PCR实验室消除污染操作步骤.docx

1、PCR实验室消除污染操作步骤1、物料准备(1)购买喷壶(能够喷出雾状水汽的即可)；(2)购买市面上有效氯消毒片，根据要求配制不同浓度的消毒液，或者购买成品次氯酸钠消毒液配制合适浓度消毒水；(3)购买核酸气溶胶污染清除剂(DNAAWAY原液/MediClean稀释100倍)；(4)无纺布/无尘纸等。任辛舞CP.Mr2、处理方法(1)清理废液缸并且对废液缸用有效氯含量为2000mgL消毒水浸泡消除核酸污染；(2)用有效氯含量为2000mgL消毒水对移液枪进行擦洗，关键部位为移液枪前端易污染部位，清洁干净后用洁净水再擦拭一遍；(3)将离心管架、扩增管架、扩增管架底板、吸嘴盒及其他相关物品用有效氯含量

2、为500mgL的消毒水浸泡2小时后，用清水冲洗干净晾干后使用；（4）对污染区域内的设备如扩增仪、全自动提取仪等，使用核酸气溶胶污染清除剂进行反复处理；对生物安全柜等含有空气过滤系统的设备，需更换过滤网；（5）用有效氯含量为500mgL的消毒液对整个实验室（地板、墙面、天花板、门、窗户等地方）进行清洁，并且用用有效氯含量为1000mgL的消毒水对实验室进行喷雾消毒（重点部位为操作区），有效降解空气中的气溶胶与附着在实验台表面的核酸污染；同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；（6）待污染区域及设备器件清理完成后，常用设备和操作台面使用移动紫外消毒车近距离辐照1小时；实验室内则使用室内紫外灯整晚辐照。步骤（1）-（6）必须坚持每天进行，确保消除实验室污染;紫外消毒实验设备擦拭实验室喷洒废液缸清理通风移液器消毒实验用具消毒3、污染消除判断标准设计阴性对照组，根据阴性对照确认污染情况。可使用敞开后隔夜放置操作区的阴性对照进行实验（在单独的实验室验证），若连续三天阴性对照没有起跳，则说明污染得到控制，可恢复正常实验。当然，为最大程度的降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现，在实验室前期设计及日常实验室管理和操作中，就需要进行合理的规划以及严格执行实验室SOP,把污染的可能性扼杀在摇篮中。