细菌的形态、染色.ppt

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1、微生物的分类,微生物:包括细菌、支原体、衣原体、螺旋体、放线菌、立克次体、病毒及真菌。 微生物的生物学性状包括:形态结构、染色特性、生长繁殖与培养、理化性状、分类等。,细 菌,细菌 广义所有原核细胞型微生物(细菌、支原体衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌) 共性:有细胞壁、原始核质、二分裂、对抗生素敏感 狭义专指其中的细菌,细菌的大小与形态,观察细菌常用光学显微镜,其大小用测微尺在显微镜下进行测量,以微米(m)为单位。不同种类的细菌大小不一,同一种细菌也因菌龄和环境因素的影响而有差异。 细菌按其外形,主要有,球菌 杆菌 螺形菌,球状、杆状和螺旋状,双球菌 分裂后两个球菌成对排列的为双球菌. 如肺

2、炎双球菌,(1)双球菌,一、 球 菌,脑膜炎奈瑟菌,双球菌,双球菌,(2)链球菌 分裂是沿一个平面进行,分裂后细胞排列成链状. 如乳链球菌,链球菌,链球菌,链球菌,(3)葡萄球菌 分裂面不规则,多个球菌聚在一起,像一串串葡萄。 如金黄色葡萄球菌,葡萄球菌,葡萄球菌,葡萄球菌,(4)四联球菌 分裂是沿两个相垂直的平面进行,分裂,分裂后每四个细胞在一起呈田字形. 如四联微球菌,四联球菌,四联球菌,四联球菌,(5)八叠球菌 按三个互相垂直的平面进行分裂后,每八个球菌在一起成立方体形. 如藤黄八叠球菌,八叠球菌,八叠球菌,二、 杆菌,不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。,杆菌的形态多样,梭状芽孢杆菌,

3、杆菌的形态多样,分枝杆菌,双歧杆菌,球杆菌,链杆菌,棒状杆菌,分枝杆菌,三、螺形菌,弧 菌,螺 菌,革兰氏染色法由Gram发明,沿用至今已有100多年历史。 是临床细菌学中最简单、最重要的方法之一。 染色后把细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。,细菌的革兰氏染色,1.鉴别细菌 2.选择药物参考 G+ 菌的敏感药物:青霉素 G- 菌的敏感药物:链霉素、氯霉素 3.与致病性有关 G+ 菌的致病物质:产生外毒素 G- 菌的致病物质:产生内毒素,革兰染色的意义,1.涂片 (layering a film) 2.干燥 (air-dry) 3.固定 (heat-fixing) 4.初染 (first st

4、ain) 5.媒染 (stain with iodine) 6.脱色 (decolorize) 7.复染 ( counter-stain),方法,涂片,第一步 涂片,临床标本和液体培养物:直接涂片 固体培养基上的细菌和不易涂开的标本:取一滴生理盐水置玻片中央,取菌在盐水中磨匀,成1cm2的涂面。,技巧:涂片时从中心向外研磨,用力要均匀,厚度以把涂片放到纸上,透过涂片刚好看到下面纸上的字为宜。,第二步 干燥,涂片最好在室温下自然干燥 或将标本面向上,置于火焰上部的热气烘干,切不可在火焰上烤干,第三步 固定,将已干燥的涂片通过火焰3次,以玻片触及手背皮肤热而不烫为度。,目的: 1.杀死细菌 2.使

5、细菌附着于玻片上 3.维持细菌原有形态 4.改变细菌对染料的通透性,第四步 初染,滴结晶紫染液于玻片上,使细菌涂层被全部覆盖,1分钟后,细流水冲洗,甩干。,注意:染液必须用水冲洗,而不能直接倒去,以防染液沉渣留在玻片上。,第五步 媒染,滴加碘液于玻片上,1分钟后,流水冲洗,甩干。,在这一步中,碘液作为媒染剂,它的主要作用是促进染料与细菌的结合,也就是初染时结晶紫与细菌的结合,所以媒染剂又叫助染剂。,第六步 脱色,滴加95%酒精数滴于玻片上,轻轻摇动,不断补充酒精,脱色至流下来的液体无紫色为止,约半分钟,流水冲洗,甩干。,这一步在操作中最为关键,脱色时间应以标本涂片厚薄灵活掌握,一般以流下的酒精无紫色为宜。,第七步 复染,加稀释石碳酸复红数滴,一分钟后流水冲洗,用滤纸吸干玻片表面的水。,染色片制备好后, 在油镜下观察结果,正常情况下,细胞的成分与大多数背景染成粉红色, 革兰氏阳性菌染成蓝紫色,革兰氏阴性菌染成红色。,结果,革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌,革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,革兰阳性菌,革兰阴性菌,看完了!休息,休息吧!,

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