异基因造血干细胞移植后合并慢性移植物抗宿主病患者T细胞免疫状态的研究.pdf

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1、 临床研究 异基因造血干细胞移植后合并 慢性移植物抗宿主病患者!细胞免疫状态的研究 符粤文“, 吴德沛“ !, 冯宇锋“, 常伟荣“, 朱子玲“, 朱平# (“ $苏州大学附属第一医院 血液科, 江苏苏州# “ % ; * # ; ;! F M 8 ; G F B G JI J K D ? J# “ % 8 8; 8 * ? G F A 8 J P 8 = F :9 : 8 F * D 8 = : G 9 A : (5 A A ? 0 - I 2 !) $ C # + “ * D % ! D 8 9 8 ; F 9 D 0 8 ; : A R A ? ? H ; ? =“ )9 : 8 H,#

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4、G : G G ? * F 0 : G 9 A : ;* + , - .;! 2 / 3 ,;2 . / ( 基金项目: 卫生部科研基金资助项目 (Q T P # 以上。正常 对照为5名供者。 0 1 2 方法所有标本均采自外周血, 用( , = ? # “试 剂提取, !。应用六随机引物和逆转录酶经逆转 录合成/ + !第一条链。 : ,引物设计参见文献 0 。基本原则是根据 ( ,- *2 4个家族基因设计相应的2 4个- *特异 上游引物, 在- 区设计一共用的下游引物, 在- 引物内侧再设计一标记A B C荧光素的- $ A B C引 物, 用于) D E D F / B E。设计(

5、,$链区的一段基因 的引物同时扩增作为内参标。首次: ,扩增的产 物经琼脂糖凝胶电泳分析结果后, 对阳性表达的 - *家族, 再经过- 内侧的A B C荧光素标记的- $ A B C引物进行不对称: ,, 得到一组荧光素标记的 : ,产物。基因扫描分析(细胞克隆性质及计算 - *家族的利用率: 标记荧光的: ,产物与标准品 ) D E D F / B E $ 4 3 3, G H混合变性后, 于: G : 4凝胶中通 过基因分析仪 (. 0 3 3, ! - =) 进行基因扫描,) D E D $ 8 B I I D J K . 1 3应用软件分析产物的长度和荧光强 度。- *家族的利用率可用

6、该家族曲线下的峰面积 占所有家族峰面积的总和的百分比来表示。 0 1 . 统计方法采用 $ 9 6 4 : ? 9 AB 2 0? ? A 6 B 2 A 2 B 6 7 B 9 C 6 B 9 65,5 E / 0 / B 6 *,! “ # $“ U 2 E B 0 9 7 B 2 1 / E 6 Q 2*,= U =, A 9!,J :, ! “ # $“ F 9 7 9 2 3 B 9 1 2 3 G B 9 9 7 6 B 9 3 5 G 7 2 A A 7 A 3 2 E 6 E E 7 9 6 B 2 1K 9 B 8Q 0 6 B C 2 0 E / E G 8 E B 1 9 E 2 6 E 2 9 3B 6 0 Q 2 B B 9 E E / 26 A A K E 0 E / E 2 / 2 3 B1 2 B 2 7 B 9 3 9 3 ? 2 0 9 ? 8 2 0 6 A A 1 *“; 0 9 B 9 E 8* / 0 3 6 A S 6 2 M 6 B A Q D, - V V ),# - $:& # # ( & # $ “ $+ 苏州大学学报 (医学版)- V V %; - % ())

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