CD19和CD27标记系统性红斑狼疮患者外周血B细胞的亚群分析.pdf

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1、安徽医科大学学报A c t a U n i v e r s i t a t i s M e d i c i n a l is A n h u i 2 0 0 6 A p r ; 4 1 ( 2 ) 1 8 9 C D 1 9 和C D 2 7 标记系统性红斑狼疮患者 外周血B细胞的亚群分析 王春淮 ， 徐建华 ， 翟志敏2 摘要目的 研究系统性红斑狼疮( S L E ) 外周血中B淋巴 细胞亚群的分化状态及其与体液免疫的关系。方法选择 S L E 患者3 2 例， S L E D A I 分为) 1 0 分组和 1 0 分组; 健康献 血者 1 4 例作为对照。采用流式细胞仪检测研究对象外周血

2、 中C D 1 9 十 C D 2 7 - , C D 1 9 C D 2 7 十 和C D 1 9 C D 2 7 十 + 细胞， 并 分析各亚群比例、 C D 1 9 平均荧光强度的差异和体液免疫的 关系。结果两组 S L E 患者与正常对照相比， C D 1 9 平均荧 光强度明显降低。S L E D A I 31 0 分组的C D 1 9 十 C D 2 7 + 细胞 比率较正常对照明显升高。S L E D A I 1 0分组的C D 1 9 C D 2 7 一 细胞较正常对照明显升高， C D 1 9 十 C D 2 7 细胞明显降 低。I g G与浆母细胞比率呈正相关。C D 1

3、9 C D 2 7 十 + 细胞比 率在抗 d s D N A抗体阳性组较阴性组明显升高。结论S L E 患者外周血C D 1 9 十 C D 2 7 + 及C D 1 9 C D 2 7 + 十 亚群存在异常， 可能与S L E 患者体内的体液免疫异常有关， 并在其中发挥 重要作用。 主题词红斑狼疮， 系统性; 抗原， C D 1 9 ; 抗原， C D 2 7 ; B淋 巴细胞亚群; 自身抗体 中图 分类号 R 5 9 3 . 2 4 ; R 3 2 9 . 2 4 ; R 3 9 2 . 1 2 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 0 一 1 4 9 2 ( 2 0 0 6 ) 0 2

4、 一 0 1 8 9 一 0 4 有高水平的 C D 2 7 。由此根据 B细胞表面标志物 C D 1 9 结合记忆性标志物C D 2 7 表达量的高低， 可将 B 细胞分为三个大亚群 : 未活化B细胞( C D 1 9 C D 2 7 一 ) 、 记忆性B 细胞( C D 1 9 C D 2 7 ) 、 浆母细胞 ( C D 1 9 C D 2 7 + 十 ) 。我们利用双荧光标记法流式细 胞术检测细胞表面的C D 1 9 和C D 2 7 分子的表达， 从 单细胞水平对未活化B 细胞、 记忆性B细胞和浆母 细胞进行研究。 系统性红斑狼疮( S L E ) 是一种多因素参与的特 异性自 身性

5、疾病， 患者突出表现有多种自身抗体的 产生， 并通过免疫复合物等途径， 造成几乎周身每一 系统、 器官的受累。以往的研究多集中在 B 1 ( C D 5 ) 和B 2 ( C D 5 一 ) 亚群方面， 试图从抗体产生 的 来源方面 解释 本病 1 1 。由于B 1 细胞一般不发生 体细胞突变， 无亲和力成熟， 产生低亲和力的I g m抗 体， 不产生免疫记忆细胞， 并不能反应 B细胞亚群 的真实情况。最近的研究表明C D 2 7 分子可作为记 忆性B 细胞的 标志 。 研究发现表达C D 2 7 的B 细 胞都有突变和重组的V H基因， 说明它们都经历了 抗原的亲和力选择， 而 C D 2

6、7 一 的 B细胞则无此改 变。此外还发现浆母细胞 ( 浆细胞的前体) 的表面 2 0 0 5 一 1 2 一 1 5 接收 作者单位: 安徽医 科大学第一附属医院风湿科， 合肥 2 3 0 0 2 2 z 安徽医科大学附属省立医院中心实验室， 合肥 2 3 0 0 0 1 作者简介: 王春淮， 男， 3 0 岁， 硕士研究生; 徐建华， 女， 4 9岁， 教授， 硕士生导师， 责任作者， E - m a i l j i a u h u a m a i l . h f . a h . c u 1 材料与方法 1 . 1 病例及健康对照的选择3 2 例患者为安徽医 科大学第一附属医院门诊及住院

7、S L E患者， 男 6 例， 女2 6 例， 年龄1 6 一 4 8 ( 3 1 士 1 1 . 5 ) 岁。其诊断标 准符合美国风湿病学院于 1 9 9 7年修订的分类标 准 1 a 1 4 位健康献血员为正常 对照， 女1 1 例， 男3 例， 年龄 1 8 一 4 8 ( 3 3 士 1 0 ) 岁。根据S L E D i s e a s e A c - t iv i t y I n d e x ( S L E D A I ) 标准 s ) ， 分为S L E D A I 1 0 分 组， 共1 5 例， 平均年龄( 3 0 士 9 ) 岁， 女1 2 例， 男3 例。 S L E D

8、 A I : 1 0 分组， 共 1 7 例， 平均年龄( 2 9 士 8 ) 岁， 女1 3 例， 男4 例。人选时排除下列情况: 其它原 因引起的严重的肝肾疾病; 怀孕、 哺乳、 感染及 伴发其他传染性疾病; 伴发有其他慢性疾病。 各种感染急性期。 1 . 2 试剂和仪器F I T C( 异硫氰荧光素) 标记的抗 人C D 2 7 单克隆抗体及其对照F I T C M o u s e I g G I , P E ( 藻红蛋白) 标记的抗人C D 1 9 单克隆抗体及其对照 P E M o u s e I g G 1 均为C A L T A G L A B O R A T O R I E S

9、 公司 产品。溶血剂为0 . 8 3 %的氯化按溶液。流式细胞 仪为B e c k m a n - C o u l t e r X L - E S P I C M C L 型。 1 . 3 标本的采集和检测于上午8 ; 0 0 - 1 0 ; 0 0 采 集肘静脉血2 一 3 m l ， 肝素抗凝， 标本在采集后4h 内 上流式细胞仪检测。 检测时取抗凝全血1 0 0闪， 按试剂说明， 加人C D 2 7 一 F I T C和C D 1 9 一 P E各5 闪， 混匀后室温下避光反应1 5 m i n 后加人1 m l 溶血 剂， 3 7 水浴约 1 0 m i n ， 待完全溶血后， 立刻上

10、流式 细胞仪检测。常规采用荧光微球 F l o w C h e c k 和同 型阴性对照试剂对仪器进行质量监测和调控， 根据 前向散射角( F S C ) 和侧向散射角( S S C ) ， 对淋巴细 1 9 0 安徽医 科大学学报 A c t a U n iv e r s i t a t i s M e d i c i n a l i s A n h a i 2 0 0 6 A p r ; 4 1 ( 2 ) 表 1 S L E患者与正常对照未活化 B细胞、 记忆性 B细胞和浆母细胞亚群的比较( %, x 1 s ) 组别 正常对照 S L E D A I 1 0 S L E D A I)1

11、 0 n 1 4 1 5 1 7 C D 1 9 平均荧光强度C D 1 9 C D 2 7 一 亚群C D 1 9 C D 2 7 + 亚群 C D 1 9 十 C D 2 7 十 + 亚群 2 7 . 9 3 1 7 . 3 2 2 0 . 2 8 1 3 . 4 7* 1 7 . 1 1 13 . 5 9* 7 3 . 0 8士8 . 6 7 8 0 . 6 7 11 1 , 3 0* 7 4 . 6 1 11 3 . 0 7 2 2 . 9 2 1 6 . 3 5 1 4 . 0 7上 9 . 6 5 1 9 . 5 9 1 9 . 6 3 3 . 3 611 . 3 2 5 . 2

12、4 1 3 . 7 1 7 . 5 6 14 . 3 7 与正常对照组比较: P 0 . 0 5 七 玩 岁 乙 ; 班 ， 2 一f一f ， ; 。奋 _ 34 0001 -2 O 00 O一 61自口j叫d O一 61口口山d 下 ; !。 - -一 刁 4 O一 6一自Q闺d 0 . 1 1 t 0 1 0 0 1 0 0 0 F I T C- CD2 7F I TC- CD2 7 I t o 1 0 0 1 0 0 0 F I T C- CD2 7 图1 正常对照流式细胞图图2 高活动 S L E组流式细胞图图3 低活动S L E组流式细胞图 注: 以上3 图为C D 1 9 + 设门

13、时流式细胞图。1 象限为C D 2 7 阴性细胞群， 代表未活化B 细胞亚群; 2 象限为C D 2 7阳性细胞群， 其中的方框 代表着 C D 2 7 十 + 的浆母细胞亚群， 2 象限的其他细胞为C D 2 7 干 的记忆性 B细胞亚群 胞群进行设门; 每次获取设门内5 0 0 0 个细胞以上， 荧光激发光波长为4 8 8 n m , P E及F I X 荧光素滤光 片波长分别为5 7 5 n m和5 2 5 n m， 各荧光素之间荧光 补偿调至标准值范围内。在L i s t m o d e 软件下分析数 据， 用C D 1 9 一 细胞群荧光强度为参照设定阂值界定 C D 1 9 B淋巴

14、细胞群， C D 2 7 一 F I T C荧光强度超过 2 倍定义为C D 2 7 十 + 细胞群， 计算 C D 1 9 B淋巴细胞 门内细胞和C D 2 7 十 和C D 2 7 十 + B细胞的阳性率。体 液免疫功能的检测: I g G , I g A、 I g M、 C 3 采用免疫比 浊法， 抗d s D N A采用免疫印迹法， 抗心磷脂( A C L ) 抗体采用E L I S A法。 1 . 4 统计学处理数据分析采用 S P S S 1 1 . 5 统计 软件， 计量资料以x 士 、 表示， 两独立样本均数比较 用独立 ， 检验。多个样本均数比较用方差分析， 两 个变量相关分

15、析用S p e a r m a n 相关分析。 2 . 2 B淋巴细胞亚群与免疫球蛋白、 补体的关系 分别以S L E 患者的I g G , I g A , I g M , C 3 与未活化B细 胞亚群( %) 、 记忆 B细胞亚群( %) 、 浆母细胞亚群 ( %) 作相关分析， ; 值结果见表2 。结果显示: I g G 与浆母细胞亚群比率呈正相关。 表2 S L E患者未活化B细胞、 记忆性B细胞和 浆母细胞亚群与免疫球蛋白、 补体的相关分析( %， ; 值) C D1 9十 C D 2 7- 亚群 C D1 9+ C D 2 7+ 亚群 C D1 9 C D 2 7+ + 项 目 一0

16、 . 21 9 一0 . 1 0 5 0. 0 01 0. 2 4 8 0 . 1 1 5 0 . 0 4 7 0 . 0 2 5 一0. 2 0 7 亚群 0 . 4 1 6 0 . 2 2 2 一 0 . 0 7 1 一0. 3 5 5 lsG妙lsMC3 I g G与浆母细胞比率呈正相关， P 0 . 0 5 2 结果 2 . 1 S L E患者与正常对照 B淋 巴亚群 的 比较两 组S L E与正常对照相比， C D 1 9 平均荧光强度明显 降低( P 0 . 0 5 ) , S L E D A I ? 1 0 分组的浆母细胞比率 较正常对照明显升高( P 0 . 0 5 ) , S

17、 L E D A I 1 0分 组的未活化B细胞亚群较正常对照明显升高( 尸 0 . 0 5 ) ， 记忆 B细胞亚群明显降低( P 0 . 0 5 ) 。见表 1 及图 1一 3 0 2 . 3 B淋巴细胞亚群与自身抗体的关系由于绝 大多数S L E 患者A N A抗体阳性， 本研究选择了S L E 分类标准中代表性的其它两个自身抗体: d s D N A ( S L E活动指标) 和A C L 抗体( 诊断抗磷脂综合征的 必 需 指 标) ， 作为 研究 对象4 1 。 根据d s D N A和A C L 抗体检测的结果把 S L E患者分为阳性组与阴性组， 分别比较两组间未活化B细胞、

18、记忆性 B细胞和浆 母细胞亚群比率， 结果见表3 , 4 。结果显示 d s D N A 阳 性组浆母细胞较阴性组明显升高。A C L阳性组 和阴性组间无明显差异。 安徽医 科大学学报 A c t a U n i v e r s it a t is M e d ic i n a l is A n h u i 2 0 0 6 A p r ; 4 1 ( 2 ) 表3 S L E患者未活化B细胞、 记忆性B细胞和浆母细胞亚群与抗d s D N A抗体的关系分析( %I x S ) 组 d s DN A d - DNA C D 1 9 平均荧光强度C D 1 9 C D 2 7 一 亚群C D 1

19、9 C D 2 7 亚群 CD1 9 亚群 +)1 4 一)1 8 1 7 . 6 9 13 . 7 4 1 9. 1 6+3. 6 9 7 4 . 6 3士1 4. 8 9 7 8 . 9 4 11 0. 3 6 1 9 . 2 0土1 1 . 1 1 1 4 . 6 0士8 . 5 5 7 . 8 1 14 . 9 5 . 012. 4 4 别一( 与阴性组比较: t =- 2 . 1 3 1 尸 0 . 0 5 表4 S L E患者未活化B细胞、 记忆性B 细胞和浆母细胞亚群与A C L 抗体的关系 分析( %， 见 1 s ) 组别 A C L ( +) A C L ( 一) C D

20、1 9 平均荧光强度C D 1 9 C D 2 7 一 亚群 C D1 9+C D 2 7 1 2 . 6 8士7 - 1 6 _ 1 0士9 亚群 C D 1 9 +C D 2 7 十 十 亚群 9 23 2 0 - 3 913 8 8 1 8 . 0 3土3 . 7 2 8 1 . 4 0士8 . 2 7 7 5 . 1 0士1 2 . 6 7 3 2 7 t ， 6 . 7 0 1 6 . 7 1 8 . 1 2 - t a f re s h l o o k J . L u p u s , 2 0 0 1 ， 1 0 ( 8 ) : 5 2 3一5 . K a z u n a g a A

21、 , S h o H, H a r u o N , e t a l . C D 2 7 ; a m e m o ry B - c e l l m a r k e r J . I m m u n o l T o d a y , 2 0 0 0 ， 2 1 ( 5 ) : 2 0 4 一 6 . S h i n i c h i S , M a n a b u F , M i n o r u H, e t a l . A l t e r e d b l o o d B l y m p h o - c y t e h o m e o s ta s i s i n s y s t e m i c s c

22、 l e r o s is e x p a n d e d n a i v e B c e l l s a n d d i m i n i s h e d b u t a c t i v a t e d m e m o ry B c e l l s J .A r t h r i t i s R h e u m , 2 0 0 4 , 5 0 ( 6 ) : 1 9 1 8 一 2 7 . H o c h b e r g M C . U p d a t i n g t h e A m e r i c a n C o l l e g e o f R h e u m a t o l o g y r

23、e v i s e d c r i t e ri a f o r t h e c l a s s i f i c a t i o n o f s y s t e m i c l u p u s e ry t h e m a to - s u s J . A r t h ri t i s R h e u m , 1 9 9 7 ， 4 0 ( 9 ) : 1 7 2 5 . B o m b a r d i e r C , G l a d m a n D D , U r o w i t z M B , e t a l . D e ri v a t i o n o f t h e S L E D A

24、 ) , a d is e a s e a c t i v i ty i n d e x f o r l u p u s p a t ie n t s 汇 J . A r - t h r i t i s R h e u m, 1 9 9 2 ， 3 5 ( 6 ) : 6 3 0一 4 0 . O d e n d a h l M, J a c o b i A , H a n s e n A , e t a l . D i s t u r b e d p e ri p h e r a l B l y m p h o c y t e h o m e o s t a s i s i n s y s

25、t e m i c l u p u s e ry t h e m a t o s u s J .J I m m u n o l , 2 0 0 0 , 1 6 5 ( 1 0 ) : 5 9 7 0 一 9 . S a t o S , H a s e g a w a M, F u j i m o t o M, e t a l . Q u a n t i t a t i v e g e n e t i c v a r i a - t i o n i n C D I 9 e x p r e s s i o n c o r r e l a t e s w i t h a u t o i m m u

26、n i t v J . J I m - m u n o l ， 2 0 0 0 , 1 6 5 1 1 ) : 6 6 3 5一 4 3 - 、J气eses习 2、 rLl十.es 3 讨论 本研究发现: 两组 S L E患者与正常对照相 比， C D 1 9 平均荧光强度明显降低。C D 1 9 是 B细胞 表面标志， 它与C D 2 1 ( C R 2 ， 旧称 C a d 受体) 等以非 共价键结合形成 B细胞活化辅助受体。因此推测 在S L E病程中， 由于大量的免疫复合物形成， C D 2 1 作为C 3 的受体与之结合， 导致C D 1 9的继发结合， 使C D 1 9 的 平均荧

27、光强度下降, 1 0 S L E D A I , 1 0 组的C D 1 9 + C D 2 7 + + 的浆母细胞比率较正常对照明 显升高。推测 S L E活动时有大量高亲和力的自 身 抗体的产生， 其原因可能为浆细胞的前体的C D 1 9 十 C D 2 7 * 浆母细胞反应性的活化增殖所致。 S L E - D A I 1 0 分组的C D 1 9 + C D 2 7 一 未活化B细胞较正 常 对照明 显升高， 这点与O d e n d a h l e t a l b 报道的明 显下降和S h i n i c h i e t a l f s 报道的无明 显差异均不一 致， 同时这组的 C

28、 D 1 9 + C D 2 7 + 的记忆细胞明显降 低。推测由于缓解疾病的抗风湿性药物和激素的应 用， 使外周血中的 B细胞下降， 骨髓中未活化 B细 胞大量释放入外周血所致; . I g G与浆母细胞比率 呈正相关。推测这与浆母细胞变为浆细胞后能分泌 大量高亲和力的I g G相关。(5 ) C D 1 9 + C D 2 7 + 浆母 细胞比率在抗d s D N A抗体阳性组较阴性组明显升 高。抗d s D N A抗体对S L E 有较高的特异性， 7 0 % - 9 0 %的 活 动 期S L E 患 者 该抗 体阳 性4 1 ， 浆母细 胞的 活化可能与此相关。 由于本实验为一横断面

29、描述性研究， 并不能反 应临床各种干预措施对 B细胞亚群的影响， 此项工 作可在以后的研究中进一步深化， 以求对此病有更 新的认识。本研究提示: S L E各组与健康对照相比 外周血 C D 1 9 + C D 2 7 + 记忆 B细胞、 C D 1 9 C D 2 7 “ 浆母细胞亚群存在紊乱。至于B细胞亚群紊乱的 原因可能与S L E患者存在T H 1 / T H 2比率失调 、 血清中B 淋巴 细 胞刺激因 子明 显升高 9 , B 淋巴 细 胞凋 亡受到抑制 “ 等因素有关。 S L E 是一种病因 及其表现复杂的疾病， B细胞亚群紊乱可能在S L E 的发病机制中具有重要作用。 8

30、M o k C C , L a u C S . P a t h o g e n e s i s o f s y s t e m i c l u p u s e ry t h e m a t o s u s J . J C l i n P a t h o l , 2 0 0 3 ， 5 6 ( 7 ) : 4 8 1 一 9 0 . 9 郑舜华， 刘贞富， 陈志平， 等. 系统性红斑狼疮患者血清中淋 巴 细胞刺激因子的检测 J .中华风湿病学杂志， 2 0 0 4 , 1 2 ( 8 ) : 4 1 6 一 1 8 . 1 0 R e p a r o n - S c h u ij t C C ，

31、 v a n E s c h W J , v a n K o o t e n C , e t a l . R e g u l a - t i o n o f s y n o v ia l B c e l l s u r v i v a l i n r h e u m a t o i d a r t h r i t is b y v a s c u l a r c e l l a d h e s i o n m o l e c u l e 1 ( C D 1 0 6 ) e x p r e s s e d o n f i b r o b l a s t - l i k e s y - n o v

32、 i o c y te s 仁 J . A r t h r i t i s R h e u m, 2 0 0 0 , 4 3 ( 5 ) : 1 1 1 5 一 2 1 1 9 2 安徽医科大学学报A c t a U n i v e r s i t a t i s M e d i c i n a l is A n h u i 2 0 0 6 A p r ; 4 1 ( 2 ) 肝细胞癌中B L U基因甲基化状态 董桂银 ， 钱叶本 ， 朱立新 ， 耿小平， ， 李晓明2 ， 熊奇如 ， 孙峋 摘要目的了解肝细胞癌( H C C ) 中B L U基因的甲基化状 态及临床意义。方法采用甲基化特异性

33、聚合酶链反应 ( M S P ) 技术， 检测5 0 例H C C 癌组织及相应的癌旁组织， 4 个 H C C 细胞系， 8 例肝血管瘤旁和4 例供肝组织， 了解 B L U基 因在上述组织中的甲基化状态， 并分析其与临床资料间的相 关性。结果 4 例供肝组织均未发生甲基化， 8 例肝血管瘤 旁组织有1 例发生甲 基化， 4 个H C C 细胞系有3 个出现甲 基 化。 5 0 例H C C 癌组织及其相应的癌旁组织中， 分别检测到 3 3 例( 6 6 %) , 1 8 例( 3 6 %) 发生甲基化; 癌组织与癌旁组织 甲 基化率比 较， 差异有显著性( P = 0 . 0 0 3 )

34、; 肝功能C h i l d B 级患者甲 基化率高于C h il d A级患者( P= 0 . 0 4 1 ) ; 甲基化阳 性患者的肿瘤直径大于阴性患者( P二 0 . 0 0 4 ) ; 甲基化阳性 患者的半年无瘤生存率低于阴性患者， 但差异无显著性( 尸 = 0 . 0 5 8 ) 。结论B L U基因甲基化是 H C C中的频发事件， 2 0 0 5 一 1 1 一 1 6 接收 基金项目: 安徽省自 然科学基金资助项目 ( 编号: 0 3 0 4 3 7 0 2 ) 作 者 单 位: 安 徽医 科大 学 第一附 属医 院 肝 胆 外 科， 合 肥2 3 0 0 2 2 2 香港中

35、文大学病理解剖及细胞学系， 香港 作者简介: 董桂银， 男， 3 2 岁， 硕士研究生; 朱立新， 女， 4 4岁， 教授， 博士， 硕士生导师， 责任作者， E - ma i l ; l x - z h u 1 6 3 . c o m 可能参与H C C的发展。 主题词癌， 肝细胞; D N A甲基化; 基因 中图分类号 文献标识码 R 5 7 5 . 6 ; R 3 4 9 . 2 9 A 文章编号 1 0 0 0 一 1 4 9 2 ( 2 0 0 6 ) 0 2 一 0 1 9 2 一 0 4 肝细胞癌( h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n

36、o m a ， H C C ) 发病 率高， 起病隐匿， 预后恶劣。其发病的分子机制涉及 抑癌基因的失活， 而甲基化是抑癌基因失活的重要 机制 之一“ a B L U 是 新近发现的 抑癌基因， 目 前已 在鼻咽癌、 神经胶质瘤、 神经母细胞瘤、 鼻咽淋巴瘤、 胆管细胞癌和非小细胞肺癌中发现其高频甲基化失 活， 在H C C中研究 B L U基因甲基化状态则鲜有报 道。本研究采用甲 基化特异性聚合酶链反应( m e t h - y l a t i o n 一 s p e c ifi c P C R ， M S P ) 技术， 检测H C C 癌组织 和相应癌旁组织中B L U基因的甲基化状态，

37、 并分析 其与临床资料间的相关性。 1 材料与方法 1 . 1 1 . 1 . 1 材料 标本来源 5 0 例 H C C癌及癌旁组织标本， A n a l y s i s o f C D 1 9 a n d C D 2 7 o f B l y mp h o c y t e s u b s e t s i n p e r i p h r a l b l o o d o f p a t i e n t s w i t h s y s t e mi c l u p u s e r y t h e m a t o s u s Wa n g C h u n h u a i ， X u J i a n

38、h u a , Z h a i Z h i m i n ( D e p t o f R h e u m a t o l o g y ， T h e F i r s t A f fi l i a t e d H o s p i t a l o f A n h u i M e d i c a l U n iv e r s i ty , H ef e i 2 3 0 0 2 2 ) A b s t r a c t O b j e c t i v e T o s t u d y B l y m p h o c y t e s u b s e t s i n p e r i p h r a l b l

39、o o d o f p a t i e n t s w i t hs y s t e mi cl u p u s e ry t h e m a t o - s u s ( S L E ) a n d i t s r e l a t i o n s h i p w i t h h u m o u r i m m u n i t y . Me t h o d s B l o o d s a m p l e s a n d c l i n i c a l d a t a f r o m 3 2p a t i e n t s w i t h S L E w h o w e r e d i v i d

40、e d p e r i p h e r a l b l o o d o f p a t i e n t s i nt o t wo g r o u p s b y S L E D A I ， a n d 1 4 c o n t r o l s w e r e c o l l e c t e d . B l y m p h o c y t e s u b s e t s i n a n d c o n t r o l s t i o n s h i p w i t h h u m o u ri mmu nit y w e r ea n a l y z e d . d e t e c t e d

41、b y fl o w c y t o m e t ry. T h e B l y m p h o c y t e s u b s e t s a n d i t s r e l a - R e s u l t s T h e fl u o r e s c e n c e i n t e n s i t y o f C D 1 9 i n p e r i p h e r a l b l o o d i n p a t i e n t s w i t h S L Ew as h i g h e r t h a n t h o s e i n.C D 1 9 + C D 2 7 + +s u b s

42、 e t i n g r o u p o f S L E D A I)1 0 w a s h i g h e r t h a n t h a t i n n o r m a l c o n t r o l s . C D 1 9 十 n o r ma l CD2 7- c o n t r o l s s u b s e t i n g r o u p o f S L E D A I 1 0 w a s h i g h e r t h a n t h a t i n n o r m a l c o n t r o l s . F u rt h e r m o r e ， C D 1 9 + C

43、D 2 7 + s u b s e t i n t h i s g r o u p w a s l o w e r t h a n t h a t i n n o r ma l c o n t r o l s . C D1 9+ C D 2 7+ + s u b s e t h a dp o s i t i v ec o r r e l a t i o n t o t h e l e v e l o f I g G . M o r e o v e r , t h i s s u b s e t i n a n t i - d s D N A A bp o s i t i v e e r t h

44、 a nn e g a t i v e g r o u p. C o n c l u s i o n C D 1 9 + C D 2 7 十 a n d C D 1 9 十 C D 2 7 + 十 s u b s e t s i n p e r i p h e r a l g r o u p w a s h i g h - b l o o d o f p a t i e n t s w i t h S L E a r e a b n o r m a l a n d m a y p l a y a r o l e i n t h e p a t h o g e n e s i s o f S L E . Mc S H l u p u s e r y t h e m a t o s u s ， s y s t e m i c ; a n t i g e n s ， C D 1 9 ; a n t i g e n s ， C D 2 7 ; B - l y m p h o c y t e s u b s e t s ; a u t o a n t i b o d i e s