《薄层色谱TLC的基本原理.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《薄层色谱TLC的基本原理.doc（5页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、精品薄层色谱（点板）的基本原理 薄层色谱，或称薄层层析（thin layer chromatography）,是以涂布于支持板上的支持物作为 固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分 离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速 分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核昔酸、生物碱 及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发 展起来至今，仍被广泛采用。（一）基本原理薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板（常用玻璃板， 也可用涤纶布等）上形成薄层，然后用相应的溶剂进行 展开。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分 为薄层吸附层析（吸附剂）、薄层分配层析（纤维素）、薄 层离子交换层析（离子交
2、换剂）、薄层凝胶层析（分子筛 凝胶）等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相 的薄层吸附层析。吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成 表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶 质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体 与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能 发生吸附现象。物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表 面的分子（离子或原子）和固体内部分子所受的吸引力 不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称 的，其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的 力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用 力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分 子在运动
3、中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响， 就会被吸引而停留下來。吸附过程是可逆的，被吸附 物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附 于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离 开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平 衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸 附与解吸的动态平衡过程。例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力 与分配系数的不同，使混合物得以分离。当溶剂沿着 吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时 发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。由于各 组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸 附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。如 作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根 据这些已知化合物的Rf值（后面介绍Rf值）对各斑 点的组分进行鉴定，同时也可以进一步采用某些方法 加以定量。薄层层析有许多优点：它保持了操作方便、设备简单、 显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15-20 分钟；混合物易分离，分辨力一般比以往的纸层析高 10100倍，它既适用于只有001 g的样品分离，又能分离大于500mg的样品作制备 用，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性 显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果 不甚理想。如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！