三七多糖对小鼠免疫功能调节的研究.pdf

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1、 l O江苏预防医学2 0 0 7 年9 月第1 8 卷第3 期J ia n g s u J P r e v Me d , S e p , 2 0 0 7 , V o l.1 8 , N o . 3 其中 过敏性皮疹多于接种后十余小时至数十小时内 出现田。本组病例均在M V接种后8 一12d 开始出 疹, 这可能与MV本身固有的生物学性状有关。 MV是一种减毒活疫苗, 接种后人体产生类似一种 轻度的感染田, 疫苗中的病毒株在体内繁殖需要一 定时间, 经过数天的“ 潜伏期” 后才出现临床症状, 显 然比 过敏性皮疹出现的时间要晚。 本组病例虽然较 自 然感染的麻疹病情为轻, 但出疹顺序一致, 疹

2、退后 皮肤亦留有不同程度色素沉着, 临床上难以区分。 本组初免MV儿童使用不同批号、 不同产地的 M V均发生了R FIS , 说明发病并非由于MV质量引 起。随着M V的多年使用, 人群受自 然感染麻疹的 机会大大减少, 婴儿获得的胎传抗体水平下降网。 尽管近年来MV接种剂量已经减少, 但个别儿童仍 有可能发生MV相关病例。另外, 本次监测发现 4 周岁儿童加强接种M V和18月龄以上MV追加免 疫儿童未出现病例, 这与初免接种过 MV后体内已 经存在麻疹抗体有关。从对 MV初免前的0 岁组 儿童和MV初免后的 1 岁组和 3 岁组儿童的麻疹 抗体监测结果, 也足以证明婴幼儿胎传麻疹抗体水

3、平低下时接种MV就易出现R FIS , 这一点提示小儿 MV接种年龄是否应该提前。 一般认为感染麻疹后可获得终生免疫, 接种 M V后发生了R FIS 病例类似自 然感染麻疹, 是否亦 可获得持久性免疫力, 有待进一步探讨。 参考文献 徐爱强, 许青, 宋立志, 等. 接种麻疹疫苗后发热出疹性病例的 流行病学调查 J .中华流行病学杂志, 2 。 。 4 , 2 5 ( 5 ) : 4 1 7 - 4 2 0 . 刁 连东. 麻疹匡 M . 上海: 上海科学技术出版社, 2 0 o 1 : 2 2 。 - 2 2 2 . 谢广中. 免疫接种的反应和处理 M上海: 上海科学技术出 版社, 2 0

4、 0 1 : 2 3 1 一 2 3 3 . 贾水普. 接种麻疹疫苗后又患麻疹182 例的流行病学分析 J . 职业与健康, 2 0 0 4 , 2 0 ( 7 ) : 6 9 一 7 0 . 蒋卫平, 王跃进. 丹阳市健康人群麻疹抗体水平分析 J . 江苏 预防医学, 2 0 0 6 , 1 7 ( 2 ) : 4 一 5 . |日| 0曰八j 尸ILLL |曰|日 J4伙 厂厂1 口到 扮著 三七多糖对小鼠免疫功能调节的研究 陈新霞, 顾呈华, 杨明晶, 吕中明, 陆罗定 ( 江苏省疾病预防控制中心, 江苏 南京2 1 0 0 0 9) 【 摘 要】 目 的: 研究三七多糖对小鼠 免疫功能

5、的调节作用。 方法: 实验分别以1 00、 2 00、 6 00 mg/kg B W剂量的三七多糖给小鼠连续灌胃30d , 测定各项免疫指标。 结果: 三七多糖能促进小鼠的 脾淋巴细胞增殖转化作用, 促进小鼠的迟发性变态反应, 提高小鼠的抗体生成细胞能力, 增强小鼠的 N K细胞活性作用。 结论: 三七多糖具有增强免疫功能的作用。 【关 键 词 】 三七多糖; 免疫功能; 小鼠 【 中图分类号】 R 一3 3 文献标识码】 A 文章编号 1 0 0 6 一9 0 7 0 ( 2 0 0 7 ) 0 3 一0 0 1 0 一0 3 S l u d y o nt h e i nnn uno r 雌

6、 贝 l a t i on e f l e c t o f P a nax not Ogi nse ng po1 y s a c cha r i d eSo n Iulce C HE NX in一x ia, G UChe n g 一h ua八 几 八 N G叭n g 一ji n g , L V Zho n g 一m in g , L UL u 口 一din g ( J i a n g s u P ro v i n c e Cen t e r for D i s eas e P re ve n t i o n a n dCon t ro l , N 口 勺i n g2 1 0 0 0 9 , C

7、hi n a ) A 加 t ract O bj e c t i v e : T o s t u d y t h e imm u n o r e g u 1 a t i o ne f f e c t o f P a n a x not o g in s e n gp o 1 y s a c c h a - r i d e s o n m i c e . Me t h o d s : A f t e r c o n t i n u o u s a d m i n i s t r a t i o n o f P a n a x n o t o g i n s e 眼 p o l y s a c c

8、 h a r i d e s f o r 3 o d a y s w i t ht h e d o s e s o f l O O , Z O Oa n d6 0 01l l g / k gB W, w e m e a s u r e di 二 u n o l o g i c a l i n d e x e s .R e s u l t : P r o l i f e r a t i o n a n d t r a n s fo rma t i o n o f s p l e e n 1 y I l 1 p h o c y t e s i nt h e m i c e w e r e i n

9、c r e a s e d , d e l a y e d a n a P h y l a c - t i c r e a c t i o nw a s i n t e n s i f i e d , t h e n u m b e r o f a n t i b o d 犷 p r o d u c i 飞 c e l l s a n d t h e c y t o a c t i v e o f N Kc e l l wer e a l s o in c r e a s e d . C o n c l u s io n : P a n a x n o t o g i n s e n g p

10、o l y s a c c h a r id e s c a n s t r e 飞t h e n t h e irnm u n e f u n c t i o n o f 收稿日 期 作者简介 2 0 0 7 一0 6 一0 8 陈新霞( 1 9 6 8 一) , 女, 江苏泰兴人, 副主任技师。 万方数据 江苏预防医学2 0 0 7 年9 月第 1 8 卷第3 期J ia 飞s u J P r e v Me d , S e p , 2 0 0 7 , V o l.1 8 , N o . 3 1 1 【 K e y W0 r ds P a n a x n o t o g i n s e 眼

11、p o l y s a c c h a r i d e s ; im m u n e f u n c t i o n ; m i c e 三七( P a n a x n o t o g i n s e n g ) 盛产于中国云南、 广 西等地, 资源丰富, 是我国传统名贵中药材, 具有活 血化痕、 消肿定痛的功效, 目 前大多用于冠心病, 心 绞痛等心血管系统疾病的防治川。迄今为止, 我国 学者已对三七中的化学成分进行了较为系统的研 究, 从三七中分离到皂昔、 黄酮、 多糖等多种活性成 分圈。 其中关于皂昔的化学和药理作用有较多报 道, 其他成分的研究则较少, 本实验对三七多糖的免 疫调节功能

12、进行了研究, 为三七多糖的开发运用提 供科学依据。 1 材料与方法 1 . 1 材料三七多糖: 云南特安呐制药股份有限公 司提供。实验动物: 18一229 健康雌性ICR清洁级 小鼠2 00只, 上海斯莱克实验动物有限公司提供。 主要试剂: R P Ml l 6 4 O细胞培养液、 Y A C 一1 细胞、 2 一琉基乙醇(2一ME ) 、 刀豆蛋白A( C o n A) 、 MT T 、 H a n k S 液、 P B S 缓冲液( p H 7 . 2 一7 . 4 ) 、 2 , 4 一二硝 基氟苯( D N F B ) 、 绵羊红细胞( S R B C ) 、 补体( 豚鼠血 清) 、

13、 SA 缓冲液、 都氏 试剂、 印 度墨汁、 乳酸锉、 硝基氯 化四氮哇( I N I , ) 、 吩嗦二甲醋硫酸盐( P M S ) 、 N A D 、 0 . Z mol / L 的Tris 一H CI缓冲液( p H S . 2 ) 、 2 . 5 % Trit o n 等。 主要仪器: 酶标仪( Bi o R A I 粥 80) 、 二氧化 碳培养箱( The rmo Forma ) 、 7 23分光光度计等。 1 . 2 方法 ( 1)分组: 三七多糖成人( 60k g 体重计) 每日 推 荐摄人量为1 2 0 0 m g , 相当于Z O m g / k g b . w t . /

14、 d , 实验按小鼠 的 等效剂量分设100 、 200 和600 m g / k g b . w t . /d三个剂量组, 实验样品加双蒸水配制, 对照 组给予双蒸水灌胃。2 00 只小鼠随机分 5 批, 每批 小鼠按体重随机分为 4 组( 高、 中、 低剂量组, 对照 组) , 每组10只。连续灌胃30d 后测各项指标。 ( 2)试验: 按照卫生部 保健食品检验与评价技 术规范 ( 2 0 0 3 版户 , 进行 C onA诱导的小鼠脾淋 巴细胞转化实验( MT T法) 和二硝基氟苯( D N F B) 诱导的小鼠迟发性变态反应( 1 ) T H) ; 抗体生成细胞 检测(J er n e

15、 改良玻片法) 和血清溶血素试验; 小鼠碳 廓清试验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 ( 滴片法) ; N K细胞活性测定实验。 ( 3)指标: 主要观察脾脏/ 体重比值和胸腺/ 体重 比 值, 脾淋巴 细胞转化光密度差值, 耳廓肿胀度, 空斑 数, 血清半数溶血值( H Q 。 ) , 吞噬指数a , 单核一巨噬 细胞吞噬百分率和吞噬指数, N K细胞活性等。 ( 4) 统计学分析: 所有实验数据采用S P S Sll . 5 软件进行统计学处理, 采用方差分析及秩和检验进 行统计。 2 结果 2 . 1 对体重和脏器/ 体重比值的影响各剂量组小 鼠实验前后体重增长、 小鼠脾脏/ 体重比

16、值和胸腺/ 体重比 值与溶剂对照组相比均无显著性差异( P 0 . 05) , 表明三七多糖对小鼠体重增长及脏器/ 体重 比 值的影响不明显。 2 . 2 细胞免疫功能试验M T T法各剂量组光密 度差值均高于溶剂对照组值, 中剂量组有显著性差 异( 尸 0 . 0 5 0 . 0 5 1 5 . 0 6 士3 . 1 2 1 9 。 3 5 士3 . 3 9 1 9 . 4 2 士2 . 8 1 2 0 . 9 1 士4 4 0 0 . 0 5 ) , 提示三七多糖颗 粒无增强小鼠 产生血清溶血素的能力。 见表2 。 2 . 4 单核一 巨 噬细胞吞噬功能试验小鼠 碳廓清试 万方数据 1 2

17、 江苏预防医学2 0 0 7 年9 月第1 8 卷第3 期J i a n 只 s u J P r e v Me d , S e p , 2 0 0 7 , V o l .1 8 , N o . 3 验各剂量组小鼠的吞噬指数 a 与溶剂对照组值相 比, 无统计学差异( 尸 。 . 05) , 提示三七多糖颗粒无 增强小鼠 碳廓清能力的作用。小鼠腹腔巨噬细胞吞 噬鸡红细胞, 各剂量组小鼠的单核一 巨噬细胞吞噬百 分率和吞噬指数均高于溶剂对照组相应值, 但无统 计学差异( 尸 0 . 05) , 提示三七多糖颗粒无增强小 鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的作用。 见表3 。 2 . S N K细胞活性测定 各

18、剂量组小鼠的N K细 胞活性高于溶剂对照组值, 中、 高剂量组有统计学显 著性差异( 尸 0 . 0 5 0 . 0 5 0 . 0 5 lllllC口 llCX八h ,土n乙111 表3 单核一 巨噬细胞功能试验结果( 二 士、 . 。 =1 0 ) ) 组别 对照组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 吞噬率( %)尸吞噬指数K值 : : . 0 士3 . 4 : 0 . 0 5 0 . 0 5 0 . 0 5 0 . 1 3 4 士0 . 0 4 5 0 . 1 5 7 士0 . 0 6 6 0 . 1 8 3 士0 . 0 5 1 0 . 1 3 7 士0 . 0 3 2 0 . 0 5 0

19、 . 0 5 ) 0 . 0 5 0 . 0 4 7 5 士0 . 0 0 6 0 . 0 5 2 2 士0 . 0 0 7 0 . 0 5 2 5 士0 . 0 0 9 0 . 0 4 8 3 士0 . 0 0 6 吞噬指数 a 6 . 4 8 6 士0 . 3 7 6 . 5 0 2 士0 . 4 2 6 . 5 3 4 士0 . 5 3 6 . 7 8 3 士0 . 8 7 0 . 0 5 0 . 0 5 0 . 0 5 十-+-+一 门了n只 表4N K细胞活性试验结果 x 士、 , 、 =1 0 ) ) 组别 对照组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 N K细胞活性( %) 4 1 .

20、3 士2 5 . 2 4 5 . 4 士2 8 . 0 7 3 . 1 士2 1 . 7 8 0 . 1 士2 38 0 . 0 5 0 . 0 1 0 . 0 1 3 讨论 本次实验从细胞免疫、 体液免疫、 单核一巨噬细 胞吞噬功能和N K细胞活性等4 个方面, 对三七多 糖的免疫功能的调节作用进行了研究。结果表明: 三七多糖剂量在20o m g /kg b . w t . 时具有增强小鼠 淋巴 细 胞增殖能力; 在2 o 0 、 6 o o m g / k g b . w . t 时, 可增强小鼠 N K细胞活性的作用; 在 1 00、 2 00 和 60 0 mg/ k g b . wt

21、. 时可增强1 ) N F I 3 引起的小鼠 迟发 性变态反应及增强小鼠产生抗体生成细胞的能力。 依据卫生部 保健食品检验与评价技术规范 ( 2 0 0 3 版) 评价标准, 三七多糖具有增强免疫力的功能。 三七为五加科多年生草本植物, 中医认为三七 具有活血化寮、 消肿止痛、 止血等功能, 现代研究表 明三七的化学成分主要为三七皂昔、 黄酮、 氨基酸、 多糖类等有效成分, 对三七的药理研究发现其具有 抗衰老、 消炎、 降血糖、 保肝等作用。多糖是一类天 然大分子物质, 广泛存在于动物、 植物和微生物细胞 中, 是构成生命的四大基本物质之一。多糖参与了 细胞的各项生命活动的调节, 如免疫细胞

22、间信息的 传递。 大量研究表明, 多糖类化合物是一种良 好的 免疫调节剂。中药多糖的免疫调节作用作为多糖研 究的一个热点, 近年来取得很大的进展。中药多糖 的免疫调节作用表现在能活化巨噬细胞, 促进淋巴 细胞的有丝分裂作用, 增强N K细胞与L A K细胞 活性, 增强T细胞功能, 诱生细胞因子, 调节神经内 分泌免疫网络等方面叫。由传统中药三七经脱脂提 取、 沉淀、 离子交换层析和凝胶过滤层析得到三七多 糖, 近年来, 通过对三七多糖的药理研究, 发现三七 多糖具有增强免疫功能等活性困。本结果与这些报 道相一致。 对中药多糖免疫调节作用的研究, 现由初步观 察深人到作用机理及其影响因素的研究

23、, 这将有助 于阐明多糖的生物学活性及对中医药理论的深入认 识, 并指导中 药多糖作为新兴免疫调节剂的开发研 究与临床运用。 参考文献 1 魏均娴, 杜元冲. 三七现代科学研究及应用 M口 . 昆明: 云 南科技出版社, 1 9 9 6 : 2 4 8 一 4 2 6 . 2 郑光植, 杨崇仁.三七生物学及其应用 M . 北京: 科学出版 社, 1 9 9 4 : 9 一 3 6 . 3 中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范 M 北京: 人民 卫生出版社, 2 003 : 4 , 2 2 一 34. 4 何燕, 吴雄志. 中药多糖的免疫调节作用 J . 四 川中医, 2 O 01, 1 9 ( 2 ) : 1 5 一 1 7 . 5 G a o H , wa n g F , L i e n EJ, T r o u s d a l e MI .l m m u n o s t i m u l a t i n g p o l yS a c c h a r i d e Sf r o mP a n a xn o t o g i n s e n g J 口 .P h a r m R e s , 1 9 9 6 , 1 3 ( 8 ) : 11 9 6 . 万方数据

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