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1、 紫外与荧光实验 2 荧光 Agilent8453仪器 1 紫外 实验内容 数据处理与实验报告 PE公司LS55仪器 实验内容 数据处理与实验报告 722 Agilent8453 光二极管阵列 透镜 光栅 vAgilent8453仪器 v 1 紫外 同时全波长扫描 仪器特点 传统仪器分光 过比色皿 单波长检测 Agilent 8453 过比色皿 分光 全波长检测 仪器特点 每次测量均获得全谱 标准差sA：0.001 波长范围：190-1100nm 但190-220nm干扰大 可靠线性范围:A2.5上限A=4 吸光度A读数范围的选择 光分析法 http:/analchem.tongji. A的
2、适当范围 T为常数时 T通常0.002 0.01 c/c与T的关系图 适当范围： A: 0.20.8 T: 15% 65% A=0.434 吸光度A读数范围的选择 光分析法 http:/analchem.tongji. A的适当范围 新世纪，新仪器。 c/c与T的关系图 适当A: 0.12.0 最佳T=0.135 A=0.86 好多教材没提及 但却是更有用的概念 热噪声降低，T主要受散粒效应噪声影响 下式 仪器操作 Turn on 比色皿不要装太满 顶端差1cm较合适 放比色皿 光面对光路, 敞开式 向下压紧 以下：全电脑操作！ 分光光度计 Standard 模式操作步骤 打开电脑及仪器开关
3、 运行Instrument 1 online Mode中选Standard 放入参比溶液Blank 放入样品溶液 Sample全部样品测完 保存文件 按需取/使用数据 Kinetics模式不常用 打开电脑及仪器开关 运行Instrument 1 online Mode中选Kinetics 设置动力学参数 F7 设定路径文件名 自动结束 t=0 Start 紫外实验内容 实验内容 讲义下载 我们网站 /analchem IP：192.168.17.5 BBS 本科实验教学 实验安排及讲义专题帖 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系 数 课件下载 仪器分析实验 紫外实验内容 熟悉仪器的操作 选波长范围、
4、模式等 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系 数 纯水参比blank 自动扫描2种氨基酸的吸收曲线 找出max及相应A 转换成n阶导数光谱 紫外实验内容 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系 数 数据转换成*.dat文件 计算max处的 计算一阶导数光谱 作原图及导数光谱图 数据处理与实验报告 结果与讨论 紫外实验内容 1. 稀释2份溶液 苯丙氨酸 色氨酸 2. 扫描光谱，看导数光谱 3. 测一次荧光 注意事项 4 . 文件保存，用学号(03去 掉), CSV格式 (每组4文件) 例：1236Sd.csv/1236B.csv 实验专区数据下载 ftp:/192.168.17.5/ 或直接 2005本科仪器分析
5、实验 分类UV/Fluor/IR /HPLC/TOC 自己的文件名 5 . 数据网上下载 荧 光实验仪器 2003环科实验安排 日期实验 6/7实验 8实验 9 11月16 日 轮空28-33(1:30)轮空 11月23 日 15-27(1:30) 1-7(1:00)/ 22-27(3:00) 2833(1:00) 8-14(2:30)1- 7(3:40) 11月30 日 1-7&28-33(1:00) 8-14(3:00) 8-14(1:00)/ 15-21(3:00) 1521(1:30) 21-27(3:00) 12月7日网上预约 开放实验 (说明内容/仪器/时间 1:30-4:30间)
6、 荧光的产生 荧光的产生 e e e e 吸收激发 振动驰豫 内部转换 S1最低 荧光 辐射 S0各振动能级 2 荧光 UV-Vis属于吸收 荧光属于发光 光致发光 四面光比色皿 荧 光实验仪器2 荧光PE公司LS55仪器 Luminescence Spectrometer 荧光/磷光/发光 分光光度计 下图超级连接 LS -55 紫外实验内容 熟悉仪器的操作 氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量 2种氨基酸预扫描 以水为空白测量激发、发射和同 步荧光光谱 找出max处的荧光强度 测量2种氨基酸的激发、发射和 同步荧光光谱 紫外实验内容 数据为txt格式, 可直接处理 作ex/em/syn三种光谱图 数据处理与实验报告 结果与讨论 氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量 找max及相应荧光强度 报告在BBS上跟帖上传用学号注册 如书面请在2周内交到老师处 一天后有效 紫外实验内容 1. 稀释2份氨基酸溶液 浓度低多了！ 2. 软件使用 3. 测一次UV 注意事项 4 . 文件保存，用学号(03去 掉), sp格式 (每组3文件) 例：1236Sex.sp/1236Bem.sp 1236Ssy.sp 实验专区数据下载 ftp:/192.168.17.5/ 或直接 2005本科仪器分析实验 分类Fluor 自己的文件名