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1、1、用酚一氯仿抽提DNA时,通常要在氯仿或酚 一氯仿中加少许异戊醇,这是由于异戊醇可以 随 止气泡 ；别离DNA时要使用金属离子螯合剂,如 EDTA和柠檬酸钠等,其目的是 抑制了DNase .2、根据质粒拷贝数的多少,质粒可以分为严谨型质粒.和松弛型质粒.3、入噬菌体在感染大肠杆菌以后,可以进入 Lytic growth 也可以进入 Lysogenic state .如果其基 因组DNA通过专一性重组整合到宿主染色体中,那么其进入融源状态 .;它也可以选择进入融菌状态 ,大量复制并组装子代噬菌体颗粒.4、ddNTP与普通的dNTP的不同之处在于 ddNTP 2和3双脱氧,它们可以在 DNA 聚
2、 合酶的作用下,通过其 5掺入到正在增长的 DNA链中,导致链延伸反响终止.5、Klenow DNA 聚合酶是DNA 聚合酶I 经蛋白酶裂解而从全酶中除去53外切酶 活性的多肽大片断,而其他活性保持不变.1、酚是蛋白变性剂,用酚抽提细胞 DNA时,具有两方面的作用,分别为 变性剂 和 ffl制了 DNase .2、Plasmid能进行自我复制,大多数为双 链闭合环状DNA 分子.3、寄主限制的限制与修饰现象由两种酶活性配合完成的,一种叫 内切酶.另一种叫 修饰酶 .4、反转录酶来自AMV 或 Mu MLV ,即依赖于 RNA 的DNA 聚合酶,它有 聚合酶活性,但无 外切酶 活性.5、末端转移
3、酶来源于小牛胸腺,是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的 DNA聚合酶,在二价阳离子存在下,末端转移酶催化dNTP加于DNA分子的3羟基端.三、选择题每题1.5分,共15分B、只能作用于单链 DNA ;D、只能作用于 RNA.1、迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于 C .A、既可以作用于双链 DNA ,又可以作用于单链 DNA ;C、只能作用于双链 DNA ;2、以下哪一种酶作用时需要引物B .A、末端转移酶；B、反转录酶；C、DNA连接酶；D、限制酶.(D ).3、DNA被某种酶切割后,电泳得到的电泳带有些扩散,以下原因中,哪一项不太可能A、蛋白质如 BSA同DN
4、A结合；B、有外切核酸酶污染；C、酶失活；D、酶切条件不适合.4、以下各项中不是 PCR反响所必须的是D .A、模板和引物；B、dNTP; C、Taq酶和buffer; D、甘油.5、关于PCR技术的表达,以下哪项是错误的 B A、以DNA复制为根底而建立起来的技术；B、利用PCR技术可完全无误地扩增基因；C、反响体系需模板、一对引物、4种dNTP、耐热DNA聚合酶和缓冲溶液；D、以变性-退火-延伸为一周期.6、以下不是表达载体所必须的条件是 C .A、必须具备很强的启动子；B、必须具备很强的终止子；C、启动子需要受限制；D、所产生的 mRNA必须具有译的起始信号.7、以下不属于核酸探针的是
5、D .A、RNA探针；B、基因组探针；C、cDNA探针；D、抗体.8、关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确B .A、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点；B、在不同的宿主中具有不同的复制机制；C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶；D、在不同的宿主中具有不同的复制速率.9、从细胞或组织中别离DNA时常用蔗糖的作用是C .A、抑制核酸酶的活性；B、加速蛋白质的变性；C、保护DNA ,预防断裂； D、有利于细胞破碎.10、氯霉素的工作原理为D .A、可以抑制细胞壁肽聚糖的合成；B、可以与核糖体 30S亚基结合并抑制蛋白质合成;选择题每题1.5分,C、可以抑制核糖体的转位；D、可以与核糖50S亚基
6、结合并抑制蛋白质合成.15分)1、限制性内切核酸酶可以特异性地识别 C .A、特定的三联密码;B、双链 DNA 的特定碱基对;C、双链 DNA的特定碱基序列;D、单链 DNA的特定碱基序列.2、在切口平移方法标记 DNA探针时只能使用B .A、Klenow 酶；B、DNA 聚合酶 I; C、DNA聚合酶 n； D、DNA聚合酶出.3、在以下进行 DNA局部酶切的条件中,限制哪一项最好 C .A、反响体积；B、酶反响温度；C、反响时间；D、酶量.4、PCR扩增有时会出现弥散的条带,以下原因阐述不正确的选项是 B .A、退火温度过低；B、退火温度过高；C、dNTP浓度过高；D、循环次数过多.5、以
7、下不属于 PCR的应用的为D .A、随机扩增多态性 DNA RAPD; B、扩增片段长度多态性AFLP ;C、RACE;D、S1 酶作图.6、pUC18与pUC19的区别在于B .A、二者的选择标记不同；B、二者的多克隆位点方向相反；C、pUC18 无 lacZ 基因； D、pUC19 无 lacZ 基因.7、有关DNA序列自动化测定的不正确表达是 D .A、用荧光代替了同位素标记；B、激光扫描分析代替人工读序基；C、本原理与手工测序相同；D、不再需要引物.8、以下哪一项不是质粒载体必备的根本特征D .A、可以独立复制；B、有选择标记；C、有多克隆位点；D、含lacZ.9、在别离 DNA过程造
8、成 DNA分子断裂的因素很多,以下说法中哪一项为哪一项不正确的 C .A、核酸酶的降解；B、化学降解；C、保存液中未加一滴氯仿；D、物理剪切.10、氨茉青霉素的工作原理为 A .A、可以抑制细胞壁肽聚糖的合成；B、可以与核糖体 30S亚基结合并抑制蛋白质合成；C、可以抑制核糖体的转位；D、可以与核糖50S亚基结合并抑制蛋白质合成.1、酚是蛋白变性剂,用酚抽提细胞 DNA时,具有两方面的作用,分别为 变性剂和ffl!制了 DNase .2、Plasmid能进行自我复制,大多数为双 链 闭合环状 DNA 分子.3、寄主限制的限制与修饰现象由两种酶活性配合完成的,一种叫 内切酶.另一种叫 修饰酶 .
9、聚合酶4、反转录酶来自AMV 或 Mu - MLV ,即依赖于RNA 的DNA 聚合酶,它有 活性,但无 外切酶 活性.5、末端转移酶来源于小牛胸腺,是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的 DNA聚合酶,在二价阳离子存在下,末端转移酶催化dNTP加于DNA分子的3,羟基端.三、选择题每题1.5分,共15分1、迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于 C .B、只能作用于单链 DNA ;D、只能作用于 RNA.D、限制酶.A、既可以作用于双链 DNA ,又可以作用于单链 DNA ;C、只能作用于双链 DNA ;2、以下哪一种酶作用时需要引物B .A、末端转移酶；B、反转录酶
10、；C、DNA连接酶;3、DNA被某种酶切割后,电泳得到的电泳带有些扩散,以下原因中,哪一项不太可能D .A、蛋白质如 BSA同DNA结合；B、有外切核酸酶污染；C、酶失活；D、酶切条件不适合.4、以下各项中不是 PCR反响所必须的是D .A、模板和引物；B、dNTP;C、Taq酶和buffer;D、甘油.5、关于PCR技术的表达,以下哪项是错误的 B A、以DNA复制为根底而建立起来的技术；B、利用PCR技术可完全无误地扩增基因；C、反响体系需模板、一对引物、4种dNTP、耐热DNA聚合酶和缓冲溶液；D、以变性-退火-延伸为一周期.6、以下不是表达载体所必须的条件是 C .A、必须具备很强的启
11、动子；B、必须具备很强的终止子；C、启动子需要受限制；D、所产生的 mRNA必须具有译的起始信号.7、以下不属于核酸探针的是 D .A、RNA探针；B、基因组探针；C、cDNA探针；D、抗体.8、关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确 B .A、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点;C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶；B、在不同的宿主中具有不同的复制机制;D、在不同的宿主中具有不同的复制速率.9、从细胞或组织中别离 DNA时常用蔗糖的作用是C .A、抑制核酸酶的活性；B、加速蛋白质的变性；C、保护DNA ,预防断裂；D、有利于细胞破碎.10、氯霉素的工作原理为 D .A、可以抑制细胞壁肽聚
12、糖的合成；B、可以与核糖体 30S亚基结合并抑制蛋白质合成；C、可以抑制核糖体的转位；D、可以与核糖50S亚基结合并抑制蛋白质合成.1、星活性：高浓度的酶、高浓度的甘油、低离子强度、极端 pH值等,会使一些核酸内切酶的识别 和切割序列发生低特异性,即Star activity现象.2、插入型载体：只具有一个可供外源DNA插入的克隆位点.3、反转录PCR:在逆转录酶的作用下、以 mRNA为模板合成互补的 cDNA ,再以cDNA为模板进 行PCR反响.4、感受态：受体细胞经过一些特殊方法如： CaCl2, RuCl等化学试剂法的处理后,细胞膜 的通透性发生变化,成为能容许多有外源DNA的载体分子
13、通过的感受态细胞.5、考斯质粒：考斯质粒是一类人工构建的含有l-DNA cos序列和质粒复制子的特殊类型的载体6、Klenow片段：用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶I可以切掉N端的53外切酶活性局部,就成为 Klenow fragment.7、置换型载体：两个多克隆位点区以反向重复形式分别位于 DNA的非必须区两端,用酶切后, 可以将中间的区段切下来,与用同样酶切成的外源DNA片断置换.8、引物：人工合成的单链 DNA小片断,碱基顺序分别与所要扩增的模板DNA双链的5 端相同.9、转化：大肠杆菌捕获质粒 DNA的过程.10、 噬菌粒：噬菌粒是一类人工构建的含有单链噬菌体包装序列、复制子以及质粒复制子、克 隆位点、标记基因的特殊类型的载体.