吡格列酮对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞肥大的影响.pdf

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1、8 1 8 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 4 J u l ; 2 0 ( 7 ) ; 8 1 8 - 2 1 毗格列酮对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞肥大的影响 周庆峰， 王洪新， 王怡薇， 单丹， 符丽娟 ( 锦州医学院药理学 教研室， 辽宁饰州 1 2 1 0 0 1 ) 中图书分类号:R - 3 3 2 ; R 3 2 2 . 1 1 ; R 3 2 9 . 2 4 ; R 3 2 9 . 2 5 ; R 5 4 2 . 2 0 5 . 3 ; R 5 8 7 . 1 0 5

2、. 3 ; R 9 7 7 . 1 5 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 1 一 1 9 7 8 ( 2 0 0 4 ) 0 7 一 0 8 1 8 一 0 4 摘要: 目的利用体外培养的乳鼠心肌细胞， 观察毗格列酮 对高浓度葡萄糖与高浓度胰岛素共同诱导的肥大心肌细胞 的影响， 进一步推测毗格列酮对糖尿病并发心肌肥大的可能 作用及作用机制。方法以培养的乳鼠心肌细胞为模型分 组给药后， 用 L o w ry s 法测心肌细胞的蛋白质含量; 用 3 H I l e u c i n e 标记法测定心肌细胞蛋白的合成; 利用计算机图像分 析系统测心肌细胞的体积; 用显微镜目 镜计数心肌细胞搏动

3、 的 频率。 结果 1 0 N .m o l L - 浓度的毗格列酮在对高糖高 胰岛素诱导的肥大心肌细胞的蛋白含量、 蛋白合成及体积均 有显著的抑制作用。其抑制肥大的效果比维拉帕米更为明 显; 同时观察到毗格列酮同维拉帕米一样有抑制心肌细胞搏 动的作用。结论毗格列酮能有效抑制高糖高胰岛素诱导 的心肌细胞肥大。 这种作用可能是通过作用于P P A R ， 来实 现的。 关键词: 毗格列酮; 高糖; 高胰岛素; 心肌细胞肥大 高糖高胰岛素血症在2 型糖尿病并发心肌肥大 的过程中起着关键的作用。我们已发现高血糖直接 参与了 糖尿病并发心肌肥大过程川， 国内洪华山 等 也证明， 高浓度胰岛素可促使培养

4、的心肌细胞 肥大。毗格列酮是唾哇烷二酮类衍生物， 为一种新 型有效的抗糖尿病药物， 已知其通过激活过氧化物 酶 体增 生物激活受 体P P A R y ( p e r o x i s o m e p r o l if e r a t o r a c t i v a t e d r e c e p t o r -y ) 而起胰岛素增敏作用。最新研 究证明， 毗格列酮能通过P P A R ， 抑制内皮素一 1 诱导 的 心肌细胞肥大 。 A s a k a w a 等通过体内 体外实验 证明毗格列酮通过P P A R ， 也可抑制压力负荷所致 的 心肌 肥大4 l 。 但是毗格列酮是否能抑制高糖高

5、 胰岛素所诱导的心肌细胞肥大， 仍未见明确报道。 本实验利用培养的心肌细胞， 在高糖高胰岛素诱导 心肌细胞肥大的基础上观察毗格列酮对肥大心肌细 收稿日 期: 2 0 0 3 一 1 1 一 1 7 ， 修回日 期: 2 0 0 3 - 1 2 - 0 2 作者简介: 周庆峰( 1 9 7 7 一 ) ， 男， 硕士， 研究方向: 心血管药理学， T e l ; 0 4 1 6 -4 5 8 0 0 5 0 , E - m a i l : z h o u g i n g f e n g 7 1 5 y a h o o . c o m . c n ; 王洪新 ( 1 9 6 4一) ， 男， 博士

6、后， 教授， 硕士生导师， T e l ; 0 4 1 6 - 4 5 8 0 2 0 9 , E - m a il ; j y h x w a n g h o t m a i l . c o m 胞的影响， 同时用钙离子拮抗剂维拉帕米进行对比 分析， 进而推测毗格列酮的作用机制。 1 材料与方法 1 . 1 实验动物出生2d的S D大鼠乳鼠， Ya不 拘， 由锦州医学院实验动物中心提供。 1 . 2 药品与试剂 T ry p s i n , S D S , D M E M培养基， 葡 萄糖， 胰岛素， 维拉帕米均为S i g m a 公司产品; 毗格 列酮为天津正元精细化工有限公司产品; 牛

7、血清白 蛋白为北京化学试剂公司产品; 小牛血清为杭州四 季青生物材料研究所产品; 3 H l e u c i n e 为上海原子 核研究所产品; 其它试剂均为分析纯。 1 . 3 体外乳鼠心肌细胞原代培养取出生2d的 S D大鼠乳鼠， 在无菌的条件下， 开胸取出心脏， 用 D - H a n k s 液冲洗3 次后剪成约1 m m 3 大小的碎块， 加人0 . 6 g “ L - 胰蛋白 酶消化细胞， 取消化完毕后 的细胞， 加人体积分数为0 . 1 5的小牛血清， 0 . 8 4的 D M E M培养基， 及0 . 0 1 的双抗液( 含1 x 1 0 5 u L 一 青霉素， 1 0 0

8、m g L 一 链霉素) 的培养基， 吹打均匀 后以1 x 1 0 8 L - 的密度接种于2 4 孔培养板， 送人 通以体积分数为0 . 0 5 C O : 及0 . 9 5 空气的二氧化碳 孵箱中培养。 1 . 4 实验分组及给药方法常规培养心肌细胞4 8 h 后， 换液为无血清的D M E M培养基。将2 4 孔培养 板上的细胞每6 孔分为一组， 共分4 组， 换培养基 的同时给药， 每组给药如下: 第1 组为正常对照组; 第2 组为给予2 5 . 5 m m o l L 一 葡萄糖和1 0 - m o l L 一 胰岛素的高 糖高胰岛素 组; 第3 组为在第2 组基 础 上 加人1 0

9、 L m o l L 一 的 毗 格列酮组 ; 第4 组为 在第2 组基础上 加人浓度为1 FL m o l L 一 的维拉帕 米组 ; 给药4 8 h 后进行各项指标的 测定。 1 . 5 培养心肌细胞蛋白质含f的测定吸去培养 板各孔中的培养液， 用D - H a n k s 液快速冲洗3 次后， 加人1 0 g L 一 S D S ( 十 二烷基硫酸钠) 0 . 5 m l 溶解 细胞， 根据计数， 每孔细胞数约为1 x 1 0 ， 个， L o w ry s 法测每孔细胞蛋白质含量。 1 . 6 培养心肌细胞体积测f通过测量细胞直径 获得。用D - H a n k s 液快速冲洗长满细胞

10、的培养孔3 次， 每 孔加0 . 3 m l l g “ L - 胰蛋白酶， 放人3 7 恒 温箱中1 0 m i n 后， 再加人0 . 2 m l 含有体积分数为 万方数据 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 4 J u t ; 2 0 ( 7 ) 8 1 9 0 . 1 血清的培养基终止消化， 收集细胞注人一细胞 室内， 用计算机 C I A S大恒细胞图像分析系统测量 单个细胞的直径， 进而计算出细胞的体积。每孔随 机选择4个视野， 每个视野测2 0 个细胞。 1 . 7 培养

11、心肌细胞蛋白质合成的测定将生长在 2 4 孔培养板上无血清静止培养了4 8 h的细胞培养 液 倒掉， 代之以 含有3 7 T B q L 一 H l e u c i n e 及各 种 浓度的 试剂。 倒掉培 养 液， 每 孔 加1 m 1 l o g L 一 的S D S 溶解细胞， 用1 m l 0 . 2 k g L - 的三氯醋酸 ( T C A ) 沉淀蛋白， 应用4 9型玻璃纤维滤膜( G F / C ) 过滤， 烘干滤膜， 用液闪仪测量 1 1 l e u c i n e 的结合， 进行蛋白合成的分析。根据计数， 每孔的细胞数大 致为1 x 1 0 3 个， 实验结果以 每孔的c

12、p m值计算。 1 . 8 培养心肌细胞搏动次数的测定将倒置显微 镜置于有机玻璃保温箱内。箱内采用恒温气体对流 装置， 使观测中的培养板始终为3 7 恒温气流所覆 盖。用放大倍数为4 0 0 倍的目 镜镜下观察并计数心 肌细胞的搏动频率。每孔随机选择4个视野， 每个 视野计2 0 个细胞。 1 . 9 统计学处理所有数据均以x 土 表示， 统计 学处理采用t 检验。 2 结果 2 . 1 毗格列酮对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细 胞蛋白含t的影响各组间分别加入不同处理因素 4 8 h 后， 用L o w ry s 法测定每孔细胞的O D值。与正 常对照组相比， 高糖高胰岛素组心肌细胞蛋白含量 增

13、加了2 8 . 3 %, P 0 . 0 1 ， 与高糖高胰岛素组相比， 毗格列酮组的心肌细胞蛋白含量减少了1 7 . 1 % , P 0 . 0 1 ， 差 异有显著性， 表明1 0 t m o l “ L 浓度的 毗格列酮能有效减少肥大心肌细胞的蛋白含量。维 拉帕米组与高糖高胰岛素组相比， 心肌细胞蛋白含 量减少了6 . 6 %, P 0 . 0 5 ， 差异亦有显著性。与维 拉帕米组相比， 毗格列酮组的蛋白含量减少， P 0 . 0 1 。见 T a b 1 。 2 . 2 毗格列酮对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细 胞体积的影响同上加人不同处理因素4 8 h 后， 测 各孔细胞体积。与正常

14、对照组相比， 高糖高胰岛素 组的体积增加了3 0 . 4 %, P 0 . 0 1 ， 与高糖高胰岛素 组相 比， 毗格列酮组 的心肌细胞体积减少 了 1 1 . 4 %, P 0 . 0 1 ， 维拉帕米组与高糖加N E 组相比， 心肌细胞体积减少了8 . 9 %, P 0 . 0 1 ， 差异有显著 性。毗格列酮组与维拉帕米组相对比， 体积减少量 更为明显( P 0 . 0 5 ) 。见T a b 2 0 2 . 3 毗格列酮对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细 胞蛋白合成的影响 将 s H l e u c i n e 与心肌细胞共 T a b 1 E f f e c t s o f p i o

15、 g l i t a z o n e o n t h e c e l l u l a r p rot e i n c o n t e n t o f h y p e r t rop h i c h e a rt c e ll s o f n e o n a t a l r a t s i n d u c e d w it h h i g h g l u c o s e a n d h i g h i n s u l i n ( x t s , n 二 6 ) G ro u p c e l l u l a r p ro t e i n c o n t e n t C o n t rol H i

16、g h g l u c o s e + h i g h i n s u l in H i g h g l u c o s e + h i g h in s u l i n + p i o g l i t a z o n e H i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n + v e r a p a m i l 2 0 . 0 9 12 . 7 4 2 5 . 7 8士3 . 6 1 . 申 2 1 . 3 7士 2 . 6 4 “ “ 0 0 2 4 . 0 7士 2 . 9 2 “ * P 0 . 0 1 v s c o n t r o l ; “

17、 P 0 . 0 5 ， # # P 0 . 0 1 v s h i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n ; 尸 0 . 0 1 “h i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n + v e r a p a m il T a b 2 E f f e c t s o f p i o g l i t a z o n e o n c e l l u l a r v o l u m e o f h y p e r t rop h i c h e a rt c e l l s o f n e o n a t a

18、l r a t s i n d u c e d w i 比 h i g h g l u c o s e a n d h i g h i n s u l i n ( x 士 s , n = 8 0 ) Ce l l u l a r v o l u me G r o u p C o n t rol H i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n H ig h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n + p i o g l i t a z o n e H i g h g l u c o s e + h i g h i n

19、 s u l i n + v e r a p a m i l / u m 3 s i n e l e c e l l 一 I 1 6 2 6 . 5 8 13 8 2. 8 4 2 1 2 1 . 0 6 15 4 6 . 3 2. * 1 8 7 9 . 2 6:09 6 . 5 1 材 1 9 3 2 . 2 8 1 4 7 3 . 8 3 “ * 巾 P 0 . 0 1 v s c o n t r o l ; * * P 0 . 0 1 v s h ig h g l u c o s e + h ig h i n s u l i n ; P 0 . 0 5 v s h i g h g l

20、u c o s e + h i g h i n s u l i n + v e r a p a m i l 同 培养4 8 h 后， 用液闪仪测量各孔细胞与 3 H l e u - c i n e 的结合， 进行蛋白合成的分析。与正常培养的 对照组相比， 高糖高胰岛素组的蛋白合成增加了 4 1 . 4 %, P 0 . 0 1 , 毗 格列酮组的 心肌细胞蛋白 含量 减少了2 2 . 7 %, P 0 . 0 1 ， 差异有显著性， 维拉帕米 组与高糖高胰岛素组相比， 心肌细胞蛋白合成减少 了1 7 . 2 % , P 0 . 0 1 ， 差异有统计学意义。 与维拉帕 米组相对比， 毗格列酮组

21、蛋白合成减少( P 0 . 0 1 ) “ 见 T a b 3 。 T a b 3 E f f e c t s o f p i o g l i t a z o n e o n c e l l u l a r p rot e i n s y n t h e s i s o f h y p e r t rop h i c h e a r t c e l l s o f n e o n a t a l r a t s i n d u c e d w i t h址 曲 g l u c o s e a n d h i g h i n s u l i n ( x 士 : , n = 8 0 ) G ro

22、u p C e l l u l a r p ro t e i n s y n t h e s i s C o n t rol H i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n H i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n + p io g l i t a z o n e H i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n + v e r a p a m i l 1 0 0 3 . 5 4 11 0 7 . 1 9 1 4 1 9 . 0 1 13 9 6 . 7 5.

23、 ， 1 0 9 6 . 8 9 1 5 0 1 . 2 4 “ “ 0 0 1 1 7 4 . 9 4士 4 3 2 . 0 3 “ “ 二P 0 . 0 1 。c o n t ro l ; “ P 0 . 0 1 v s h i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n ; 0 0 P 0 . 0 1 v s h i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n + v e r a p a m i l 2 . 4 毗格列酮对高糖和高胰岛素诱导的肥大心肌 细胞搏动频率的影响各组间分别加人不同处理因 素4 8 h

24、后， 计数心肌细胞搏动频率。与正常对照组 相比， 高糖高胰岛素组心肌细胞搏动频率增加了 9 . 1 %, P 0 . 0 5 ， 与高糖高胰岛素组相比， 毗格列酮 万方数据 8 2 0 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 4 J u 1 ; 2 0 ( 7 ) 组的心肌细胞搏动频率减少了1 3 . 5 %, P 0 . 0 1 ， 差 异具有显著性。维拉帕米组与高糖高胰岛素组相 比， 心肌细胞搏动频率减少了1 1 . 2 %， P 0 . 0 1 ， 差 异有显著性。 见T a b 4

25、 . 测这种作用可能与阻断细胞表面钙离子通道有 关 8 。 抑制搏动频率可减轻心肌细胞能量消耗， 缓 解心衰时能量不足， 对病变的肥大心肌具有保护作 用， 但毗格列酮抑制细胞搏动频率是否与抑制细胞 T a b 4 E f f e c t s o f p i o g l i t a z o n e o n c e l l u l a r p u l s a t i l e f r e q u e n c y o f h y p e r t r o p h i c h e a r t c e ll s o f n e o n a t a l r a t s i n d u c e d w i t

26、h h i g h g l u c o s e a n d h i g h i n s u l i n ( x 1 s , n 二 8 0 ) C e llu la r p u l s a tile f r e q u e n c y 勿626858印 G ro u p C o n t rol H ig h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n H i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l in + p i o g l i t a z o n e H i g h g l u c o s e + h i g h i n

27、s u l i n + v e r a p a m i l 3 5 15 . 2 1 . 0 217 . 3 4中 8 4士 6 . 4 9 林 . 4 0 1 6 . 4 2 “ * 肥大有关， 仍不清楚。 高糖血症是糖尿病的主要临床表现， 而长期高 糖血症常伴随高胰岛素血症的发生。胰岛素抵抗时 的高糖高胰岛素血症可加速糖尿病并发心肌肥大的 出现。毗格列酮能有效抑制高糖高胰岛素诱导的心 肌细胞肥大， 这将有助于阐明毗格列酮在糖尿病心 肌病方面的药理作用及机制， 也有助于其药物性能 的进一步开发。 . * P 0 . 0 1 v s c o n t ro l ; “ “ P 0 . 0 1 v

28、 s h i g h g l u c o s e + h i g h i n s u l i n 3 讨论 实验结果表明， 毗格列酮能减少高糖高胰岛素 诱导的心肌细胞蛋白含量、 蛋白合成及体积增加， 从 而产生抑制心肌细胞肥大的作用。在实验发现， 虽 然维拉帕米对心肌细胞蛋白含量、 体积增加和蛋白 合成也都表现出明显的抑制作用， 但与其相比， 毗格 列酮对心肌细胞肥大的抑制作用更为明显。那么， 毗格列酮是通过那些途径来抑制高糖高胰岛素的心 肌细胞肥大的呢?我们推测如下: 最新研究证明， P P A R ， 依赖途径在抑制心肌肥 大过程中起着绝对重要作用。已知高糖高胰岛素均 可导致胞内C a ，

29、 十 升高6 1 ， 进而通过钙调神经磷酸酶 ( C a N ) ， 使转录活化T细胞的核因子( N F - A T ) 去磷 酸化， 并且N F - A T 3 移位到核心与G A T A 4互相作用 促 进 心 肌 肥大的 发展 。 而毗 格 列酮作为P P A R y 的高亲和配体， 能通过竞争必要辅因子来干扰A P - I , S T A T , N F - A T 3信号途径， 来抑制心肌细胞的肥 大 8 。 此外， 胞内C a t + 升高还可以通过C a N激活 M A P K信号途径， 活化的M A P K可通过转位方式进 人细胞核， 激活其下游底物( 如原癌基因 c - f

30、O S , c - tn y c 等) 的 异常表达， 调 控细胞生长9 。毗 格列酮可 通过P P A R ， 途径抑制其电 压依赖L 型钙电流 to 阻断M A P K信号途径的刺激肥大作用。钙离子拮 抗剂维拉帕米是治疗糖尿病心肌病的临床药物， 在 实验中也有效抑制了心肌细胞的肥大， 主要是通过 抑制细 胞内 钙离子超载发挥作用 伙 与钙离子拮抗 剂维拉帕米相比， 毗格列酮的肥大抑制作用更为突 出， 表明除了阻断钙通道， 毗格列酮另有广泛的作用 方式来抑制心肌肥大。 我们还观察到毗格列酮同维拉帕米一样， 能明 显抑制高糖高胰岛素增强的心肌细胞搏动频率， 推 参考文献: 1 周庆峰， 王洪新

31、， 王桂君， 杨育红. 高糖对去甲肾上腺素诱导 的心肌细胞肥大的促进作用仁 J .中国药理学通报， 2 0 0 3 , 1 9 ( 9 ) ; 1 0 5 4一 7 . 仁 2 洪华山， 林岚， 王一波e t a l胰岛素促进心肌成纤维细胞增 殖和心肌细胞肥大的作用 J .中国病理生理杂志。 2 0 0 2 , 1 8 ( 5 ) ; 5 0 5一 9 . 3 S a k a i S , M i y a u c h i T , I r u k a y a m a - T o m o b e Y e t a l . P e ro x i s o m e p ro - l if e r a t o

32、 r - a c t i v a t e d r e c e p t o r g a m m a a c t i v a t o r s i n h i b i t e n d o t h e l i n 小 re l a t e d c a r d ia c h y p e rt ro p h y i n r a t s 仁 J C l i n S c i , 2 0 0 2 , 1 0 3 ( S u p p l 4 8 ) ; 1 6 一 2 0 . 4 K e ij i Y a m a m o t o , R u r i O h k i , R i c h a r d T L e e

33、e t a l . P e ro x i s o m e p ro - l if e r a t o r - a c t iv a te d re c e p t o r ，a c t iv a t o r s i n h i b i t c a r d i a c h y p e rt ro p h y i n c a r d i a c m y o c y t e s J . C i r c u l a t io n , 2 0 0 1 , 1 0 4 1 6 7 0 一 8 1 . 5 刘海林， 杨少平， 陆汉明. 维拉帕米、 硝苯地平对人成纤维细胞 增殖、 胶原和透明质酸合成的抑制作用

34、【 J .中国药理学通 报， 1 9 9 6 , 1 2 ( 5 ) ; 4 5 6一 8 . 6 W il l i a m s B , T s a i P , S c h r i e r R W . G l u c o s e - i n d u c e d d o w n - re g u la - t io n o f a n g i o t e n s i n a n d a r g i n i n e v a s o p re s s i n re c e p t o re i n c u l t u re d r a t a o rt i c v a s c u l a r s m

35、 o o t h m u s c l e c e l l s J . J C l i n I n v e s t , 1 9 9 2 , 9 0 ( 5 ) : 1 9 9 2一 9 . 7 M o l k e n t i n J D , L u J - R , A n t o s C L e t a l . A c a l c i n e u r i n - d e p e n d e n t t r a n s c r i p t i o n a l p a t h w a y f o r c a r d i a c h y p e rt ro p h y J . C e l l , 1

36、9 9 8 , 9 3 ( 2 ) ; 2 1 5 一 2 8 . 8 R ic o t e M , L i A C , W il l s o n T M e t a l . T h e p e ro x i s o m e p ro l ix - f e r a - to r - a c t i v a t e d re c e p t o r ，i s a n e g a t i v e re g u l a t o r o f m a c ro p h a g e a c t i - v a t i o n J . N a t u r e , 1 9 9 8 , 3 9 1 ( 6 6

37、6 2 ) : 7 9 一 8 2 9 F u l l e r S J , D a v i e s E L , G i l l e s p i e B J e t a l . M i t o g e n - a c t iv a t e d p ro - t e i n k i n a s e p h o s p h a t a s e 1 i n h i b i t s t h e s t i m u la t i o n o f e x p re s s i o n b y h y p e rt ro p h i c a g o n i s t s i n c a r d i a c m

38、y o c y t e s J .B i o c h e m J , 1 9 9 7 ， 3 2 3 ( P t 2 ) : 3 1 3 一 9 . 1 0 D e V o s P , L e f e b v re A M, M i l l e r S G e t a l . T h i a z o l i d i n e d i o n e s r e - p r e s s o b g e n e e x p r e s s i o n i n r o d e n t s v i a a c t i v a t i o n o f p e r o x i s o m e p r o - l

39、 i f e r a t o r s - a c t i v a t e d r e c e p t o r y J . J C l i n I n v e s t , 1 9 9 6 , 9 8 ( 4 ) : 1 0 0 4 一9 . 仁 1 月 张锁龙、 陈日 新， 维拉帕米对心肌细胞肥大的作用仁 J .高血 压杂志， 1 9 9 7 , 5 ( 1 ) : 1 9 一 2 1 . 万方数据 中国药 理学 通报 C h i n e s e P h a r m a c o l o g ic a l B u l le t in 2 0 0 4 J u l ; 2 0 ( 7 ) : 8 2

40、1 - 3 8 2 1 大蒜素对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究 郑燕华， 陈崇宏 ( 福建医科大学药理学教研室， 福建 福州 3 5 0 0 0 4 中国图书分类号: R - 3 3 2 ; R 2 8 4 . 1 ; R 3 2 2 . 1 2 1 ; R 7 4 3 . 3 1 0 . 5 3 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 1 一 1 9 7 8 ( 2 0 0 4 ) 0 7 一 0 8 2 1 一 0 3 摘要: 目的研究大蒜素( a l l i c i n ) 对局灶性脑缺血再灌注损 伤的保护作用及机制。方法采用线栓法制备大鼠大脑中 动脉缺血再灌注模型， 于缺血3

41、 h 再灌注2 4 h 后测定大鼠脑 组织中超氧化物歧化酶( S O D ) 和髓过氧化物酶( M P O ) 的活 性、 丙二醛( M D A ) 、 谷胧甘肤( G S H ) 及血浆中一氧化氮 ( N O ) 含量。结果 大蒜素1 0 , 2 0 m g k g 一 能将S O D活性 从2 0 5 . 8 7 土1 6 . 5 2 分别提高到2 5 9 . 7 7士1 9 . 6 5和2 8 4 . 5 4土 2 1 . 7 9 ， 将 M D A从 3 8 . 6 9土 0 . 1 0分别降至 2 8 . 6 8土1 . 3 7和 2 0 . 9 7 士 0 . 科， 将G S H含

42、量从2 8 . 3 1 土 0 . 6 4 分别提高到3 6 . 1 9 土 1 . 1 2 和4 7 . 9 6 土 0 . 4 4 ， 将N O含量从2 9 . 7 士 0 . 4 9 分别降至 2 7 . 3 8 土 1 . 4 6 和2 3 . 0 0 土 0 . 7 1 ， 将 M P O从0 . 2 9 士 3 . 0 6 x 1 0 一 2 分别降至0 . 2 6 土 2 . 1 3 x 1 0 一 ， 和0 . 2 3 士 7 . 5 2 x 1 0 一 ， 。结论 大蒜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显保护作用， 其 机制可能与提高抗氧化酶活性， 抗脂质过氧化损伤及抗炎作

43、用有关。 关键词: 大蒜素; 脑缺血再灌注损伤; 脂质过氧化; 炎症反应 收稿日 期: 2 0 0 3 - 1 0 - 2 2 ， 修回日 期: 2 0 0 3 - 1 2 - 0 4 基金项目: 福建省自 然科学基金资助项目， N o 9 9 A 0 1 0 作者简介: 郑燕华( 1 9 7 2 一 ) ， 女， 博士生; 陈崇宏( 1 9 4 5 一) ， 男， 教授， 博士生导师， 通讯作者， 研究 方向: 神经药理， T e l ; 0 5 9 1 - 3 5 6 9 3 1 4 , F a x ; 0 5 9 1 - 3 5 7 4 6 5 8 , E - m a i l ; C C

44、 H 2 0 0 0 P 66 . f z . 石 . e n 大蒜素又名大蒜新素， 是从大蒜油中分离出的 有效成分二烯丙基三硫化物。临床上广泛用于治疗 深部真菌、 霉菌感染。有研究表明大蒜素还能抑制 血小板活化聚集， 阻止血栓形成， 能降低脑局灶缺血 大鼠T X B Z 血 浆 含量， 升 高T X B Z / P G I Z 比 值 ( 1 1 ， 但 有 关大蒜素对局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研 究尚未见报道。本研究观察大蒜素在脑缺血再灌注 损伤中的抗氧化抗炎作用。 1 材料与方法 1 . 1药品和试剂大蒜 素注射液 ( 批 号: 0 2 0 9 0 4 1 ) ， 上海禾丰制药有限

45、公司生产， 3 0 m g 支一 ; 生化试剂盒购自 南京建成生物工程研究所; 其 余试剂均为国产分析纯。 1 . 2 仪器 低温高速离心机， L G R 1 6 - W型; 7 2 1 分 光光度计， 上海分析仪器厂; 电热恒温水浴锅， 北京 长安科学仪器厂。 1 . 3 动物分组与给药方法S p r a g u e - D a w l e y 大鼠 5 0 只， a ， 体重2 4 5 一 2 8 0 g ， 由 福建医 科大学动物中 心提供， 自然光照周期饲养， 术前 1 2 h 禁食， 自由饮 E f f e c t s o f p i o g l i t a z o n e o n

46、h y p e r t r o p h i c m y o c a r d i a l c e l l s i n d u c e d w i t h h i g h g l u c o s e a n d h i g h i n s u l i n Z H O U Q i n g - f e n g , WA N G H o n g - x i n ， WA N G Y i - w e i ， S H A N D a n ， F U L i - j u a n ( D e p t o f P a r m a c o l o g y , J i n z h o u M e d i c a l

47、C o l l e g e ， J i n z h o u 1 2 1 0 0 1 , C h i n a ) A b s t r a c t : A i m T o s t u d y t h e e f f e c t s o f p i o g l i t a z o n e o n t h e h y p e rt r o p h i c m y o c a r d i a l c e l l s i n d u c e d w i t h h i g h g l u c o s e a n d h i g h i n s u l i n . Me t h o d s U s i n

48、g c u l t u r e d m y o c a r d i a l c e l l s a s a m o d e l ， T h e p r o t e i n c o n t e n t w a s a s s a y e d w i t h L o w r y s m e t h o d ; T h e c o n t r a c t i n g f r e q u e n - c y w a s c o u n t e d b y t h e i n v e rt e d m i c r o s c o p e ; T h e p r o t e i n s y n t h e

49、 s i s w a s a s s a y e d w i th 3 H l e u c in e in t a k e m e t h - o d ; T h e c a r d i o m y o c y t e s v o l u m e s w a s m e a s u r e d b y c o m - p u t e r p h o t o g r a p h a n a l y s i s s y s t e m; t h e c e l l u l a r h y p e rt ro - p h y w a s o b s e r v e d . R e s u l t s C o m p a r e d w i t h v e r a p a m - i 1 ， P i o g l i t