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1、2005年第32卷第23期 恶性黑色素瘤血管生成拟态的形态学观察 ! 张诗武郭华张丹芳赵秀兰谷彦军孙保存 天津市肿瘤医院肿瘤研究所病理科(天津市300060) 摘要目的:通过人体石蜡包埋组织切片、动物实验及电镜观察研究血管生成拟态(vasculogenic mimicry VM) 的形态结构及其分布特点。 方法:收集具有VM的恶性黑色素瘤组织进行PAS和CD31重复染色,观察VM的形态 结构及其在肿瘤组织中的分布特点,构建恶性黑色素瘤B16动物模型,将活性炭注入小鼠循环系统内观察VM的结 构,同时使用电镜技术观察VM的超微结构。 结果:PAS阳性而CD31阴性的VM在肿瘤组织中呈片状分布,与内
2、皮 依赖性血管和马赛克血管共同维持肿瘤组织血液供应, 动物实验和电镜观察结果也进一步证实了VM的存在。 结 论:以活性炭作为示踪剂研究B16动物移植瘤组织内VM,表明VM与机体血循环相连通,是肿瘤组织内的功能性微 循环。 作为一种新的肿瘤血液供应模式,VM存在于某些恶性肿瘤组织中,肿瘤细胞可以通过VM获得充足的血 液供应。 关键词恶性黑色素瘤血管生成拟态动物实验透射电镜重复染色 中图分类号:R739.5文献标识码:A文章编号:1000-8179(2005)23-1329-04 “#$ % To study the morphology and distribution of vasculoge
3、nic mimicry in sec- tions of human tumor and animal model with melanoma by immunohistochemical staining and trans- electron microscopy. %$2# The result obtained using active carbon as trace has proved that VM connect with the blood circulation. as the new mode of tumor blood supply, vasculogenic mim
4、icry exists in malignant tumors. The tumor cell can obtain oxygen and nutriment through vasculogenic mimicry. ?$8 2)这 些PAS阳性的图案内可见单行的红细胞串;3)将吲 哚卡因绿注射到葡萄膜黑色素瘤的肘前静脉中,用 共聚焦激光显微镜可观察到各种PAS阳性图案有 吲哚卡因绿存在;4) 当毛细血管通过出芽的方式进 入肿瘤组织内时, 可以在瘤细胞之间见到有漏出的 红细胞, 而VM中基质衬覆的通道内很少看见红细 胞漏出;5) 内皮依赖性微血管中可以见到微血栓的 形成,而VM的PAS阳性图
5、案血管中很少有微血 栓 3,4。 黑色素瘤恶性度高,肿瘤细胞分化程度低,肿瘤 细胞异型性大,瘤细胞中具有多潜能胚胎样基因型, 可表达多种与微管道形成有关的分子基因, 向上皮 和间质两个方向分化并可以分泌基质蛋白, 如PAS 阳性物质、型胶原和CD31阳性物质等5,肿瘤细 胞分泌这些基质相关蛋白可能参与VM形成过程中 的基质重塑6,7。Maniotis等在描述的VM结构包括 一层PAS阳性界膜,但是大量的形态学观察结果表 明:PAS阳性界膜的存在并不是判定VM的主要依 据,一些VM结构中通常无PAS阳性界膜,部分VM 结构中PAS阳性界膜呈断续状、不连续排列。 研究 过程中还发现,VM、马赛克血
6、管(肿瘤细胞与内皮细 胞交错排列,共同构成血管管壁结构)和内皮依赖性 血管共同存在于同一例肿瘤组织中, 共同维持肿瘤 组织的血液供应8。 为了证实VM的存在, 我们构建了恶性黑色素 瘤B16动物模型,在肿瘤直径达1.0cm左右时将活 性炭通过小鼠尾静脉注射进入血液循环,1h后处死 小鼠, 石蜡包埋切片上可见VM结构和内皮依赖性 血管的中央均有多量的活性炭颗粒, 这些颗粒经过 脱福尔马林颗粒和脱黑色素处理后仍然存在证实为 活性炭颗粒;VM中红细胞形态完整,未见细胞坏死 迹象; 构成VM的肿瘤细胞及VM附近的肿瘤细胞 胞浆内也可见到活性炭颗粒, 脱黑色素研究表明肿 瘤细胞胞浆内的颗粒并非是黑色素颗
7、粒;VM几乎 分布广泛,而内皮依赖性血管较少,直径约1.0cm的 肿瘤组织内几乎未见坏死的肿瘤细胞。 上述证据足 以说明:VM是肿瘤组织内的功能性微循环,VM中 央的红细胞来自于小鼠体循环,VM与机体内皮依 赖性血管相通,VM结构并非是出血坏死的肿瘤组 织形成的腔隙,构成VM的肿瘤细胞活力旺盛,具有 较强的吞噬能力, 在较短的时间内吞噬了来自于血 恶性黑色素瘤血管生成拟态的形态学观察1331 中国肿瘤临床2005年第32卷第23期 (上接第1328页) ! !“ #$%!491790 ? . ABCD!%B EF. =4697U/ 1VBCO -. V4#B -. ( !L“!%$B 4U070U U_4? =. -46 Y. dB“$4 6807615 5ABCM!“? G. E!#“$ -(. -4 89/78U/ 8张诗武.高欣.孙保存*血管生成拟态与血管生成及其意义()*国 外医学肿瘤学分册.5XX8.8X:8;4/UX7/U5 . !, 4 $I J$J$I“N. 4 9617960 /X dP4 /U075X/ (“#$%#(%“收稿) (“#$%#)%*“修回) (杨红欣校对) 1332