介Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：Main: 1.系统关闭(Quit Program) 和退出、登陆(Log on/off) ;2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志等；3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；4.
4、 方法组编辑(MethodQueues),将几个方法组合在一起，依次运行。Method Editor: 1.方法编辑；2.缓冲液配方设置(如配方修改或新增配方等)System Control: 1.系统控制，可以手动控制 (Manual)或运行方法(Run Method);2.系统设置，包括 Alarms/Special/Monitors/Curves ;20-3-14Page 3 of 6 Amersham 3. 运行监测，有四个窗口： Run data/Curves/Flowscheme/Logbook。Evaluation:结果处理，如积分(intergrate) 、移动(shift)、
5、 计算(Subtract/Add/Multiply/Divide )、 平滑(Smooth)、截取(CutCurve)、绘制(Creat Curve)、打印(Print) 等在每个窗口中均有专家建议(Adviser)和帮助信息(Help)。四系统控制(System Contral)1 手动操作(Manual)1.1 手动操作命令简介Pump 泵Flow:设定系统泵流速Gradient:梯度设定PumpWashbasic:系统泵清洗SystemWash:使用缓冲液配置功能时，清洗系统2 2) Flowpath 流路InjectionValve:上样阀切换InjectionMark:插入记号Ala
6、rm & Mon 报警、检测WaveLength:选择监测波长(1-3个)AutoZeroUV:紫外吸收校零AveragingTime:计算紫外吸收平均值的间隔时间SetCondScale 0%:输入0%B时的电导SetCondScale 100%:输入 100%B 时的电导Alarm:设置压力、紫外、电导、pH等报警限Watch:监测参数设置，配合方法编辑中的 watch功能Frac 收集：(选购)Peak_Frac_Parameters: FracCollect_900: Frac_Stop_900: FeedTube:Peak_Fraction: Peak_FracStop:Ou
7、tletFraction:ResetFracNumber:(5) Others 其它Block:Next_breakpoint:BufferPrepRecipe:Set_Mark:End_Timer:Record on/off:1.2手动操作示例(1)梯度洗脱设定流速、梯度、计峰收集参数设定分布收集每管体积停止分别收集换管收集计峰收集每管体积停止计峰收集出口阀每风分段收集每段体积等设置 将当前分布收集的管号计为第一管调用程序块(只在方法运行时可用)跳到下一程序块(只在方法运行时可用)选择缓冲液配方插入提示语设定结束运行时间手动运行时开始或结束数据记录(2)自动配制缓冲pH及梯度 必须最先设定缓
8、冲液配方,记录图谱柱位、收集方法后即可运行。各命令无先后次序要求。然后设定其它参数如流速、pH梯度等。 运行Record on ”命令，开始记录图谱，停止记录则运行Record off ”命令。1.3 运行监测(Monitoring a run)在系统运行过程中，系统控制窗口同步显示系统检测的数据及各部件当前状态，共有四 个窗口，显示不同内容，可同时打开：Rundata:运行参数Curves:数据曲线Flow scheme: 系统流路图Logbook:运行记录2方法运行(Run Method)启动方式 方法一：从主菜单(main)窗口方法(method)栏中，双击所选方法。 方法二：从系统(s
9、ystem control) 窗口中，依次点击 File、Run,选择运行方法。 方法三：从系统(system control)窗口中，点击运行(Run)键，选择运行方法。五方法编辑 利用Wizard 编程精灵进行 六数据处理(Evaluation) 1数据浏览Evaluation 窗 口中可查看层析结果 (Chromatogram_Layout)和程序档案(Documentation) 等。1.1 数据加工最常用有曲线的积分、移动、计算(加减乘除)等：1.2 积分(integrate)(1)选择 Integrate>Peak integrate 或点击 Peak integrate 按
10、钮，打开积分窗口；(2)在积分窗口中选择曲线、基线和积分表后，点OKB即可；(3)如果想优化积分结果，则可在积分窗口中选择基线设定、积分范围和参数。1.3 移动(Shift)多条曲线重叠比较时，可用移动功能，使每条曲线错开适当距离，便于分析。移动可以左右移动，也可上下移动。1.4 相除计算(Divide)将两条UV曲线相除，可判定吸收峰的纯度：如果一个峰的组分是单一的，则整个峰的 相除结果应是恒定值。根据峰的相除值，还可判定峰的成分，因为不同物质的两个波长相除 值应是不同的。(1)选择 Operation>Divide ,打开 Divide ( 相除)窗口；(2)选择两条相除白曲线，点O
11、K键，即可；(3)若需优化计算结果，可设定极限范围(Threshold),也可在计算前用相减(Subtract)功能，消除基线漂移的影响，还可用平滑(Smooth)功能，减小计算结果的波动。1.5 输出报告(Report and Print)(1)打印当前窗口显示的内容，选择 File>Print,出现打印窗口，选择打印格式(Printformat)，点OK键，即可。(2)按报告形式打印，选择 File>Report ,再选择报告格式(Format),点OK键，即可。 七系统管理(1)用户设置 在主窗口中，可设置用户、密码、路径及使用权限等。(2)系统设置 在系统控制窗口中，可设置系统报警、检测、曲线记录等参数。(3)缓冲体系设定在方法编辑窗口中，可更改缓冲液配方参数或增加新的缓冲液配方。(4)报告格式在数据处理窗口中，可编辑数据浏览格式、打印报告格式等。