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1、2 0 0 9 馨2 胃 第1 7 襁第1 期 牵鬻实验动钫学缀 A C T AL A B O R A T O R I U MA N I M A L I SS C I E N T I AS I N I c A F e b r v a r y ，2 0 0 9 V 0 1 1 7N o 1 子宫内膜异位症动物模型研究进展 席盼艚e 目与) 曩综述进展霉 毽P o 、；盼艚e ；娆 赖秋红，杨兆荣，钱静 ( 扬州大学朦学院，扬州2 2 5 0 0 1 ) 【獠要】 为耩究子富海貘异位症瓣病霞、发病橇篌、治疗稀溪耱对策，嚣簧梅建实验秘粝模鏊。零交逶过分掰 各种模型的优点和缺点，为选择性应用动物模型提
2、供指导，从而更利于对该病的研究。 【关键词】子宫内膜男位症；动物模型；综述 【孛垂分类每lR - 3 3 2【交藏拣谈码l 盍【文章编号l1 0 0 5 - 4 8 4 7 ( 2 0 0 9 ) 0 1 4 3 0 8 0 - 0 3 R e c e n tA d v a n c e si nR e s e a r c ho nA n i m a lM o d e l so fE n d o m e t r i O s i s L A IQ i u - h o n g ，Y A N GZ h a o - r o n g ，Q l 矗嚣J i n g ( M e d i c a lC o l
3、l e g eo fY a n g z h o uU n i v e r s i t y ，Y a n 孕J l o u2 2 5 0 0 1 ，C h i n a ) 【A b s t r a c t 】I no r d e rt oi n v e s t i g a t et h ee t i o p a t h o g e n i s i s ，p a t h o g e n e s i s ，t h e r a p ya n dp r e v e n t i o ns t r a t e g y0 fe n d o m e t r i o s i s ( E 醚) ，i ti sn e
4、 c e s s a r yt oe s t a b l i s ha n i m a lm o d e l s Y n r o u g ha n a l y z i n gt h e 旋v a n t a g e sa n dd i s a d v a n t a g e so fv a r i e sk i n d so fa n i m a l m o d e l s ，t h i sa r t i c l ec K np r o v i d eag u i d a n c ef o ru s i n ga n i m a lm o d e l ss d e e t i v e l y
5、，a n di tw i l lb em o r eb e n e f i c i a lf o ri n v e s t i g a t i o nO H e n d o m e t r i o s i s 【w o r d s 】E n d o m e t r i e s i s ；A n i m a lm o d e l ；R e v i e w 子宫内膜异使症( e n d o m e t f i o s i s ，E M ) 是指具有 生长功麓酶子宫内膜毒瑗予子宫蕴黻羚的部蕴蒸发 生的瘸变。其发病率达l O 一1 5 ，且有逐渐增加 的趋势J 。该病的发病机制仍未完全明确，由予伦 理
6、学等方面魏阗簇，不能够燕接在天豁进行研究，所 以人们不停地在探索能够复制该疾病的模型。动物 模型对内异症研究的结果的意义有至关重要的影 嚏，本文就E M 模黧的研究进展遴嚣综述。 1 实验动物的选择 1 。1 家兔 雌性家兔性周期规律，为刺激性排卵动物，可用 于研究内异症对卵子释放、拾卵、卵予运送的影响。 1 9 2 2 年J a c o b s o n 嚣次建立? 兔的E M 模型，毽爨戆 选用兔进行造模的报道很少，这是由于兔容易发生 感染而死亡导致实验中断。国内有采用新西兰大白 兔梅建E M 动物模螯翡报遘【2 】。 1 2 犬鼠、小鼠 大鼠和小鼠均为啮齿类动物，繁殖力强，性周期 短焉规律
7、。雌性犬藏黠性激素感受性岗，因瑟黠移 【作者简介】赖秋红( 1 9 8 3 一) ，女，研究方向：中西医结合临床 专翌。 遥讯律者】镘静，女，教授，博士生导耀，研究方惠：子富海膜 异位症的中西医结合研究。 植内膜的成活及周期性变化极为有利，建立模型多 选用S D 大鼠或W i s t a r 大鬣，国内外均有提关酶建模 报道，成模率较高，达8 0 9 0 。用小鼠建立E M 动物模型时，使用最多的是免疫缺陷小鼠，包括裸 鼠、S C I D 夺鼠及N O D S C I D 小鼠。操心鼠先灭性无 胸腺，T 淋巴细胞功能缺陷，细胞免疫力低下，但B 细胞功能基本正常，N K 细胞活性较高。国内外均已
8、 焉操鬣成功建模b j 。s C 狲小鬣罴严重联合免疫缺 陷小鼠，为先天性T 、B 淋巴细胞联合免疫缺陷动 ，物，用其进行移植后成活率较裸小鼠高。国外已将 S 懋耠小鬣作为人子宫瘛膜组织的受体凄物。N O D S C I D 小鼠为先天性T 、B 淋巴细胞及部分N K 细胞 联合免疫缺陷动物，较S C I D 小鼠更易于接受人类组 织的移檀。兔疫缺陷小鬣能克服异种阕豹排斥反 应，接受人类难常和肿瘤组织的移植，且种植詹的组 织仍保持原有的组织形态及生化特征；但是出于其 免疫功魏缺陷，不能焉束研究撬体免疫方嚣髓改变， 且不能耐受多次手术和采血检验。大鼠和小鼠都是 周期性地自发排卵，但是子宫内膜不发
9、生脱落，不能 自发性发生嚣麓。 1 3 猕猴、狒狒 猕猴、狒狒皆为非人灵长类动物，成年雌性有正 常冀经瘸期。有文献援道龉】，透过大样本酶观察猕 猴群体，发现猕猴E M 自发性的发展过程及瘸灶形 万方数据 中国实验动物学报2 0 0 9 年2 月第1 7 卷第1 期A e t aL a bA n i t aS c iS i n ，F e b r u a r y ，2 0 0 9 ，V 0 1 1 7 ，N o 1 S 1 态学与人类相同。国内已使用猕猴成功构建E M 动 物模型 6 0 。国外有学者认为狒狒是最理想的子宫内 膜异位症模型。这两种实验动物由于价格昂贵，实 验动物缺乏；其次发病率低，
10、个体差异影响造模的成 功；再而观察周期长，饲养条件要求高，实验费用高， 因而应用受到了限制。 1 4 狨猴 狨猴是种特殊的非人灵长类动物，没有月经周 期。E i n s p a n i e r 等门1 用狨猴诱导E M ，7 2 经过处理的 狨猴产生了E M 。子宫内膜异位症是雌激素依赖性 疾病【8 】，狨猴由于具有高水平的外周雌激素，从而为 这种疾病发病机理的研究提供了诱人的动物模型。 国内目前尚无采用狨猴造模的报道。 1 5 巴马香猪 巴马香猪与人的亲缘关系近，基因组有明显的 同源性，复杂度和结构也十分相似；器官大小、质量 与人相近，便于观察；子宫内膜呈周期性变化，且成 本低，是器官移植和
11、疾病模型的理想材料旧1 。最近 国内用巴马香猪成功构建了子宫内膜异位症动物模 型u 引。由于对该模型的研究还很少，因此目前尚无 其缺点的相关报道。 2 动物模型的构建 2 1 自发性与诱发性动物模型 动物模型按照产生E M 的病因可以分为两类， 一类是自发性动物模型，即指实验动物未经任何有 意识的人工处置，在自然情况下自发形成类似人类 E M 的病灶。另一类是诱发性动物模型，即根据 S a m p s o n 的经血逆流种植学说，通过各种方法将内膜 组织或细胞移植于动物体内，形成E M 病灶。 自发性模型只发生于一些非人灵长类动物，由 于其遗传背景与人类有很多相似，内分泌、月经周期 和解剖结构
12、与妇女有许多相同之处u ，发病机制、 病理学特征与人类内异症相似引，因此被认为是研 究内异症最理想的动物模型。实际上由于上文所述 各种原因，应用非常有限；相比而言，E M 的诱发性 模型种类很多，实验周期短，实验动物来源广泛，价 格较低，适合大样本研究。通过诱发性模型可以监 测早期病灶形成的病理过程，比较不同月经周期内 膜种植能力大小等。诱发性动物模型又可分为异体 移植和自体移植两大类。 2 2 异体移植与自体移植 2 2 1 异体种植：异体移植是将人子宫内膜组织种 植到实验动物体内，可以分以下几种种植方式：不 同月经周期的内膜种植：包括增生期、分泌期、月经 期的内膜。N i s o l l
13、e 等u 3 1 发现不同月经周期的子宫 内膜并不影响裸鼠模型的构建，但形态学观察时无 论取材于增生期还是分泌期，异位病灶都仅表现为 类似增生期的变化。不同类型的移植物：包括人 在位内膜、异位内膜及蜕膜组织。王群华等叫将人 分泌晚期在位子宫内膜及异位内膜分别种植于 N O D S C I D 鼠腹部皮下，结果在位内膜组的成功率高 ( 9 3 7 5 ) ，模型性状显著且稳定；而异位内膜组种 植物切片内未见子宫内膜腺体和间质，仅见增生的 纤维结缔组织。此外，王群华等纠将人流术后的蜕 膜组织种植于N O D S C I D 小鼠皮下，随着种植时间 的延长，内膜腺体和间质的结构无明显改变。纯 化后不
14、同子宫内膜细胞的种植：B e l i a r d 等u 刨将正常 子宫内膜进行分离纯化，得到纯化后的子宫内膜腺 上皮细胞、间质细胞，分别注入小鼠腹腔，结果混合 培养细胞能形成异位病灶，而单独培养的腺细胞或 间质均不能形成异位病灶。说明异位病灶形成需要 内膜组织结构的完整性。G m n u m e r 等1 也观察到只 有在间质细胞丰富、发育良好的地方，腺上皮细胞才 能保持其形态学特征。激素处理：B e l i a r d 等副发 现混合培养细胞未经任何处理种植成功率为2 5 。 种植前用孕激素处理细胞，不影响种植成功率，而用 雌激素处理后成功率提高达6 6 。证明雌激素能 促进异位病灶的形成。
15、H i r a t a 等7 1 也发现补充雌激 素的受体鼠比对照组受体鼠出现更多的异位病灶。 免疫重建E M 模型一人外周血淋巴细胞和子宫内 膜联合移植：子宫内膜异位症患者腹腔液的免疫学 方面的变化与子宫内膜异位症的发生、发展有着密 切的关系，免疫缺陷动物腹腔液与正常动物有所不 同，这对移植的内膜组织的黏附、侵袭、血管形成可 能有直接或间接的影响。因此近来有学者采用人外 周血淋巴细胞和人子宫内膜联合移植到免疫缺陷动 物体内，建立人免疫功能重建E M 模型。该模型具 有人的免疫功能，且种植后的内膜仍保持原有的组 织形态和生化特征，为E M 的研究提供了独特的优 势。 2 2 2 自体种植：自体
16、移植模型有三种类型：子 宫组织块移植法，它是将完整的子宫片段纵形切开 后移植到腹腔建立模型【l 引，成功率较高。子宫内 膜移植法，它是将子宫内膜层与肌层和浆膜层分离。 只种植内膜组织到腹腔 1 引。将子宫体向腹腔内 翻转，使经血逆流入腹腔形成病灶。 自体移植与异体移植成模率无明显差别。异体 种植可保留人类组织的形态学以及黏附、血管形成 等方面的变化，对于研究早期E M 发病机理、药物治 万方数据 中国蜜验动物学报2 0 0 9 年2 月第1 7 卷第1 期A e t a l a bA n i m8 , z iS i n ，F e b r u a r y ，2 0 0 9 ，V 0 1 1 7
17、，N o 1 疗效果等有着重要意义。壶詈异体移檬选用的是免 疫缺陷动物，虽避免了排斥及应，但是会闯接影响腹 腔液中的生长因予及细胞因子，并且啮齿类动物腹 腔渡中是否对所有的薪生抗原都能产擞旁分泌刺激 仍然是一个闻题汹】。免疫重建E M 模型的构建刚弥 补了异体移植中免疫学方面的缺陷。自体移植可用 于磁究瘸灶引起槐体免疫方薅麴改变、药物疗效的 评价和翮反应的观察；但是动物的内膜和人的内膜 毕竟存在系统发生和生化特征方面的较大差异，与 人类疾瘸表现有一定的差异，因此自体移植在动物 体内观察到的组织学特性及生物反应不完全适用予 人类。 2 。3 移植都位豹比较 内膜组织可种植于腹壁、肠系膜、韧带等，
18、也可 种植于皮下，或者剪碎后注入腹腔内。腹腔种植定 位准确，但舞骏操佟复杂、创伤大、出血多，容易造成 黏连、感染，观察和测量病炷都有一定难度。皮下种 植可连续、动态、直观地观察种植灶变化，且有操作 麓单、使予测量的优点，但是不能很好地体现异位病 灶在宿奎体内薛自然生长过程。采用旋下和腹腔褥 种部位同时种植，更能准确反映病变的过程。 2 。4 特殊的蹦动麴模型 将入子宫内膜与编码绿色荧光蛋白( G F P 蛋魏) 的腺病毒孵育后进行种植，通过皮肤可以无创伤地 动态监测异整病姓的形成翻发展。腺病毒可转染 1 5 一4 0 的内膜细胞，细脆表达绿色荧光蛋白可 持续3 周【2 。I - I i r a
19、 t a 等n “ 将一种转基因小鼠G r e e n M i c e ( 戈所不在缝表达G F P 蛋盘) 豹子密内膜种檀挚 同源野艇型小鼠( 不表达G F P 蛋自) 的腹腔中。该 模型病灶与周围宿主组织分界清楚，可找到肉眼难 以辨认妁小病灶，并且可以永远表达G F P ，不会逐灏 衰减。与传统方法相比，此法移植后可以通过非侵 袭性方法进行动态观察。 另外为了中暇药黪研究，还有学者复制出具有 中医“肝郁证”的动物模型嘴】。 参考文献 【1 】葛r e l l s 瓤融a d v a n 懈i n 鞠揪崩e w i t h 蝴鼬洳 g e n e s i s 。m o l o e u l a
20、 rp a t h o l o S y ，a n d 靴j 0 1 吨B s I i ct l 删o r m a t i o J 1 tJ G ”e e o lP a t h o l ，2 0 0 4 ，2 3 ：3 1 1 5 3 2 0 【2 】张文红，郭士菱。溃异止痛燕辩兔子宫内骥髯位症撰型的实 验磷究( J 】。毽莽串西医缝合黎恚，2 0 0 7 ，2 1 ) ：1 4 1 6 。 3 C , m m = e rI t ，S e h w a r 凇F ，B 蛔kK ，耽| 1 P 献t o n e a l 日a d o m e t r l o - 飙v a l i d a t i o
21、no f 触i n - v i v om o d e l J H u mR e p l 口d ，2 0 0 1 ，1 6 ： 1 7 3 6 1 7 4 3 。 幸】歪搿渡，张淑兰，牛慧彦，等入子宫内媵辩位疰撩鼠模狴 的建立及熊、孕激素受体豹表达【J 3 巾国实验动糖学报， 2 0 0 4 ，1 2 ：t 0 1 3 【5 】Z o n d e r v a nK ，c a r d o l IL ，m 榭o s i e 坞1 1 ，e ta 1 删ce p i d e m i o l - 啊o fs p o n l a n e o u se n d o m e t r i o e i , i n
22、t h er l a e s u sm o n k e y J A i mN Y 轰捌S e i ，2 0 0 2 ，9 5 5 ：2 3 3 2 3 8 ， 【6 】宗利丽，事驻里。汪忿纛，等。子宫随膜异位症猕猴模型的 建立 J 第二军医大学学报，2 0 0 3 ，2 3 ：1 0 0 6 1 0 0 9 【7 】l ；n s p a n i e rA ，L i e d e rK ，B r i m sA ，d8 1 I n d u e t i m ao fe n d o m e t r i 0 6 i s i nt km a n n o 献m o n k e y C a l l i t h
23、r i x 扣瘫撼) 【l j ，I , l o l e e | l # “鼬R e - p r o d ，2 0 0 6 ，1 2 ( 5 ) ：2 9 l 一2 9 9 8 C l e o p l mK M ，觚l hM ，D a n i e lC 。e t8 1 1 l a b o o nm o d e lf o rt h es t u d y o fe B d 口n e 一日毹# 【I 】W o m e n # H e a l t h 。2 0 0 7 ，3 ：6 3 7 6 4 6 【9 】罗剐，张舔。翅连生。等我国实验露小型猪静应瘸研究蘸 景【J 实骏动物科学与臀理，2 0 0 4
24、 ，6 ；3 7 3 8 1 0 马玉曩，王琳，孔燕。等。巴马香猪腹腚皮下种植予宫内膜 建立子塞蠹貘舅位痘壤黧戆骚究【I 】。筹三军医夫攀学豢， 2 0 0 8 。3 0 ：5 3 0 5 3 2 1 1 l D i e kJ ，H u b b a r dB ，M a r t i nJ 。e ta 1 R o 树r e v i e wo fb s b o o nw i t h 醚咖l 嘲强玲e o 越e m l e de n d o m e t r i i si n $ 1 8 l 轳# t a b l i d l e de o l o n y 【目。Jl b l e dP r i l m t
25、 o l 。2 0 0 3 。3 2 ：3 9 4 7 1 2 】F 矗2 l e 曩b A T ，B r u 蛔k ，C u r a t e sB ，e ta 1 Am o d i f i d lb a b n m o d e lf o r 嘲d o m 蒯5 J A n nNY 删S e i ，2 0 0 2 ，9 5 5 ：3 0 6 3 1 7 。 1 3 】N i s o l l e 醒，l i I mC F ，D o r m e zJ ，e ta 1 T r a m p l a n t a t i o no fc u l t u r e p l a n t s0 fh u m a
26、n 蛐d o m e t r i u mi n t on u d em i c e JJ H u mR e p r o d ， 2 0 0 0 ，1 5 ：5 7 2 5 7 7 1 毒】壬群华，凌斌，赵至寒，筹建立久予富痞蒺异位纛麓锈模 型的方法举研究 J 】，实用妇产科杂志2 0 0 5 ，2 1 ：4 7 3 4 7 4 1 5 】王群华，酸斌人蜕膜移檬建立N O D S C I I ) 鼠子宫内膜异位 症模型 J 】安徽医科大学学攫，2 0 0 5 ，4 0 ：9 9 1 0 1 。 1 6 】B e l i a r d A N o d t ，G 胡匿nF ，e t i I R o l
27、 e e n d o c r i n eS t a t u s a n d e d l t y p e si nn d h e s i o no fh u m a ne l l d o m e t r i e a le d l st Ot h ep e r i t o n e u mi n n u d e 捌【J f 捌鼬试，2 0 0 2 ，7 8 ：9 7 3 9 7 8 【1 7 】T e t s u y al - I ；Y u t a k ao 。O m a uY ；畦a l 。1 ) e v e l o p m e mo f 熊删- m e n t a lm o d do fe r
28、d o m e t r i o Q i sI 埠i n gm i c et h a tu b i q u i t o u s l ye x p r e s s 霉r e e nf l u o r e s c e n tp r o t e i z l J H l m mR e p r o d u c t i o n ，2 0 0 5 ，2 0 ：2 0 9 2 2 0 。 1 8 曾如辉，罗黼麓+ 许铭炎，等鸯髂予褰移植建立学富海膜 异位症大鼠模型 J 实验动物与比较医学，2 0 0 6 。2 6 ：7 2 一 7 4 【1 9 】霹瓣麦，张鹣，基恚蜂，簿+ 零襄子寨蠹貘异使症壤塑豹建 立及其异
29、位内膜蛋白质的差异表达谱分析( J 】中阑新药杂 志，2 0 0 7 ，1 6 ：5 3 5 5 3 8 2 0 】s t o r rL ，甄岫s “n ，毫ls t d i 档i n 锄d o 触瘟0 5 i s ：童辩柏詈w J 3 I L A R J 。2 0 0 4 ，4 5 ：1 3 2 1 3 8 2 1 l = o r t i nM ，“叫l 砖M ，P a g eM ，e ta 1 A ni m p r o w lm m o d e lf o r m t o m e t a i o e i s 柚l 泖Bn o n i n v u l v ea 联瞎嘲睫眦0 fl e s i o ni m p l a n u a i o na n d d e v e l o p m t J 】，F 8 l i lS t e r l t ，2 0 0 3 ，8 0 ：8 3 2 8 3 8 ， 2 2 】肖纯，黄桂林，刘小剐，等，证、疯结合鹩子宫内膜辫位症动 物模型的黧制 J 中嘲实验动物学杂志，2 0 0 2 ，1 2 “ 1 5 7 一 1 6 0 【簸稿蠢蘩】2 0 0 8 - 0 8 - 2 6 万方数据