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1、实验四 蛙心脏灌流 蛙心起搏点的观察 期前收缩与代偿间歇,目的要求 1.学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏的结构。 2.观察心脏起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。 实验原理 1. 两栖类动物的心脏解剖 2. stannius结扎 实验器材 动物：蟾蜍 仪器及药品：蛙类手术器械，丝线，任式液。,一、蛙心起搏点的观察,方法步骤 1.破坏脑脊髓 。 2. 仰卧位固定于蛙板上。 3.打开胸腔暴露心脏 ，观察心脏的结构 。 4. 斯氏结扎，记录结果。,实验结果及理论分析,斯氏结扎记录表（次/分钟）,实验目的 1学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。 2观察心脏在兴奋过程中兴奋性的变化。 实验原
2、理 心肌的有效不应期（收缩期，舒张早期） 实验器材 动物：蟾蜍 仪器及药品：生物信号采集处理系统，刺激电极， 蛙心夹，张力换能器，蛙类手术器械，任式液。,二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇,方法步骤 1. 破坏脑脊髓 2.仰卧位固定于蛙板上。 3. 打开胸腔暴露心脏 4. 蛙心夹于心脏舒张期夹住心尖 5. 连接张力换能器和刺激器 6. 选择合适的刺激强度 ；分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激，观察心跳曲线的变化。,实验结果,讨论,结论,1. 蟾蜍毁髓时要彻底。 2. 实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。 3. 刺激电极要与心室肌接触良好，应避免短路。 4. 心跳曲线的上升支应代表心室收
3、缩，下降支代表心室舒张，如相反则应将换能器倒向。 5. 先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以检测强度是否适宜。,注意事项,思考题,1.正常情况下，为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点？它对潜在起搏点如何控制？ 2.每次结扎后会出现什么现象，为什么？ 3.如何证实心肌有较长的不应期？心肌的较长不应期有何生理意义？ 4.期前收缩后一定出现代偿间歇吗？为什么？ 5.代偿间歇是怎样产生的？ 6.为何期前收缩幅度有时比正常心缩幅度高，有时比正常心缩幅度低？ 7.为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现？,三、蛙心灌流,实验目的 学习离体蛙心的灌流方法。 观察灌流液中几种离子浓度的改变, 相应受 体激动剂和阻断剂对心脏
4、收缩活动的影响。,实验原理 两栖类动物的离体心脏，在用与其内环 境相似的任氏液灌流时，能维持节律性收缩 和舒张。改变罐流液中的离子浓度或加入某 些受体激动剂和阻断剂，可以观察到心脏舒 缩活动的改变。,实验方法 1、标本的制作： （1）将毁损脑脊髓后的蟾蜍固定在蛙板上， 从腹上部正中至两前肢剪开皮肤，打开胸 腔，暴露心脏。 （2）用眼科剪剪开心包膜。 （3）用蛙心夹夹住心尖部。,（4）插管：在总主动脉下穿一线，打活结。在 左主动脉干根部向心脏方向剪一小切口， 将装有少量任氏液的蛙心插管从切口处插 入主动脉球。将蛙心插管与心尖部呈45度 角，并将插管外旋插入心室。见液面上下 波动，心室部可触及插管
5、，即插管已进心 室，用备用线结扎血管及插管。将插管中 的血液冲洗干净。游离心脏，勿伤静脉窦,2、仪器设备的安装连接： （1）将蛙心插管用木夹子固定在铁三脚架上。 （2）在木夹子的下方，将张力传感器固定在铁 三脚架上。 （3）将夹在蛙心尖上的蛙心夹上的丝线系在张 力传感器的簧片小孔上。线的松紧适度。 （4）张力传感器与放大器 CH1相连；打开循 环实验蛙心灌流，开始实验。,3、观察项目 观察以下处理因素对心脏收缩的影响： （1）0.65%Nacl （2）1%Kcl （3）1%Cacl （4）1：10000肾上腺素 （5）1：100000乙酰胆碱 （6）乳酸 （7）NaHCO3,注意事项 1、各药品的滴管分开使用，不能混淆。 2、每次给药前要有正常心博曲线,和给药标记 3、药效出现后立即将药吸出,并冲洗干净等心 脏搏动恢复正常以后再进行下一项实验。 4、插管内液平面应保持一致。 5、换能器头段保持向下倾斜，防止进水。 6、蛙心插管不要插得太深，防止损伤心脏。,窦房沟,