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实验七 牛乳中酪蛋白的制备 目的要求 学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。,实验原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,乙醚除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。,试剂和器材,试剂: 95%乙醇;乙醇乙醚混合液 (V/V=11);无水乙醚 0.2mol/L pH4.7醋酸醋酸钠缓冲液,材料 纯牛奶(蒙牛),1将25mL牛奶加热至40。在搅拌下慢慢加入预热至40、pH4.7醋酸缓冲液25mL。用精密试纸调pH值至4.7。 2. 将上述悬浮液冷却至室温。离心10min(3000r/min)弃去上清液,得酪蛋白粗制品。 3用水洗沉淀两次,离心5min(3000r/min),弃去上清液。,操作方法,3用乙醇洗沉淀1次,离心5min(3000r/min),弃去上清 液。用乙醇乙醚混合液洗沉淀1次。最后用乙醚洗沉淀1次, 各离心5min(3000r/min) 。 4将沉淀摊开在表面皿上,风干;得酪蛋白纯品。 5准确称重,计算含量酪蛋白g/100mL牛乳(g%),并和 理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较,求出实际得率。,1制备高产率纯酪蛋白的关键是什么?,思考题,