人工合成成骨生长肽对正常小鼠造血的促进作用和体外造血活性测定.pdf

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1、人工合成成骨生长肽对正常小鼠造血 的促进作用和体外造血活性测定 陈红红施德源!邵云潮!罗伟华陈统一!崔大敷“程文英 (复旦大学放射医学研究所、 !附属中山医院骨科, 上海 “#$“) 中国图书分类号% 0F:9; 程文英, 女, +M 岁, 研究员, 博士生导师 Q0%N 等 -研究报道, ./01 能刺激 正常小鼠的骨髓有核细胞和外周血白细胞数增加。 ./01 是否直接作用于造血干祖细胞促进其增殖以 及对人骨髓细胞的作用效果, 国内外还未见报道。 本文通过观察国内合成的 /01 对正常小鼠造血系 统的作用和对小鼠骨髓粒系祖细胞集落形成的影 响, 初步探索 ./01 促造血活性的作用环节, 并

2、进一 步观察 ./01 对体外培养人骨髓粒系祖细胞增殖作 用的影响, 研究 ./01 在促进体外扩增造血干祖细 胞应用中的可能性, 并可作为检测 ./01 生物活性 的方法, 具有直观、 简便的优点。 !材料和方法 !“!药品与试剂./01 由中科院上海生化所合成 提供, 分子量为! M“$M, 用生理盐水配成所需浓 AB9;“WXW? JD2 Y11I EDEKEAB2 MU ED J F:DFBDA=JAE:DU GJ. U=AB= EDEKEAB2 K WXW? := Y11I JAB= AB 9JE9J; EDEKEAE:D K ?L_5(+$+M ?L_5(+$+M J;.: U=A

3、B= EDEKEAB2 AB 4J“ ZED;U GEF J2 KBBD EDEKEAB2 K WXW? := Y11I #$%#U ED FU;AU=B2 =JKKEA KJ.E;J= J=AB= .9:A 9U.F;B FB;. E. =B;JAB2 A: D:DU2B. 4%,4 JD2 D:D8FJDDB; E. =B;JAB2 A: AE. 4J“ ZED;U !“# $%J= J=AB=;.9:A 9U.F;B FB;.; 4J“ ZFJDDB;.;F;:=E2B FJDDB; K;:FaB=.;M0! ? $% 6, 5% 只, 由上海计划生育研究所动物部提供。8,AB C 小鼠

4、, !, 体重 ! ? $% 6, 由本校动物部提供。 !“$骨髓细胞来源小鼠采用清洁级 8,ABC 品系, !, DE 龄。人骨髓取自外科手术摘除的正常 人新鲜肋骨、 髂骨等。 !“%实验分组、 给药方法和观察指标采用清洁级 ;1) 小鼠, !, 体重 ! ? $% 6, 随机分成 7 组, 每组 !$ 只。F 组: 空白对照组, 皮下注射内含 !“人血清白 蛋白的生理盐水; 8、 1、 G 组为 H=/9 用药组, 分为 !, 5, $5 IJK, E6# ! L # ! + 种不同剂量。小鼠连续皮下 注射 H=/9 !7 L, 检测以下指标: “外周血象: 小鼠眼 眶取血 $%!,, 稀

5、释后计数 M81, 9,N, )81;#8:*1 数, 取单侧股骨, 用 5 J, 白细胞稀释液冲出骨髓细 胞, 7 号针头过滤, 稀释后计数有核细胞数;$骨髓 细胞分类计数, 小鼠经戊巴比妥钠麻醉后取单侧股 骨作骨髓涂片, /OJH 染色, 镜检。%胸腺系数, 为 胸腺重量B体重的比值。 !“0!个(# !, 不同浓度的 H=/9 ! Q !%# !7? ! Q !%# 5JK, (# !, 培养 体系终体积为 7 J,, 实验分为 + 组, 即阴性对照组 (不含 H=/9 和 /0123) 、 -./0123 阳性对照组和 H=/9 实验组, 其中 H=/9 试验组设置数个药物浓度梯度,

6、每一浓度均重复 + ? 7 皿。5“ 1=$饱和湿度, +4, 57433=5=486 =8 C=54 /-KUV G-U6 LKHW BIJK, E6# ! L # ! “ M81H B Q !%X ( # ! 9,NH B Q !%X ( # ! )81H B Q !%!$ ( # ! *8:*1 B Q !%4 YWJU-# ! R.ZJUH CKWYYOCOWIN B Q !%# + 1KIN-K,$7! %4!+!%5 $%!%X %+!$X %!%$4 %!X H=/9!$! %7#7% ? !+5b! %4$! +S ! H=/95 %4$% 77B?5 - ,./ 8123 4

7、/ ,时的集落数约为 0. 个, 两者效果相 近似。 !“# 8%!123 4 / ,浓度的 $%、 6 B123 C:/ , D / , ,0 D 后, 使外周血白细胞数均明显升 高, 红细胞和血小板也有升高趋势, 骨髓有核细胞数 明显增加, 骨髓细胞分类计数显示, $%?(A7- B !“ #$C DE*E%EA7 !“ #$. Q;1,?(A7- B !“ #$C T?(A7- B !“ #$. 21%JE1(?ABC1234 (,, O, 0O %;1EAE- 1H &;HE -7;(K RA R?AEE% H%1EH?;JE -7K1C A3IPT F71 ?1E- 71 G1;I

8、;JE H%A(C 6%E GEA7( 8(- HE( H?%1 FEAE 7117KE-CVE -;RREAE%;7( HE( H?%1 ;% RE%* E11 FEAE GEARA% 8%E HE 7%- K ;% %AHE FEAE 1;*%;R;I H7%(K E%7%HE-, *A7%?(HKG;E1;18E;%*-&;%7%C E% 1234 F71 ;%_EHE- 7 E -1E R O, 0O %JE(KCVEH(%KIRA&;%*I?%;I*A7%?(HKE (PI 3);% %E 7%- ?*%;R;H7%(K ;%HAE71E- 8K , ,!+ ,N$ , ,!+ O% 3IPT AE7E- %E1 ;% 1;&;(7A H%HE%A7;%C GAHGFEC=AH1234 E1;1,7%- 7 G11;8(E A(E % E%7%H;%* E AE1A7;% R 8%E K 7REA A7-;I 7%-5A HEH 1E*E%;H *AF GEG;-E; EE1;1;PI3 09%1;?E R 6;HE&;1AK 7%- PE( 6;(*K,P;%E1E BH7-EE%HE1, T7%*7;0!#, 0L中国药理学通报70+&!9! E0#*:#)($(,+)#$ 25$!“+&0!# W7%; !I (,)

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