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1、CCCCCCCCCCCCCCCCCCfCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC-A.-0-T外源基因的微生物表达系统芽胞杆菌表达系统资源媒合利用小组2DD9.2. 2TCCCCC CCCC CU CCCCCCCCCC CUCCCCCUC C表达系统概述基因的外源表达将外源基因与表达载体连接, 导入到受体细胞中，高效生产有价值的基因产物。 这一过程包括外源基因的复制、转录、翻译、加 工、分离纯化等。外源基因的表达系统重组表达载体 受体细胞资源绿合利用小组2DD9.2. 2Tccccccrccccccccrccfccfcccccccccccccccc表达系统概述表达系统分类原核表达系统真核表
2、达系统.大肠杆菌表达系统芽胞杆菌表达系统一链霉菌表达系统酵母表达系统昆虫细胞表达系统 哺乳动物细胞表达系统 植物细胞表达系统r m f crccccii ccccu cu ccc “ ccccc U U r e 表达系统概述研究表达体系意义：高效、稳定、准确表达外源基因需考虑：基因来源产物类型科研背景应用背景资源综合利用小组2DD9.2. 27CCCCCC(CCCCCfCCCCfCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(CCCC芽胞杆菌表达系统特点： 非致病性 遗传学研究 分泌胞外蛋白空:资源综合利用小组2DD9.2.27CfCfCCCCCCCCCCCfCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC
3、CCCCC芽胞杆菌表达系统宿主菌：枯草杆菌、嗜碱芽胞杆菌、淀粉芽胞杆菌、 短小芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、嗜热脂肪芽 胞杆菌、耐碱的芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌等。差异？ ？ ？载体：质粒、整合质粒、噬菌体资源媒合利用小组2DD9.2.27Intracellular各种胞内外反应对外源表达的影响ONAccccccccccccfccrccfcccccccccccccccccccc芽胞杆菌表达系统资源综合利用小组2DD9.2. 27资源媒合利用小组2DD9.2. 27cccrcccccrccfcccccf(crcccccccccccc(ccccccc芽胞杆菌表达系统一RNA聚合酶（核心酶、o亚基）强启动子（
4、Pamy - a-淀粉酶启动子、Ptms -强营养启动子、P43 - 0人和。8识别的启动子）P43 Ptms Pamy资源媒合利用小组2DD9,2. 2T芽胞杆菌表达系统 一. 一* 一 0蛋西折叠 枯草芽把杆菌 内陪伴分子 (intracellular molecular chaperones )外陪伴分子 (extracytoplasinic molecular chaperones )PrsA变型菌株：WB600蛋白缺陷型WB600 pEPP型含有PrsAWB600BHM pEPP型有内外陪伴分子 发现二硫键异构酶、硫氧化还原蛋白还原酶保护疏基资源综合利Jfl小组2009.2.27Cf
5、CCCCCCCfCCCCCCCC(rccccccccccccccci芽胞杆菌表达系统 一. 一* 一 0定位前体蛋白与陪伴分子、信号肽结 合，定位在质膜上转移释放膜蛋白 能量 信号肽酶r cm ccicc r cc r cccccc ccu r r e芽胞杆菌表达系统OMV一一 一 一一 信号肽加工：信号肽分类Type I、Type II信号肽酶七种(SipS、SipT)(SPases )贵源媒合利用小细2DD9. 2. 27CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC芽胞杆菌表达系统蛋白水解:芽胞杆菌分泌胞外蛋白酶碱性蛋白酶(arpE )中性蛋白酶(n
6、prE和nprB) 金属蛋白酶(mpr )丝蛋白酶(eprbpfvpr )其中,aprE和nprE最普遍。资源终合利用小组2DD9.2.27芽胞杆菌表达系统蛋白酶缺陷型菌株:WB700全部缺陷资源绿合利用小组2DD9. 2. 27cccccrccccccfccrcccccccccccccccccccccccccc芽胞杆菌表达系统注意:胞外蛋白酶缺陷型菌株质粒稳定性质粒构建其他表达系统及对比大肠杆菌表达系统：特点：遗传背景清楚、目的基因表达水平高、培养周期 短、抗污染能力强等。表达载体：需含有启动子（lac启动子、tac启动子trp启动 子）、核糖体结合位点（RBS）、转录终止子 （回文结构）。
7、提高外源基因表达水平：提高翻译水平、生长与表达分开、 提高表达蛋白稳定性包涵体资源媒合利用小组2DD9.2.27CCCCCHCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC其他表达系统及对比酵母表达系统：特点：含有真核体系共有的翻译后修饰，生长快、方便简单成本低，外源蛋白易分离。宿主菌：毕赤酵母、酿酒酵母三种表达系统的对比特有优点缺点芽脑杆菌表达系统1 .无毒（除炭疽芽胞杆 菌、蜡样芽胞杆菌）2 .分泌胞外蛋白1 .分泌妥白酶2 .质粒稳定性差3 .无真核修饰大肠杆菌表达系统遗传学背景最全1 .易形成包涵体2 .无真核修饰酵母表达系统1.无毒2.真核修饰产乙醇共同点：发酵周期短、遗传学研究全面资源绥合利用小组2DD9.2.27ccccccccccccfccccccccccccccccccccccrcIThank you for your attention!资源媒合利用小组2DD9,2. 27