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主要器材：一次性滴管、打火机、酒精灯、大镊子、中镊子、记号笔、废液缸、封口膜、剪子。主要试剂： PBS、培养液、消化酶（胰酶）、75%酒精、双抗。PBS配制：NaCL :4g KCL:0.1g Na2HPO4 :1.745g KH2PO4 :0.1g 三蒸水：500mL，溶解后高压灭菌。培养基配制：5mL双抗、50mL血清，加入培养基中。细胞复苏步骤：1、 水浴锅打开，调到35.8C37C。2、 打开超净台，放入主要用具，开紫外灭菌30min。（主要器具包含：镊子、离心管、酒精灯、封口膜、一次性滴管、培养瓶、废液缸。）3、 将培养液带入细胞间，瓶上喷酒精，放入超净台，过火，撕封口膜，过火灭菌。4、 用滴管取3ml培养液放入离心管中。5、 从液氮中取出螺口瓶，放入之前开好的水浴锅中迅速融化。6、 快速去细胞间，喷洒酒精灭菌，开盖，将细胞吸出放入离心管中，1000转离心5min。7、 培养瓶中加入5ml培养液，过火灭菌。8、 取出离心管，倒掉培养液，用滴管取1ml培养液冲洗离心好的细胞，移到培养瓶中，轻轻摇匀，显微镜下观察。喷酒精灭菌，放入孵育箱中。整理超净台。