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1、第十七章 螺旋体 (spirochete),是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。 基本结构与细菌相似， 有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素药物敏感等 介于细菌和原虫之间的一类微生物。,螺旋体的细胞中心为原生质柱，外有2-100根以上的轴丝，又称轴鞭毛或内鞭毛，现亦简称为鞭毛，沿原生质柱的长轴缠绕其上。原生质柱具有细胞膜，膜外还有由细胞壁和黏液层构成的外鞘，轴丝则夹在外鞘和细胞膜之间。 螺旋体的轴丝的超微结构和某些化学特性与细菌鞭毛相似，不同之处在于轴丝始终缠绕于细胞体，而且全都位于细胞内，并被外鞘所包围。螺旋体通过轴丝而运动,染色特性,都是革兰氏阴性，但大多数不易
2、着色，故很少应用。姬姆萨氏染色效果较好，可使其染成红色或蓝色。染成蓝色者一般多属腐生性螺旋体。常用镀银染色法染色，染液中金属盐黏附于螺旋体上，使之变粗而显出黑褐色。也可用印度墨汁或刚果红与螺旋体混合负染，螺旋体透明无色，背景衬有颜色，反差明显。以相差和暗视野显微镜观察螺旋体效果良好，既能检查形体又可分辨运动方式，甚为常用。,培养特性,螺旋体的培养与细菌相似。有的较为困难，多数需厌氧培养。但有些属种，特别是细螺旋体(又称钩端螺旋体)的培养并不难，可需氧生长。非致病性螺旋体、蛇形螺旋体、钩端螺旋体以及个别致病性密螺旋体与疏螺旋体可采用含血液、腹水或其他特殊成分的培养基培养，其余螺旋体迄今尚不能用人
3、工培养基培养，但可用易感动物来增殖培养和保种。,螺旋体的科和属,螺旋体 引起人类疾病 病原体 螺旋体科 密螺旋体属(Treponema) 梅毒 苍白密螺旋体苍白亚种 疏螺旋体属(Borrelia) 莱姆病 伯氏疏螺旋体 流行性回归热 回归热疏螺旋体 钩端螺旋体科 钩端螺旋体属(Leptospira) 钩端螺旋体病 问号状钩端螺旋体,名称 螺旋数 螺旋 其他特点 举例 疏螺旋体 3-10 不规则 回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体 密螺旋体 8-14 规则，细密 两端尖 苍白密螺旋体苍白亚种 钩端螺旋体 规则，更细密 两端钩状 问号状钩端螺旋体,重要的螺旋体,密螺旋体属,苍白亚种 俗称梅毒螺旋体 人类
4、梅毒的病原体，性传播疾病,形态: 细长卷曲，两端尖直，8-14个 致密而规则的螺旋，运动活泼 轴丝: 运动器官 染色: Giemsa法: 红色 镀银染色法: 棕褐色 观察: 暗视野法 (形态、运动),梅毒螺旋体,一、生物学性状,不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖 在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢。,培养,对冷(4 , 3 d)、热(50 , 5 min)、干燥(1-2 h)敏感。 对常用化学消毒剂亦敏感，1-2%石炭酸数分钟就死亡。 对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感。,抵抗力,培 养,Nichols株(Nichols strain): 有毒力 在家兔睾丸或眼前房内接种可获得 Rei
5、ter株(Reiter strain): 失去致病力 转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片， 厌氧培养 用作多种梅毒血清诊断的抗原,致病因素,1. 降低免疫因素的物质 (1) 粘多糖和唾酸: 阻止补体激活，干扰补体杀菌 (2) PGE2: 刺激巨噬细胞的吞噬活性 (3)单核细胞: 对有丝分裂原反应降低 (4) Ig: 抑制NK活性,二、致病性与免疫性,2. 粘附性 透明质酸酶 (1) 吸附 (2) 分解透明质酸-破坏组织、毛细血管 3. 免疫病理损伤 二期梅毒: 免疫复合物 三期梅毒: 树胶肿,二、致病性与免疫性,致病因素,所致疾病,梅毒螺旋体：梅毒(syphilis) (STD) 人是梅毒的唯一
6、传染源 获得性 性接触传播 输血-输血后梅毒 (血液) 先天性 母体胎盘胎儿 梅毒：分为3期 (1)第一期 (2)第二期 (3)第三期 (晚期梅毒),二、致病性与免疫性,(早期梅毒),感染性强，破坏性小,感染性小，破坏性大,期（初期）梅毒,感染后3周左右局部出现溃疡或无痛性硬下疳(hard chancre)，多见于外生殖器，一般48周后常自愈。,期梅毒,发生于硬下疳出现后28周。梅毒螺旋体血症，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。 产生抗体-不治疗-症状可在3w- 3m后消退。,（斑丘疹）,期(晚期)梅毒,发生于感染2年以后，亦可长达1015年。病变可波
7、及全身组织和器官。基本损害为慢性肉芽肿，局部组织坏死。损害常进展和消退交替出现。皮肤、肝、脾和骨骼常被累及。可危及生命。,三期梅毒树胶肿,先天性梅毒（胎传梅毒）,多发生于妊娠4个月之后。 引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎； 出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征。,免疫性,带菌免疫 (有感染时才有免疫力) 细胞免疫: 主要 体液免疫: 有作用 抗体: (1) 抗梅毒螺旋体抗体: 47KD抗体等 杀死或溶解(补体参与下) 调理作用 (2) 抗心肌磷脂抗体:即反应素(reagin) 无防御作用 用于血清学诊断,二、致病性与免疫性,三、微生物学检查法,1. 标
8、本 期梅毒-硬下疳渗出液 期梅毒-梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液 2. 显微镜检查 暗视野显微镜：运动 镀银染色-镜检 3. 血清学诊断,血清学检查,1. 非特异性试验 抗原：正常牛心肌脂质（梅毒螺旋体不能人工培养，但和正常牛心肌脂质有交叉抗原） 方法： WHO推荐使用的VDRL(venereal disease research laboratory)简易玻片沉淀试验 不加热血清反应(USR):常用 快速血浆反应素试验(RPR):常用 阳性率：一期：53-82.9 二期：100 三期：较低 假阳性（因抗原为非特异），作为筛选,2. 特异性试验： 密螺旋体抗原试验 抗原（Nichols株螺旋体
9、）螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作梅毒证实试验 常用方法：荧光密螺旋体抗体吸收试验 (flrorescent antibody-absorption，FTA-ABS） 梅毒螺旋体微量凝血试验（MHA-TP）,血清学检查,四、防治原则,预防：加强性卫生教育和严格社会管理。 治疗：尽早，足量使用青霉素 四环素和强力霉素可代替青霉素,钩端螺旋体属（Leptospira）,致病性 问号状钩端螺旋体(L.interrogans) 非致病性 双曲钩端螺旋体(L.biflexa),螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状。 运动活泼 ,常使菌体呈C、S或8字型 革兰染色阴性，不易着染
10、Fontana镀银染色法染成棕褐色,形态与染色,一、生物学性状,Morphology and structure,Protoplasmic cylinder 柱型原生质体 Endoflagella 内鞭毛 Outer membrane 外膜,silver stain (Fontana stain),Morphology and structure,darkfield microscope,营养要求复杂，常用Korthof培养基。 适宜生长温度为2830 钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢。 需氧或微需氧。,培 养,抵抗力,热抵抗力弱，60 1 min即死亡。 0.2%来苏、1:2000升汞、1%
11、石炭酸经10-30 min被杀灭。 对青霉素敏感。 在湿土或水中可存活数月。,二、致病性与免疫性,致病物质-类似细菌内毒素与外毒素,1内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质(LLS) 2溶血素 3细胞毒性因子(CTF) 4.细胞致病作用(CPE)物质,所致疾病,钩端螺旋体病-一种人畜共患传染病,二、致病性与免疫性,二、致病性与免疫性,传播方式,病程,免疫性,病后可获得抗同型钩体的持久免疫力，,体液免疫为主,二、致病性与免疫性,三、微生物学检查法,1.病原体检测 发病10天内取血液；1周后取尿液；有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检 分离与鉴定 接种至Korthof培养基，置28 孵育。 阳性标本:在
12、2周内可见培养液呈轻度混浊暗视野显微镜检查有则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者。 动物接种 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔 分子生物学方法,2.血清学诊断,病初和发病后第34周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液 方法: 显微镜凝集试验(MAT) 间接凝集试验 以乳胶 (聚苯乙烯)或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物,三、微生物学检查法,四、防治原则,防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。,疏螺旋体属 (Borrelia),伯氏疏螺旋体 (B.
13、 burgdorferi) 回归热疏螺旋体 （B. recurrentis） 奋森疏螺旋体 (B.vincentii),有 3-10个稀疏而不规则的螺旋，呈波浪状,形态： G-（不易着色），常用Giemsa染色，疏螺旋体，两端稍尖，运动活泼,一、生物学性状,培养： 可进行人工培养，但营养要求较高，生长缓慢,伯氏疏螺旋体,二、致病性与免疫性,致病物质：侵袭力，内毒素样物质 所致疾病莱姆病（自然疫源性传染源） 传播方式 储存宿主：白足鼠、鹿 传播媒介：硬蜱（伯氏螺旋体在其肠中繁殖） 传播方式：叮咬（蜱粪便、唾液感染伤口）,二、致病性与免疫性,病程潜伏期（3-30天）及表现 叮咬处慢性移行性红斑（2
14、-3W ） 早期症状：头痛、发热、肌痛等 晚期症状：皮肤、神经、关节、心脏， 一个或多个系统损害 免疫性: 体液免疫为主,莱姆病的传播媒介,莱姆病,经3-30 d潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑(ECM)。 晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常,三、微生物学检查和防治,血清学检查及分子生物学诊断技术 加强防护，防止硬蜱叮咬 人用疫苗仍在研制中。,回归热疏螺旋体,回归热是多种疏螺旋体引起的疾病 虱传回归热（流行性回归热）回归热疏螺旋体 蜱传回归热（地方性回归热）其他15种疏螺旋体 急起急退的高热，反复发作，肌肉酸痛， 黄疸、肝脾肿大、出血倾向等 体液免疫为主 高热期涂血片查螺旋体,奋森疏螺旋体,与梭形梭杆菌寄居于人类口腔牙龈部。 当机体免疫功能下降，则这两种菌大量繁殖，协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等。,