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1、实验目的,学习设计实验的基本方法 学习给家兔灌胃给药的方法及一些基本的实验操作 了解糖尿病的危害、致病因素及治疗方法,糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征。,实验原理,苦瓜含有多种降糖成分，主要有甾苷、皂甙、脑苷、生物碱及多肽类物质等。 降糖机制 抗自由基作用 类胰岛素作用 刺激B细胞分泌胰岛素 修复受损B细胞，改善其功能 影响葡萄糖代谢酶,实验动物,家兔，雌雄各半，体重2.00.2kg，50只（已制成型糖尿病模型，选血糖值
2、111 mmolL的动物作为高血糖模型），同期饲养的健康家兔10只，雌雄各半，遵义医学院动物实验中心提供。,主要仪器及主要试剂、药品,兔灌胃器、离心机、兔实验台、722型分光光度仪、D101大孔吸附树脂柱等。 葡萄糖酶酚混合试剂、格列本脲、新鲜苦瓜、70乙醇、90乙醇等。,（一）、动物模型的制备,取质量(2.00.2)kg的健康家兔50只，正常饲料喂养1周后，耳静脉注射四氧嘧啶120 mgkg，72 h后耳后静脉取血(取血前禁食8 h)，测空腹血糖，选血糖值111 mmolL叫的动物作为高血糖模型。,实验方案,（二）、家兔经口灌胃给药方法 把实验兔放在实验台上，用左手掌从头部握住兔头颈部，将其
3、固定，用拇指和食指使劲压迫其口角部使口张开。然后，右手持抽好药液的灌胃器，用有弧度灌面从右口角处慢慢插入。,苦瓜提取物的提取过程,高血糖模型家兔50只,家兔10只,不做处理,空白对 照组10只,大剂量 组10只,中剂量 组10只,小剂量 组10只,格列本 脲组10只,给药前、给药后1h、2h、3h、4h、5h采集血液样本,高血糖模型家兔50只,家兔10只,高血糖模型家兔50只,家兔10只,不做处理,高血糖模型家兔50只,家兔10只,空白对 照组10只,不做处理,高血糖模型家兔50只,家兔10只,大剂量 组10只,空白对 照组10只,不做处理,高血糖模型家兔50只,家兔10只,中剂量 组10只,
4、大剂量 组10只,空白对 照组10只,不做处理,高血糖模型家兔50只,家兔10只,小剂量 组10只,中剂量 组10只,大剂量 组10只,空白对 照组10只,不做处理,高血糖模型家兔50只,家兔10只,生理盐水10ml/kg,灌胃给提取液300mg/kg,灌胃给提取液150mg/kg,灌胃给提取液75mg/kg,灌胃给格列本脲75mg/kg,测定各管的吸光度A,波长为：520nm,试剂与标本混匀后，在37水浴箱内静置10min,酶酚混合试剂3ml,加血清0.02ml,离心2000转/5min,血液样本,血清,血糖浓度A标本/A标准标准液浓度（标准液为5mmol/L） 记录血糖值,根据实验结果可预测以下结论：,1、小剂量苦瓜提取液与优降糖比较，有降血糖效果。 2、苦瓜提取液随着剂量的增加降血糖效果更加明显。,数据处理方法 以血糖浓度为统计量，结果采用SPSS统计软件进行组间2检验。,讨论,为什么选择苦瓜作为研究对象？ 为什么要选用家兔作为实验动物？,Thank you!,