《【SN商检标准大全】SNT 2062-2008 进出口蜂王浆中大环内酯类抗生素残留量的检测方法 液相色谱串联质谱法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【SN商检标准大全】SNT 2062-2008 进出口蜂王浆中大环内酯类抗生素残留量的检测方法 液相色谱串联质谱法.pdf（21页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖犜 进出口蜂王浆中大环内酯类抗生素残留 量的检测方法 液相色谱串联质谱法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犿 犪 犮 狉 狅 犾 犻 犱 犲犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀狉 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛 犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准
2、网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 前 言 本标准的附录、 附录和附录均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位： 中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。 本标准主要起草人： 谢文、 丁慧瑛、 奚君阳、 钱艳、 陈笑梅、 黄雷芳。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 进出口蜂王浆中大环内酯类抗生素残留 量的检测方
3、法 液相色谱串联质谱法 范围 本标准规定了蜂王浆中螺旋霉素、 替米考星、 竹桃霉素、 泰乐菌素、 红霉素、 罗红霉素、 交沙霉素残留 量的制样和液相色谱串联质谱测定方法。 本标准适用于蜂王浆中螺旋霉素、 替米考星、 竹桃霉素、 泰乐菌素、 红霉素、 罗红霉素、 交沙霉素残留 量的检测。 方法提要 样品用甲醇沉淀蛋白质， 在磷酸盐缓冲盐溶液介质下， 再用 固相萃取小柱净化， 液相色谱串联 质谱测定， 外标法定量。 试剂和材料 除另有规定外， 所有试剂均为分析纯， 水为二次蒸馏水。 乙腈： 高效液相色谱级。 甲醇： 高效液相色谱级。 甲酸： 高效液相色谱级。 氢氧化钠。 磷酸二氢钠。 氢氧化钠溶液
4、： 称取 氢氧化钠， 并用水稀释至。 甲醇水溶液： 甲醇 水（ ， 体积比） 。 磷酸盐缓冲溶液： 溶解 磷酸二氢钠于 水中， 用 氢氧化钠溶液调节溶液 值到 ， 最后用水稀释至。 螺旋霉素、 替米考星、 竹桃霉素磷酸盐、 泰乐菌素酒石酸盐、 红霉素、 罗红霉素、 交沙霉素标准品： 纯 度大于等于 ， 参见附录表 。 种大环内酯标准储备溶液： 称取适量标准品（ ） ， 分别用甲醇溶解， 溶液浓度为 ， 冰箱保存。有效期三个月。 标准工作溶液： 根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成 、 、 、 、 的 混 合 标 准 工 作 溶 液， 相 当 于 样 品 中 含 有 、 、 、 、 大环内酯
5、。 固相萃取小柱， 或相当者， 使用前依次用 甲醇， 水预洗。 仪器和设备 高效液相色谱串联质谱仪： 配有电喷雾离子源。 旋转蒸发器。 固相萃取装置。 高速离心机： 。 计。 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 旋涡混合器。 氮吹仪。 试样制备与保存 取 代表性蜂王浆样品， 在室温下解冻， 等样品全部融化后搅匀， 将试样均分成两份， 分别装入 样品瓶中， 密封， 并标明标记。一份作为试验样， 另一份在 保存。 在制样的操作过程中， 应防止样
6、品污染或发生残留物含量的变化。 测定步骤 提取 称取 试样（ 精确到 ） 置于 具塞离心管中， 加 水， 混匀， 静置 ， 再加甲醇至 ， 于旋涡混合器上以 混匀 ， 于 离心 ， 过滤， 移取 滤 液， 加 磷酸盐缓冲溶液（ ） 稀释， 混匀。 净化 将溶液转移至固相萃取小柱中（ ） ， 再用 水和 甲醇水溶液（ ） 依次洗涤浓缩瓶， 洗 涤液过固相萃取小柱， 弃去流出液， 在负压下抽干， 用 甲醇洗脱， 控制流速 ， 收集全部洗脱液于 离心管中， 洗脱液在 以下水浴下平缓氮气吹至约 ， 用水定容至 ，混匀， 溶液过 ， 滤膜， 供液相色谱串联质谱仪测定。 测定 液相色谱串联质谱条件 ） 色
7、谱柱：柱， （ 内径） 或相当者： ） 流动相梯度洗脱程序（ 见表） ； 表 梯度洗脱程序 时间 乙腈 甲酸水溶液 ） 流速： ； ） 进样量： ； ） 离子源： 电喷雾离子源； ） 扫描方式： 正离子扫描： ） 检测方式： 多反应监测； ） 雾化气、 气帘气、 辅助气、 碰撞气均为高纯氮气； 使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测 要求， 参考条件参见附录表 ； ） 监测离子对（） ： 螺旋霉素 （ 定量离子） 、 ； 替米考星 （ 定量离子） 、 ； 竹桃霉素 （ 定量离子） 、 ； 泰乐菌素 （ 定量离子） 、 ； 红霉素 （ 定量离子） 、 ； 罗红霉素 （ 定量离子） 、 ； 交沙霉
8、素 （ 定量离子） 。 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 液相色谱串联质谱测定 根据试样中被测样液的含量情况， 选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定， 如 超出仪器线性响应范围应进行稀释。在上述色谱条件下螺旋霉素、 替米考星、 竹桃霉素、 泰乐菌素、 红霉 素、 罗红霉素、 交沙霉素的参考保留时间分别约为 、 、 、 、 、 和 ， 标准溶液的选择性离子流图参见附录中图 。 液相色谱串联质谱确证 按照液相色谱串联质谱条件测
9、定样品和标准工作溶液， 样品中待测物质的保留时间与标准溶液中待 测物质的保留时间偏差在 之内。定量测定时采用标准曲线法测定。定性时应当与浓度相当标准 工作溶液的相对丰度一致， 相对丰度允许偏差不超过表规定的范围， 则可判断样品中存在对应的被 测物。 表 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 允许的相对偏差 空白试验 除不加试样外， 均按上述操作步骤进行。 结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式（ ） 计算试样中大环内酯的残留含量， 计算结果需扣除空白值： 犡犻犮 犻犞 犿 （） 式中： 犡犻 试样中大环内酯类抗生素残留量， 单位为微克每千克（ ） ； 犮犻 从标准曲线上得到的大环
10、内酯类抗生素残留量的溶液浓度， 单位为纳克每毫升（ ） ； 犞 样液最终定容体积， 单位为毫升（ ） ； 犿 最终样液代表的试样质量， 单位为克（） 。 方法的测定低限（ 犔 犗 犙 ） 和回收率 测定低限 大环内酯类抗生素残留量测定低限为 。 回收率 回收率见表。 表 回收率的实验数据（ 在不同添加浓度范围内） 化合物添加浓度 （ ）回收率范围 螺旋霉素 替米考星 竹桃霉素 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 表（ 续） 化合物添加浓度
11、（ ）回收率范围 泰乐菌素 红霉素 罗红霉素 交沙霉素 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 附 录 犃 （ 资料性附录） 大环内酯标准品信息 表犃 种大环内酯标准品信息 标准物质英文名称 分子式 螺旋霉素 替米考星 竹桃霉素磷酸盐 泰乐菌素酒石酸盐 红霉素二水合物 罗红霉素 交沙霉素 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n
12、 e t ) 无需注册 即可下载 附 录 犅 （ 资料性附录） 犃 犘 犐 犔 犆 犕 犛犕 犛系统电喷雾离子源参考条件 ） 离子源参考条件： ） 电喷雾电压（ ） ： ； ） 雾化气压力（ ） ： （ ） ； ） 气帘气压力（ ） ： （ ） ； ） 辅助气流速（ ） ： （ ） ； ） 离子源温度（ ） ： ； ） 碰撞气（ ） ： （ ） ； ） 离子对、 去簇电压（ ） 、 碰撞气能量（ ） 及碰撞室出口电压（ ） 见表 。 表犅 离子对、 去簇电压、 碰撞气能量和碰撞室出口电压 名称离子对去簇电压（ ） 碰撞气能量（ ） 碰撞室出口电压 （ ） 螺旋霉素 替米考星 竹桃霉素 泰乐菌素
13、 红霉素 罗红霉素 交沙霉素 为定量离子对。 ） 非商业性声明： 附录表所列参数是在 质谱仪完成的， 此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考， 并不涉及商业目的， 鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 附 录 犆 （ 资料性附录） 螺旋霉素、 替米考星、 竹桃霉素、 泰乐菌素、 红霉素、 罗红霉素、 交沙霉素标准品选择性离子流图 图犆 螺旋霉素、 替米考星、 竹桃霉素、 泰乐菌素、 红霉素、 罗红霉素
14、、 交沙霉素 （ 狀 犵 犿 犔） 的标准品的选择性离子流图 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱 犃 狀 狀 犲 狓犃，犃 狀 狀 犲 狓犅犪 狀 犱犃 狀 狀 犲 狓犆狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱 犻 狊狌 狀
15、犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳 犮 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犪 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犪 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犣 犺 犲 犼 犻 犪 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅
16、 狆 犾 犲狊 犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔 犠 犲 狀犡 犻 犲，犎 狌 犻 狔 犻 狀犇 犻 狀 犵，犑 狌 狀 狔 犪 狀 犵犡 犻，犢 犪 狀犙 犻 犪 狀，犡 犻 犪 狅 犿 犲 犻犆 犺 犲 狀， 犔 犲 犻 犳 犪 狀 犵犎 狌 犪 狀 犵 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犳 狅 狉犲 狀 狋 狉 狔 犲 狓 犻 狋 犻 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅
17、 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲 犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犖 狅 狋 犲：犜 犺 犻 狊犈 狀 犵 犾 犻 狊 犺犞 犲 狉 狊 犻 狅 狀，犪狋 狉 犪 狀 狊 犾 犪 狋 犻 狅 狀犳 狉 狅 犿狋 犺 犲犆 犺 犻 狀 犲 狊 犲狋 犲 狓 狋，犻 狊狊 狅 犾 犲 犾 狔犳 狅 狉犵 狌 犻 犱 犪 狀 犮 犲 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册
18、即可下载 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犿 犪 犮 狉 狅 犾 犻 犱 犲犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀 狉 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犔 犆 犕 犛 犕 犛 犛 犮 狅 狆 犲 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊狅 犳 狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犫 狔犔 犆 犕 犛犕 犛
19、狅 犳 狊 狆 犻 狉 犪 犿 狔 犮 犻 狀，狋 犻 犾 犿 犻 犮 狅 狊 犻 狀，狅 犾 犲 犪 狀 犱 狅 犿 狔 犮 犻 狀，狋 狔 犾 狅 狊 犻 狀，犲 狉 狔 狋 犺 狉 狅 犿 狔 犮 犻 狀，狉 狅 狓 犻 狋 犺 狉 狅 犿 狔 犮 犻 狀，犼 狅 狊 犪 犿 狔 犮 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀狉 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 狆 犻 狉 犪 犿 狔 犮 犻 狀，狋 犻 犾 犿 犻 犮 狅
20、 狊 犻 狀，狅 犾 犲 犪 狀 犱 狅 犿 狔 犮 犻 狀，狋 狔 犾 狅 狊 犻 狀， 犲 狉 狔 狋 犺 狉 狅 犿 狔 犮 犻 狀，狉 狅 狓 犻 狋 犺 狉 狅 犿 狔 犮 犻 狀，犼 狅 狊 犪 犿 狔 犮 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀狉 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔狊 犪 犿 狆 犾 犲 犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲 犕 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾 犻 狊狌 狊 犲 犱狋 狅狆 狉 犲 犮 犻 狆 犻 狋 犪 狋 犲狆 狉 狅 狋 犲 犻 狀 犜 犺 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀犻 狊犱 犻 犾 狌 狋 犲 犱狑 犻 狋 犺狊 狅 犱 犻 狌 犿犱
21、 犻 犺 狔 犱 狉 狅 犵 犲 狀狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋 犲 犫 狌 犳 犳 犲 狉，犪 狀 犱犮 犾 犲 犪 狀 犲 犱狌 狆 狑 犻 狋 犺犆 犮 狅 犾 狌 犿 狀 犉 犻 狀 犪 犾 犾 狔犻 狋犻 狊犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犲 犱犫 狔犔 犆 犕 犛犕 犛 犈 狓 狋 犲 狉 狀 犪 犾狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犿 犲 狋 犺 狅 犱 犻 狊狌 狊 犲 犱 犚 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犿 犪 狋 犲 狉 犻 犪 犾 狊 犝 狀 犾 犲 狊 狊狅 狋 犺 犲 狉 狑 犻 狊 犲狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 犱，犪 犾 犾 狋 犺 犲狉 犲 犪 犵
22、犲 狀 狋狌 狊 犲 犱狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 犵 狉 犪 犱 犲， “狑 犪 狋 犲 狉”犻 狊犱 狅 狌 犫 犾 犲犱 犻 狊 狋 犻 犾 犾 犲 犱 狑 犪 狋 犲 狉 犃 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犕 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犉 狅 狉 犿 犻 犮犪 犮 犻 犱：犎 犘 犔 犆犵 狉 犪 犱 犲 犛 狅 犱 犻 狌 犿犺 狔 犱 狉 狅 狓 犻 犱 犲 犛 狅 犱 犻 狌 犿犱 犻 犺 狔 犱 狉 狅 犵 犲 狀狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋 犲 犿 狅
23、 犾 犔犖 犪 犗 犎狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀： 犇 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲犵狊 狅 犱 犻 狌 犿犺 狔 犱 狉 狅 狓 犻 犱 犲 犻 狀犔狑 犪 狋 犲 狉 犕 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾狑 犪 狋 犲 狉狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀：犕 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾 狑 犪 狋 犲 狉（，犞犞） 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犛 狅 犱 犻 狌 犿犱 犻 犺 狔 犱 狉 狅 犵 犲 狀狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋
24、犲犫 狌 犳 犳 犲 狉：犇 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲 犵狊 狅 犱 犻 狌 犿犱 犻 犺 狔 犱 狉 狅 犵 犲 狀狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋 犲 犻 狀 犿 犔 狑 犪 狋 犲 狉，犪 犱 犼 狌 狊 狋 狋 狅狆 犎 狑 犻 狋 犺 犿 狅 犾 犔狊 狅 犱 犻 狌 犿犺 狔 犱 狉 狅 狓 犻 犱 犲 犛 狆 犻 狉 犪 犿 狔 犮 犻 狀，狋 犻 犾 犿 犻 犮 狅 狊 犻 狀，狅 犾 犲 犪 狀 犱 狅 犿 狔 犮 犻 狀（狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋 犲狊 犪 犾 狋） ，狋 狔 犾 狅 狊 犻 狀（狋 犪 狉 狋 狉 犪 狋 犲狊 犪 犾 狋） ，犲 狉 狔 狋 犺 狉
25、 狅 犿 狔 犮 犻 狀， 狉 狅 狓 犻 狋 犺 狉 狅 犿 狔 犮 犻 狀，犼 狅 狊 犪 犿 狔 犮 犻 狀：狆 狌 狉 犻 狋 狔 犛 犲 犲狋 犪 犫 犾 犲犃 犻 狀犪 狀 狀 犲 狓犃 犛 狋 狅 犮 犽狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀狅 犳 狊 犲 狏 犲 狀犿 犪 犮 狉 狅 犾 犻 犱 犲犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊：犪 犮 犮 狌 狉 犪 狋 犲 犾 狔狑 犲 犻 犵 犺犪 狆 狆 狉 狅 狆 狉 犻 犪 狋 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 （ ） ，犱 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲狑 犻 狋 犺犿 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾 犻
26、 狀 犱 犻 狏 犻 犱 狌 犪 犾 犾 狔，狋 犺 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊 犻 狊 犵 犿 犔 犐 狋狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲 狊 狋 狅 狉 犲 犱犪 狋犻 狀狉 犲 犳 狉 犻 犵 犲 狉 犪 狋 狅 狉 犛 狋 狅 犮 犽狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狊狊 狋 犪 犫 犾 犲犳 狅 狉 犿 狅 狀 狋 犺 狊 犆 犪 犾 犻 犫 狉 犪 狋 犻 狅 狀犮 狌 狉 狏 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 狅 狉 犽 犻 狀 犵狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊：犠狅 狉 犽 犻
27、狀 犵狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊狑 犲 狉 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲 犱 犻 狀犿 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾 犪 狋 犳 犻 狏 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀犾 犲 狏 犲 犾 狊， 狀 犵犿 犔、 狀 犵 犿 犔、 狀 犵犿 犔、 狀 犵犿 犔、 犵 犿 犔 犐 狋犻 狊狊 犪 犿 犲犪 狊 犵 犽 犵 ， 犵 犽 犵 ， 犵 犽 犵 ， 犵 犽 犵 ， 犵 犽 犵狊 犲 狏 犲 狀犿 犪 犮 狉 狅 犾 犻 犱 犲犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊 犻 狀狊 犪 犿 狆 犾 犲 犆 犮 狅 犾 狌 犿 狀： 犿 犵，狅 狉 犲 狇 狌 犻 狏
28、犪 犾 犲 狀 狋 犐 狋 犻 狊犮 狅 狀 犱 犻 狋 犻 狅 狀 犲 犱狑 犻 狋 犺犿 犔犿 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾 犳 狅 犾 犾 狅 狑 犲 犱犫 狔犿 犔狑 犪 狋 犲 狉 犃 狆 狆 犪 狉 犪 狋 狌 狊犪 狀 犱犲 狇 狌 犻 狆 犿 犲 狀 狋 犔 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 犺 狔狑 犻 狋 犺犲 犾 犲 犮 狋 狉 狅 狊 狆 狉 犪 狔 犻 狅 狀 犻 狕 犪 狋 犻 狅 狀犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔 犚 狅 狋 犪 狉 狔狏 犪 犮 狌 狌 犿犲 狏 犪 狆 狅 狉 犪 狋 狅 狉 犛 犘 犈
29、犌犆 狅 犾 狌 犿 狀犘 狉 狅 犮 犲 狊 狊 狅 狉 犎 犻 犵 犺狊 狆 犲 犲 犱犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲： 狉犿 犻 狀 狆 犎犿 犲 狋 犲 狉 犞 狅 狉 狋 犲 狓犿 犻 狓 犲 狉 犖 犻 狋 狉 狅 犵 犲 狀犲 狏 犪 狆 狅 狉 犪 狋 狅 狉 犘 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犲 狊 狋狊 犪 犿 狆 犾 犲 犚 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔 犻 狊犪 犫 狅 狌 狋 犵 犜 犺 犲狊 犪 犿 狆 犾 犲 犻 狊犿 犲 犾 狋 犲 犱狌 狀 犱 犲 狉 狉 狅 狅 犿狋 犲 犿 狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲 犓 犲 犲 狆狋
30、 犺 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲 犻 狀 狋 狅狋 狑 狅狊 犪 犿 狆 犾 犲犫 狅 狋 狋 犾 犲 狊，狊 犲 犪 犾犪 狀 犱犾 犪 犫 犲 犾 犜 犺 犲狋 犲 狊 狋狊 犪 犿 狆 犾 犲犻 狊狊 狋 狅 狉 犲 犱犪 狋狉 狅 狅 犿狋 犲 犿 狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲 犜 犺 犲狉 犲 狊 狋 狊 犪 犿 狆 犾 犲 犻 狊狊 狋 狅 狉 犲 犱 犻 狀 狉 犲 犳 狉 犻 犵 犲 狉 犪 狋 狅 狉 犐 狀狋 犺 犲犮 狅 狌 狉 狊 犲狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀，狆 狉 犲 犮 犪 狌 狋 犻 狅
31、狀 狊犿 狌 狊 狋犫 犲狋 犪 犽 犲 狀狋 狅犪 狏 狅 犻 犱犮 狅 狀 狋 犪 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 狉犪 狀 狔犳 犪 犮 狋 狅 狉 狊，狑 犺 犻 犮 犺犿 犪 狔犮 犪 狌 狊 犲狋 犺 犲犮 犺 犪 狀 犵 犲狅 犳 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犃 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 犘 狉 狅 犮 犲 犱 狌 狉 犲 犈 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻
32、 狅 狀 犠犲 犻 犵 犺犵狅 犳 狋 犺 犲 狋 犲 狊 狋 狊 犪 犿 狆 犾 犲（犪 犮 犮 狌 狉 犪 狋 犲 狋 狅 犵）犻 狀 狋 狅犪 犿 犔犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲 狋 狌 犫 犲 犃 犱 犱犿 犔狑 犪 狋 犲 狉 犪 狀 犱 犿 犻 狓犻 狋 犛 狌 狆 狆 犾 犲 犿 犲 狀 狋 狋 狅 犿 犔狑 犻 狋 犺犿 犲 狋 犺 狅 狀 犪 犾 犞 狅 狉 狋 犲 狓犳 狅 狉犿 犻 狀狌 狀 犱 犲 狉 狉犿 犻 狀，犮 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲犳 狅 狉 犿 犻 狀狌 狀 犱 犲 狉 狉犿 犻 狀犳 犻 犾 狋 犲 狉 狋 犺 犲狌 狆 狆 犲 狉
33、犾 犪 狔 犲 狉 犜 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 犿 犔犳 犻 犾 狋 狉 犪 狋 犲 犻 狀 狋 狅犪犮 犾 犲 犪 狀犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀 犲 狉 犃 犱 犱 犿 犔狊 狅 犱 犻 狌 犿犱 犻 犺 狔 犱 狉 狅 犵 犲 狀狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋 犲犫 狌 犳 犳 犲 狉（ ） ，犪 狀 犱犿 犻 狓狋 犺 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犆 犾 犲 犪 狀狌 狆 犜 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 狋 犺 犲犪 犫 狅 狏 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狀 狋 狅狋 犺 犲犆 犮 狅 犾 狌 犿 狀（ ） ，狉 犻 狀 狊 犲狋 犺 犲犳 犾 犪 狊 犽犪 狀 犱
34、犆 犮 狅 犾 狌 犿 狀狑 犻 狋 犺犿 犔狑 犪 狋 犲 狉犪 狀 犱犳 狅 犾 犾 狅 狑 犲 犱犫 狔犿 犔犿 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾狑 犪 狋 犲 狉 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀（ ） ，犱 犻 狊 犮 犪 狉 犱狋 犺 犲犲 犾 狌 犪 狋 犲 犜 犺 犲犮 犪 狉 狋 狉 犻 犱 犵 犲 犻 狊犲 狏 犪 犮 狌 犪 狋 犲 犱犮 狅 狀 狋 犻 狀 狌 狅 狌 狊 犾 狔 狋 狅“犱 狉 狔 狀 犲 狊 狊”狌 狀 犱 犲 狉 狏 犪 犮 狌 狌 犿 犈 犾 狌 狋 犲 狋 犺 犲犮 狅 犾 狌 犿 狀狑 犻 狋 犺犿 犔犿 犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾，犳 犾 狅 狑狉
35、 犪 狋 犲 犻 狊 犿 犔 犿 犻 狀 犿 犔犿 犻 狀，犮 狅 犾 犾 犲 犮 狋犲 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犲犪 犫 狅 狏 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狊狌 狀 犱 犲 狉 犪犵 犲 狀 狋 犾 犲狊 狋 狉 犲 犪 犿狅 犳狀 犻 狋 狉 狅 犵 犲 狀犵 犪 狊 狋 狅犿 犔 犪 狋 犃 犱 犼 狌 狊 狋狏 狅 犾 狌 犿 犲狅 犳犲 犾 狌 犪 狋 犲狋 狅 犿 犔狑 犻 狋 犺狑 犪 狋 犲 狉 犜 犺 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狊狆 犪 狊 狊 犲 犱狋 犺 狉 狅 狌 犵 犺 犿犳 犻 犾 狋 犲 狉 犐 狋 犻 狊狉 犲 犪 犱 狔犳 狅
36、狉犔 犆 犕 犛犕 犛犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犔 犆 犕 犛犕 犛狅 狆 犲 狉 犪 狋 犻 狀 犵犮 狅 狀 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊 犪） 犆 狅 犾 狌 犿 狀：犆，犿， 犿犿 犿犿（犻 犱） ，狅 狉 狋 犺 犲犲 狇 狌 犻 狏 犪 犾 犲 狀 狋； 犫） 犕 狅 犫 犻 犾 犲狆 犺 犪 狊 犲：狋 犪 犫 犾 犲； 犜 犪 犫 犾 犲犌 狉 犪 犱 犻 犲 狀 狋狅 犳犿 狅 犫 犻 犾 犲狆 犺 犪 狊 犲 犜 犻 犿 犲犿 犻 狀犪 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲 犳 狅 狉 犿 犻
37、 犮犪 犮 犻 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犮） 犉 犾 狅 狑狉 犪 狋 犲： 犔犿 犻 狀； 犱） 犐 狀 犼 犲 犮 狋 犻 狅 狀狏 狅 犾 狌 犿 犲： 犔； 犲） 犛 狅 狌 狉 犮 犲：犈 犛 犐； 犛 犖犜 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犳） 犘 狅 犾 犪 狉 犻 狋 狔：犘 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲； 犵） 犕 狅 犱 犲：犕 狌 犾 狋 犻 狆 犾 犲狉 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀犿 狅 狀 犻 狋 狅 狉 犻 狀 犵； 犺） 犆 犪 狉 狉 犻 犲 狉犵 犪 狊：犖 犻 狋 狉 狅 犵 犲 狀（狆 狌 狉 犻 狋 狔 ） 犐 狀 狊 狋 狉 狌 犿 犲 狀 狋 犪 犾狊 犲 狋 狋 犻 狀 犵 狊 犿 犪 狔犫 犲狅 狆 狋 犻 犿 犻 狕 犲 犱犛 犲 犲 狋 犪 犫 犾 犲犅 犻 狀犪 狀 狀 犲 狓犅； 犻） 犜 狉 犪 狀 狊 犻 狋 犻 狅 狀 狊（犿狕） ：犛 狆 犻 狉 犪 犿 狔 犮 犻 狀 （狇 狌 犪 狀 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀） ，