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1、卫生资格检验技师知识点归纳卫生资格检验技师知识点归纳荧光色素许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那 些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫 荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：1. 异硫氧酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate, FITC)为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4,最 大吸收光波长为490495nm,最大发射光波长520530nm,呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下：有两种同分异结构，其中异构 体I型在效率、稳定性、与蛋口质结合能力等方面都更好，在冷暗 干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。其
2、主要优点是：人 眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。2. 四乙基罗丹明(rhodamine, RIB200)为橘红色粉末,不溶于水, 易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。结构式如下：最大吸 收光波长为570nm,最大发射光波长为595600nm,呈橘红色荧光。3. 四甲基异硫氤酸罗丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TRITC)结构式女口下：最大 吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光。与 FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其 异硫氤基可与蛋口质结合，但荧光效率较低。免疫荧光原理
3、免疫学的基木反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高 度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因 素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体 活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体） 结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法：将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一 定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室 温下干燥后封片、镜检。间接法：如检查未知抗原，先用己知未标记的特异抗体（第一抗 体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗 体（第二抗体）与抗原标本反应，使之形成抗原一抗体一抗
4、体复合物, 再用水洗去未反应的标记抗体，干燥、封片后镜检。如果检查未知 抗体，则表明抗原标木是己知的，待检血清为第一抗体，其它步骤 的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋口抗体，同于血清球蛋白有种的特异性， 如免疫抗鸡血清球蛋口只对鸡的球蛋白发生反应，因此，制备标记 抗体适用于鸡任何抗原的诊断。免疫荧光技术特点该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点 是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技 术程序也还比较复杂。荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。 与放射免疫法相比，荧光免疫法无放射性污染，并且大多操作简便, 便于推广。国外生产的TDM用试
5、剂盒，有相当一部分即属于此类， 并且还有专供TDM荧光偏振免疫分析用的自动分析仪生产。由于一般荧光测定中的本底较高等问题，荧光免疫技术用于定量 测定有一定困难。新发展了几种特殊的荧光免疫测定，与酶免疫测 定和放射免疫分析一样，在临床检验中应用。脱水病案分析女性，62岁，因进食即呕吐10天而入院。近20天尿少色深， 明显消瘦，卧床不起。体检：发育正常，营养差，精神恍惚，嗜睡，皮肤干燥松弛，眼 窝深陷;呈重度脱水征。呼吸17次/min,血压16/9. 3kPa,诊断为 幽门梗阻。血球分析：MCV72fL、HCTO. 56L/L,其余正常。血液生化检验：血糖5. Ommol/Ls尿素7. 6mmol
6、/L,K+3. 61mmol/L> Na+158mmol/L> Cl-90mmol/L> pH7. 50、 PC027. 92kPa、PC026. 7kPa> BE+8. 0/mmol/L. HC03-45mmol/L、 AG26. 4mmol/L.病案分析患者系慢性十二指肠球部溃疡所致的幽门梗阻。呕吐未及一周， 即出现严重的缺盐性脱水和低血氨性碱中毒。患者是幽门梗阻，频 繁呕吐，丢失胃液并丧失胃酸，十二指肠液的HC03-得不到中和即 被吸收入血，使血中HC03-量增加，造成代谢性碱中毒，又因血pH 值高出正常范围，因此可以诊断为失代偿型代谢性碱中毒。由于长 时间不能进
7、食进水，还有胃液的丢失，从而导致严重脱水。血渗量 摩尔高于正常，呈高渗性脱水，进一步使细胞脱水（MCV变小），尤 其是脑细胞脱水，从而出现精神症状。低血糖如何预防 按时进食，生活规律。 不可随便增加药量。 每次用胰岛素均应仔细核对剂量。 运动量恒定。 常测血糖。 随身带糖果以备用。氯的'测定之滴定法(1) Molrr法：以K2CrO4为指示剂，用AgN03滴定血清中Cl-, 以过量的Ag+与Cr042-结合出现Ag2CrO4红色沉淀为终点，根据 AgN03消耗量计算出标本中Cl-的量。(2) Sehales法:以二苯卡巴腺作指示剂，用Hg(N03)2滴定血清 中C1-,以过量的血2+与
8、二苯卡巴腺结合成不溶的紫蓝色化合物为 终点，根据Hg(N03) 2消耗量计算血清Cl-的量。滴定法需要熟练的操作，终点要准确，尽可能排除主观因素的干 扰，否则误差很大。血清中过多的胆红素。血脂及血红蛋白(溶血) 对结果干扰很大。滴定法有淘汰的趋势。磷的四种生理功能1 血中磷酸盐(HPO42-/H2PO4-)是血液缓冲体系的重要组成成分。2.细胞内的磷酸盐参与许多酶促反应如磷酸基转移反应、加磷酸 分解反应等。3构成核tf酸辅酶类(如NAD+、NADP+、FMX、FAD、CoA等)和含 磷酸根的辅酶(如TPP、磷酸毗哆醛等)，还构成多种重要的核球酸 (如 ATP、GTP、UTP、CTP、cAMP、
9、cGMP 等)。4细胞膜磷脂在构成生物膜结构、维持膜的功能以及代谢调控上 均发挥重要作用。酶蛋口及多种功能性蛋白质的磷酸与脱磷酸化则 是代谢调节中化学修饰调节的最为普遍、最为重要的调节方式，与 细胞的分化、增殖的调控有密切的关系。空腹血糖(GLU)是指在隔夜空腹(至少810小时未进任何食物，饮水除外)后， 早餐前采的血，所检定的血糖值，为糖尿病最常用的检测指标，反 应胰岛B细胞功能，一般代表基础胰岛素的分泌功能。白细胞计数知识总结一、检测原理白细胞计数是测定单位体积血液中各种白细胞总数。包括显微镜 计数法和血液分析仪计数法。二、方法学评价1、显微镜计数法：简便易行、不需昂贵仪器，但重复性和准确
10、性较差，受微量吸管、 血细胞计数板、细胞分布、人为因素等多种情况影响。2、血液分析仪计数法：计数细胞数量多、速度快、易于标准化、计数精确性较高，适合 大规模人群健康筛查，但需特殊仪器。某些人为因素(如抗凝不充 分)、病理情况(如出现有核红细胞、巨大血小板、血小板凝集等)可 干扰口细胞计数。使用前须按NCCLS规定方法对仪器进行校准，且 须认真坚持日常质控工作。三、参考值血细胞自动计数仪、显微镜计数法：成人：(4.010. 0) X 109/L (4000-10000/mm3).新生儿：(15. 0-20. 0) X 109/L 仃500020000/mm3).婴儿：(15. 020. 0) X
11、 109/L.儿童：(5.012. 0) X 109/L.四、临床意义1. 生理变化(1)年龄：新生儿计数较高，可达(153O)X1(T9/L,通常在 34d降至10X10"9/L. (2)日间变化：一般安静松弛时白细胞较低, 活动和进食后较高;早晨较低，下午较高，一日之内可相差1倍。(3) 运动、疼痛和情绪影响：剧烈运动、剧痛、极度恐惧等均可 使白细胞短时升高。(4) 妊娠与分娩：妊娠期特别是最后1个月白细胞升高，分娩时 可达34X107/L,产后25d恢复正常；女性绝经期、月经期则可 降低。(5) 饮酒、大量吸烟、冷浴亦可升高由于生理因素，同一检测对 象白细胞计数甚至可波动50%
12、.2. 病理变化(1) 升高： 各种球菌引起的急性感染及化脓性炎症：中耳炎、扁桃体炎、 阑尾炎、脓肿等； 全身感染：肺炎、败血症、猩红热等； 中毒：尿毒症、糖尿病酸中毒、汞中毒、铅中毒； 急性出血、急性溶血、手术后； 恶性肿瘤、粒细胞血液病等； 类口血病反应。白细胞在20X1CT9/L以上，说明存在严重感染。(2) 降低： 病毒感染：重症肝炎、流行感冒、麻疹等； 某些传染病：如伤寒、副伤寒、疟疾等； 某些血液病如再生障碍性贫血、口细胞减少性口血病、粒细胞 缺乏症； 化学药品及放射损害如X线照射、镭照射、晚期碑中毒等； 自身免役性疾病及脾功能亢进等。白细胞在2.5X109/L以下，是传染病、中毒和骨髓再生障碍的 重要危险值。