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1、第一节 细菌的理化性状 q细菌的化学组成：水、无机盐、蛋白质、糖类 、脂质和核酸（DNA和RNA两种）等。 q细菌的物理性状： 光学性质半透明体 表面积相对表面积大 带电现象均带负电。G+菌PH23, G-菌PH23,其带电 现象与染色反应、凝集反应、抑菌和杀菌作用等密切相关 半透性细胞壁和细胞膜都有半透性 渗透压菌体内为高渗透压 第二节 细菌的营养与生长繁殖 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为： 自养菌(autotroph)：以简单的无机物为原料，合成 菌体成分 异养菌(heterotroph)：以多种有机物为原料，合成 菌体成分并获得能量。 异养菌包括腐生菌和寄生菌两大类。 所有

2、的病原菌都是异养菌，大部分属寄生菌。 一、 细菌营养类型 营养物质 水 碳源 （糖） 氮源 （氨基酸 蛋白胨） 无机盐 生长 因子 重要溶剂 菌体成分 能源 菌体成 分原料 某些菌需之 菌体及酶的组分 能量储存及转运 调节渗透压 与繁殖及致病相关 二、 细菌的营养物质 三、细菌摄取营养物质的机制 被动扩散: 主动转运： 充足的营养物质 合适的酸碱度(pH) 7.27.6 适宜的温度 37 必要的气体环境：据细菌对氧气的需要不同，分为四类： 专性需氧菌：完善的呼吸酶系统 微需氧菌：低氧压56% 兼性厌氧菌：大多数病原菌 专性厌氧菌：缺乏呼吸酶和过氧化氢酶、过氧化物酶等 渗透压 四、细菌生长繁殖的

3、条件 五、细菌的生长繁殖 细菌个体的生长繁殖 细菌群体的生长繁殖 细菌个体的生长繁殖 细菌以简单的二分裂方式进行无性繁殖。 繁殖一代所需时间约20-30min。 细菌群体的生长繁殖：分为四期 迟缓期 (lag phase)：14h 对数期 (logarithmic phase)：818h，活菌以几 何级数生长，细菌有典型的生物学性状（形态染 色、生化反应、药物敏感试验） 稳定期 (stationary phase)：产生芽胞、外毒素、抗生素 衰亡期 (decline phase) 第三节 细菌的新陈代谢和能量代谢 细菌的新陈代谢：分解代谢与合成代谢 分解代谢：底物分解和转化能量的过程 合成代谢

4、：所产生的能量用于细胞组分的合成 一、 细菌的能量代谢 生物体能量代谢的基本生化反应时生物氧化 l发酵：以有机物为受氢体的生物氧化。 l呼吸：以无机物为受氢体的生物氧化。 需氧呼吸：以分子氧为受氢体的。 厌氧呼吸: 以其它无机物（如硝酸盐）为受氢体的。 二、 细菌的代谢产物 1. 分解代谢产物和细菌的生化反应 糖发酵试验 VP试验 甲基红试验 枸橼酸盐利用试验 吲哚试验 硫化氢试验 各种细菌所具有的酶不完 全相同，对营养物质的分 解能力不同，所以代谢产 物不同 细菌的生化反应试验： 利用生物化学方法来 鉴别不同的细菌 糖发酵试验 不同的细菌分解糖的能力和代谢产物不同，可 以鉴别细菌。 大肠杆菌

5、 分解葡萄糖、乳糖产酸、产气 伤寒杆菌 分解葡萄糖产酸、不产气，不分解乳糖 大肠杆菌 产气杆菌 分解葡萄糖产酸产气 丙酮酸 乙酰甲基甲醇甲酸、乙酸 二乙酰 碱性环境氧化 胍基化合物 红色化合物（VP试验阳性） 产气杆菌大肠杆菌 （VP试验阴性） 阴 性 阳 性 VP 试 验 (V) 大肠杆菌 产气杆菌 分解葡萄糖产酸产气 丙酮酸 乙酰甲基甲醇甲酸、乙酸 产气杆菌大肠杆菌 阳 性 阴 性 对 照 培养液pH5.4， 指示剂甲基红呈 黄色（） 甲基红试验 (M) 枸橼酸利用试验 (C) 大肠杆菌： 产气杆菌：+ 枸橼酸盐铵盐 碳酸盐 氨 培养基变碱 溴麝香草酚 蓝由绿变蓝 培养基变蓝 培养基 原理

6、：碳源和氮源的利用试验 阳 性 吲哚试验（ I) 大肠杆菌：+ 产气杆菌： 大肠杆菌，变形杆菌等含有色氨酸酶，分 解培养基中的色氨酸产生靛基质（吲哚） 。加入对二甲基氨基苯甲醛生成玫瑰色吲 哚。 H2S 试 验 变形杆菌等能分解含硫氨基酸（如胱氨酸）， 产生硫化氢与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作 用，生成硫化铅或硫化铁（黑色）。 尿素酶试验 变形杆菌有尿素酶，能分解培养基中的尿素产生 氨，使培养基变为碱性，以酚红指示剂检测为红 色，为尿素酶试验阳性。 大肠杆菌： 产气杆菌： 生化反应用途？ 鉴别细菌 热原质(pyrogen)：产生热原质的细菌大多是革兰阴性菌 ，热原质即其细胞壁的脂多糖。耐高温。

7、 （二）细菌的合成代谢产物及其在医学上的意义 毒素与侵袭性酶： 内毒素：革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性存在于脂质A 的部分，当菌体死亡裂解后释放出来。 外毒素：革兰阳性和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程当 中，释放到细胞外的蛋白质。 侵袭性的酶：损伤机体组织，促进细菌侵袭扩散，如透明 质酸酶。 色素：水溶性色素和脂溶性色素。 抗生素：某些微生物代谢过程中产生的能抑制 或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。 细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的 蛋白质。但作用范围窄。 维生素：细菌能合成某些维生素除供自身需 要外，还能分泌到周围环境中。 第四节 细菌的人工培养 常用的有分离培养和纯培养两种方法

8、。 病原菌的人工培养一般采用35-37，培养 时间多数为18-24h。 细菌生长繁殖需要的营养物质： 一、培养细菌的方法 二、培养基(culture medium) 培养基：是专供微生物生长繁殖使用的混合营养物 制品，由人工方法配制而成。 按其营养组成和用途分类： 基础培养基、增菌培养基、选择培养基、 鉴别培养基、厌氧培养基。 按其物理状态分类： 固体培养基、液体培养基、半固体培养基。 三、细菌在培养基中生长现象 (一) 细菌在液体培养基中的生长情况 菌膜 菌沉 淀 均匀浑浊 对照 (二) 细菌在固体培养基中的生长情况 光滑型菌落 粗糙型菌落 粘液型菌落 (三) 细菌在半固体培养基中的生长情况

9、 1、3：有动力 2：无动力 四、人工培养细菌的用途和意义 在医学中的应用 传染性疾病的诊断 细菌的鉴定与研究 生物制品的制备 在工农业生产中的应用 基因工程的应用 第五节 细菌的分类 一、 细菌的分类原则与层次 传统分类：以细菌的生物学性状为主 种系分类：以细菌的发育进化关系为主 细菌鉴定和分类的方法：伯杰氏系统细菌学手册 表型分类：以细菌的形态和生理特征 分析分类：菌体组分、代谢产物组成与图谱 基因型分类 细菌的分类层次：界、门、纲、目、科、属、种。 二、细菌的命名法 拉丁双命名法 前一字为属名，用名词；后一字为种名，用形容 词，小写：Escherichia coli 中文的命名次序与拉丁

10、文相反，是种名在前，属 名在后：大肠埃希菌 Summary 细菌生长繁殖的条件： 充足的营养物质、温度、酸碱度、适宜的气体环 境、渗透压 细菌的生长繁殖：个体繁殖和群体繁殖 重要的生化反应： IMViC、糖发酵试验、硫化氢试验、尿酶试验 重要的合成代谢产物： 热原质、毒素和侵袭性酶、色素、抗生素、细菌 素、维生素 单击此处编辑母版标题样 式 单击此处编辑母版副标题样式 3232 * * 第3章 消毒与灭菌与 病原微生物实验室安全 采用加温处理的 方法杀死污染微 生物来防止酒类 发酵变酸。 巴氏消毒法 ( Louis Pasteur,18221895) 法国科学家巴斯德 首创用石炭酸消毒空气和

11、煮沸手术用具以防术后感 染，为防腐、消毒，以及 无菌操作奠定了基础。 (Joseph Lister,18271912)英国医 生李斯特 第一节 消毒灭菌的常用术语 灭菌(sterilization) 杀灭物体上所有微生物的方法。 消毒(disinfection) 杀死物体上病原微生物的方法,并不一定 能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。 防腐(antisepsis)：醇类、碘伏、氯已定 防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 清洁(cleaning)： 通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的 过程。 无菌(asepsis)：不存在活菌的意思。 第二节 消毒灭菌的方法 物理方法 化学方法 一、物

12、理消毒灭菌法 热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 超声波杀菌 干燥低温抑菌法 热力灭菌法 干热灭菌法干热灭菌法 焚烧焚烧 烧灼烧灼 干烤（干烤（160170/2h160170/2h） 红外线红外线 湿热灭菌法湿热灭菌法 巴氏消毒法巴氏消毒法pasteurizationpasteurization 煮沸法煮沸法 流动蒸气消毒法流动蒸气消毒法 间歇蒸气灭菌法间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法 121,15121,15个大气压个大气压,20,20分钟分钟 同一温度下,湿热比干热效果好 用较低温度杀灭液体中的病原菌 或特定微生物，而仍保持物品中 所需的不耐热成分不被破坏的消 毒方法。6230

13、min 或72 30s 1)菌体蛋白易凝固 2）穿透力大 3）潜热效应 辐射杀菌法 紫外线（UV） 265266nm最强的杀菌能力 杀菌原理:紫外线使DNA分子形成胸腺嘧啶双 聚体，干扰DNA正常复制，导致细菌死亡 用途与缺陷 电离辐射 、射线 微波 滤过除菌法:以物理阻留方法将液体或空气中的 微生物除去 0.22m,0.45m 不耐热血清等,空气 干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥法保存菌种 二、化学消毒灭菌法 化学消毒剂的杀菌机制 使菌体蛋白变性或凝固 干扰细菌酶系统和影响其代谢 损伤细胞膜 只能外用：对机体细胞有毒性 选择原则 效果好 毒力低 便宜 消毒剂的主要种类 类别类别作用机制常用种类

14、类 酚类蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸 醇类蛋白变性乙醇 氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸 、碘酒 重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞 表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭 染料干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫 酸碱类破坏膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰 烷化剂蛋白质、核酸烷基化环氧乙烷 化学消毒剂的分类 高效消毒剂：可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微 生物。 含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯异氰酸尿酸钠和漂白 粉 过氧化物消毒剂： 醛类消毒剂： 环氧乙烷： 中效消毒剂：不能杀灭细菌芽胞，但能杀灭细菌 繁殖体（包括结核分枝杆菌）、真菌和大多数病毒 。 含碘消毒剂：碘酊和碘伏。 醇类消毒剂：乙醇或异丙醇。 化学

15、消毒剂的分类 低效消毒剂：可杀灭多数细菌繁殖体，但不能 杀灭细菌芽胞、结核分枝杆菌及某些抵抗力较强 的真菌和病毒。 季铵盐类消毒剂：苯扎溴铵（商品名：新洁尔灭 ）。 氯已定（商品名：洗必泰） 高锰酸钾 化学消毒剂的分类 第三节 消毒剂的应用 医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌 室内空气消毒灭菌室内空气消毒灭菌 手和皮肤的消毒手和皮肤的消毒 黏膜的消毒黏膜的消毒 病人排泄物与分泌物的消毒灭菌病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 病人污染物品的消毒病人污染物品的消毒 饮水的消毒饮水的消毒 环境的消毒环境的消毒 消灭传染源消灭传染源 切断传播途径切断传播途径 微生物的种类与数量微生物的种类与数量 真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒 、分支杆菌、细菌芽胞、分支杆菌、细菌芽胞 微生物的物理状态微生物的物理状态 消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间 温度温度 酸碱度酸碱度 有机物有机物 第四节 影响消毒灭菌效果的因素 第五节 病原微生物实验室安全 病原微生物的分类：分四类 病原微生物实验室的分级：分四级 病原微生物实验室安全的核心：防扩 散和防感染 Summary 消毒、灭菌、无菌、防腐和无菌操作 的概念