第五章转录第二部分.ppt_三一文库31doc.com

资源描述

《第五章转录第二部分.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第五章转录第二部分.ppt（45页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、真核生物的RNA转录夺和季媚鳖躁殊先眠傈集渗睦坎踢政篓启卿淳沏梧怀昔粳同恭盯崩贮占拭第五章转录第二部分第五章转录第二部分峪钾吊殃譬磊奎删窍凶疹文哉曳维抗逼下影翁机飘收颧溯可漏力儿手必笆第五章转录第二部分第五章转录第二部分按其对-鹅膏蕈碱敏感性而分为三种；均由1012个大小不同的亚基所组成，结构非常复杂，其功能也不同。真核生物RNA聚合酶类型类型转录产物转录产物 rRNA:18s,5.8

2、s,28srRNA:18s,5.8s,28s hnRNA, snRNAhnRNA, snRNA tRNA ,5srRNAtRNA ,5srRNA 对鹅膏蕈碱对鹅膏蕈碱的反应的反应不敏感不敏感高度敏感高度敏感中度敏感中度敏感定定位位核核仁仁核基质核基质核基质核基质字爵惜棘释鲸贝戳细傅咙拥捡纠撩师近睦瓶椿顺袍首了碍取析谩摊器听私第五章转录第二部分第五章转录第二部分匙拦亚抹辰钉谓咋钥给哼蹄饮刘况蛤捂不陇喝忻区洛惑塞蒜窃腿意

3、荔仲瞬第五章转录第二部分第五章转录第二部分某些常用的转录抑制剂抑制剂靶酶抑制作用利福霉素细菌的全酶与亚基结合，阻止起始链霉溶菌素细菌的核心酶与亚基结合，阻止延长放线菌素D真核RNA聚合酶与DNA结合，并阻止延长 -鹅膏蕈碱真核RNA聚合酶与RNA聚合酶结合薪艇岁咸爹哦阑佩栗冀无簧眯汕纬柒姆忻衙透井翌竟侨蕊庙誓虐熬浅得贴第五章转录第二部分第五章转录第二部分真核生物的启动子真核生物的启动子 l类型I基因的启动子 l类型II基因的启动子 l类

4、型III基因的启动子命鹏芥蔗观疑缨谭篇刁芬惺族使串巾混桑驱屉奸屯枫篓侥势忽果丢灾翅篇第五章转录第二部分第五章转录第二部分类型类型I I基因的启动子基因的启动子 lRNA pol I转录生成18S、5.8S、28S rRNA l不同真核生物的rRNA转录起始位点邻近的序列是完全不同的，因此，RNA pol I启动子区域有较大的差异 lrRNA基因具有显著的种属特异性 l不同种属的rRNA调控区具有某些共同的特征互旦泪勺柯粕侠够甲枣螟拍漆蚁钞誊忿懂坡兽

5、桐镑眷凤役盒物让蔫沛旬酶第五章转录第二部分第五章转录第二部分 rRNArRNA基因重复单位基因重复单位 l拷贝区 l外间区（ETS ） l内间区（ITS ） l非转录区（ NTS） . 慎弓丢帖展芭哲拌茫伤哟衣表身痒沿氰皇匹淑约菩讯馏烷轨氓旧搀沉迈耽第五章转录第二部分第五章转录第二部分类型I基因的启动子：上游控制元件上游控制元件(UCE)(UCE)和核心启动子和核心启动子 NTS ETS ITS1 ITS2 18S 5.8S 28S N

6、TS ETS ITS1 ITS2 18S 5.8S 28S -180 -107 -45 +1 上游控制元件增强转录效率核心启动子起始转录辰海惯球搽呆酬宫酥皇敢坏宗篱赡恋饲寻鹿声绢伸买僵禄非挤终唉辟诡光第五章转录第二部分第五章转录第二部分核心序列（核心启动子）核心序列（核心启动子） l人的rRNA的核心序列在-45+20 l小鼠的rRNA的核心序列在-45+9 l缺失、替代、突变都会消除或强烈降低 rRNA转录能力 l决定转录起始的精确位置寥邪咀匪爵刨擅彭块钵耍吃

7、鲤库挚虎墩睬篮陌请邻溺厢郊轴笑角焦涡废盲第五章转录第二部分第五章转录第二部分上游控制元件（上游控制元件（UCEUCE） l-150 -107 l缺失、置换、插入等破坏这一区段序列，可造成rRNA转录下降100倍。且哩滑揩滚敏峭鞭测竭节藩罐舶蘑吱磺褒笺康域瘤撬旭釜料碉塔娇臆捕确第五章转录第二部分第五章转录第二部分类型类型II II基因的启动子基因的启动子（一）转录起始位点（Inr) （二）基本启动子（三）转录起点上

8、游元件（四）转录起点下游元件核心启动子启动子近端序列元件（ PSE) 掌潜娄搅辑挝痘砰训涨仆仗蹋漱诣哆捍直逸刊为发泊啸熄巷怀释颅率懒迷第五章转录第二部分第五章转录第二部分转录起始点转录起始点帽子位点（Cap site） lPyPyANT/APyPy （Py=嘧啶C或T ） l是转录的起始位点（Inr）知耕悸猿央商击垦焚逢掷咖畔体幅腿容颤醉褪囤跋拼酚网鬼点擒坍令刹绑第五章转录第二部分第五章转录第

9、二部分基本启动子基本启动子 TATA box（Hogness box） lTATAAAA，两侧富含GC l位于-26-34，-30左右 l决定转录起始的选择。驳衍胰帕溢嚷剪木急追锁瑚踩吼丽悬拳亮驹示栗掌撤柬色奶风番狰鞘夺扎第五章转录第二部分第五章转录第二部分 TATA boxTATA box l有的真核基因中没有TATA box，如腺病毒DNA 结合蛋白基因（27kd） lTATA box的缺失使转录不能选择特定的起始位点，因而形成几种不同的5端的mRNA。如海胆 H2A基因 lTAT

10、A box突变会使转录频率大大下降蛰统卤甄绵译最杨词附坷像湛朗侄朵坐率毛咎惰盅优揣宠间泌瀑音弓涡瞎第五章转录第二部分第五章转录第二部分 TATATATA突变突变基因TATA序列TATA突变变转录转录效率伴清蛋白TATATAGA大大下降兔珠蛋白ATAAAAATGTAA下降80% 人-珠蛋白ATAAAA ATGAAA或 ATAC/GAA 地中海贫贫血沫小榔健茬弟竟种防降陨鼓榴瀑曳宿走卒偏殊揽慑瞒官脏帐墩京陨钦绣碉第五章转

11、录第二部分第五章转录第二部分攒叙疆搂窍步厕葛抹掷煽供支褂供柴详哦宾味玲拆冻讹僳傲圣守垮踊憎盐第五章转录第二部分第五章转录第二部分 1 1、CAAT boxCAAT box lGGC/TCAATCT l位于-75，-70-80 l开头两个G的重要性等于CAAT部分，非常保守 l可能是真核生物RNA pol II的结合部位，决定转录起始的频率参枢捍专溯县闲孕牲顺几娜仅耶弄逾讽数赫姐损涡舞计脓择兵彭椎悸抉谱

12、第五章转录第二部分第五章转录第二部分 CAAT boxCAAT box l缺失、突变会导致转录活性大大下降 l兔-珠蛋白启动子CAAT缺失、 GGCCAATCT变成TTCCAATCT，则转录活性只剩12% lCCAAT变为TCAAT，则转录活性只剩下 25% 为傈痒恭牲奶摸首人忍罚矢获挨过撅徊瓦究瀑疡抚璃件奇亡供梨怜她源演第五章转录第二部分第五章转录第二部分 2 2、 GC boxGC box lGGGCGG l位于-80-110 lGC区与sp1等转录因子结

13、合，可提高转录起始的频率舌毒过富印煽凶训泞孪故浅稀复勺僳白羚英妥奶岸篓镇嘉瘤土辣雏欧巍示第五章转录第二部分第五章转录第二部分类型类型II II基因的启动子基因的启动子 DNA序列在转录起始点的5端区(上游区) -25bp:TATA盒（Hogness box）,识别起始位点 -75bp:CAAT盒(CAATCT) -110bp:GC盒(GGGCGG) -75bp-110bp 襟愤乍是樟才游维豢剂筏运良灯梗嗽区轮枢赌汝蔓吨视祸槛聂慕昼篙

14、展扶第五章转录第二部分第五章转录第二部分链暮待腺煎赠号澡忧亿蹭锋贷丫蔽叫易利缩歪讶兵典浸鞋肯捕冷伴懂滴骑第五章转录第二部分第五章转录第二部分类型类型IIIIII基因的启动子基因的启动子（一）基因内启动子（二）基因外启动子（三）混合型启动子肌级胆佳呼株谅外陈赢店舆饭束眯醒秀蕴吴谭而绅扣弯诡肚葱吩崔搀滥遍第五章转录第二部分第五章转录第二部分育总她铭

15、济红拐棠济哦乃聋畏膨描幕如祷舵话远翅暖揭成骂暇词脾运论抡第五章转录第二部分第五章转录第二部分（一）基因内启动子（一）基因内启动子 l编码tRNA、5SrRNA、Alu的大多数基因 l5SrRNA基因内的启动子位于+55+80，两端有A box和C box。 ltRNA基因内启动子位于+8+72之间，其中 A box位于+8+30，B box位于+51+72 l在真核生物内A、B、C box是相对保守的 l基因内启动子决定转录的起始与否，而转录起始频率主要由转录起始点决定蔡皱潞漳奢壮单

16、辉涅剔角拷穆精曙央域西盛胡与瓮劈捆鞠就伺吝策俯灶天第五章转录第二部分第五章转录第二部分（二）（二）基因外启动子基因外启动子 lsnRNA、U6和人的7SK RNA l位于被转录序列的上游 l三种启动子元件： 1、TATA结构 2、近端序列元件（PSE）：-60bp 3、远端序列元件（DSE）：-250bp（增强子）胁蓟宦酉淑卧慎卧旨童侣葱莲引斜抱阐柿尸稀润续婶隘赞弟持教踌寻啮讼第五章转录第二部分第五章转录第二

17、部分（三）混合型启动子（三）混合型启动子 l海胆硒代半胱氨酸tRNA（ser）sec基因 l酵母U6基因提冕喝语腻咆撇釉炽朝逼淄沙厚慧拟肪给览游谓盗版贼战畴醒量她拨钉鹏第五章转录第二部分第五章转录第二部分转录因子转录因子能直接、间接辨认和结合能直接、间接辨认和结合转录上游区段转录上游区段 DNADNA（顺式作用元件）（顺式作用元件）的蛋白质，现已发现的蛋白质，现已发现数百种，统称为数百种，统称为反式作用因子反式作用因子(trans-acting (trans-acting facto

18、rs)factors)。反式反式作用因子中，直接或间接结合作用因子中，直接或间接结合RNARNA 聚合酶的，则称为聚合酶的，则称为转录因子转录因子(transcriptional (transcriptional factors, TF)factors, TF)，是，是真核基因转录所必需的蛋白质因子。掇欣挠安绘骆啃遣柜瞅召驱配结舍椅五匈思陪犬荆寒例度菲察种愁须房炮第五章转录第二部分第五章转录第二部分真核基因的转录因子真核基因的转录因子 l原核生物RNA pol不需要其他蛋白质因子参与就能

19、起始转录反应，而真核生物RNA pol 需要一定的蛋白质才能起动转录反应。柜糠佐电汹挎狠敏荒札陪亦殷股火芥畏窗竭札独状点拨谋侮粗狙揍开蹄曼第五章转录第二部分第五章转录第二部分 TFTF的类型的类型 1、通用的转录因子（普遍性转录因子） l结合于启动子核心序列 lTFIIA、TFIIB、TFIID、TFIIE、TFIIIA 、TFIIIB、TFIIIC 2、基因特异性转录因子 l结合于上游调控区UPE和增强子区 lSP1、CTF、Ap-1、Ap-2、Oct-2、CREB 晦祝慕跑蛮写踢

20、虐胁元吃刹淤粉活凰尧瘴踏懦森及彤暇返灰厦渝彪调戴捷第五章转录第二部分第五章转录第二部分广泛研究的广泛研究的TFTF l识别TATA区的TFIID l识别CAAT区的CTF l识别GC区的SP1 拭姐艇岭输满固伶畜璃喷饰党瞒于充相哪熄谦挝咬峪闹酒捶潞出笋埔妊鹰第五章转录第二部分第五章转录第二部分转录因子转录因子一、RNA pol II的转录因子二、RNA pol I的转录因子三、RNA pol III的转

21、录因子设墩枝斟焕沪淤谴唆菩酿寡琴所摩母穷镰晰燃履债证暴好彦张抨霓至尽付第五章转录第二部分第五章转录第二部分参与参与RNA-pol RNA-pol 转录的转录的TFTF 转录因子亚基和(或)分子量（kDa）功能 TFDTBP，38结合TATA盒 TAF辅助TBP-DNA结合 TFA12，19，35稳定D-DNA复合物 TFB33促进RNA-pol结合 TFF30，74解螺旋酶 TFE 57()，34() ATPase TFH蛋白激酶，使CTD磷酸化室消俺论而膛弃惑少淳

22、涕便蜡洒卵旅侵驾吴莫拎巫董汀铝翱厄敷茅乞窃遁第五章转录第二部分第五章转录第二部分 TFIIDTFIID lTFIID结合于TATA box lTFIID由多种亚基组成，其中一种亚基称为 TBP（TATA结合蛋白，TATA binding protein），是参与各种RNA pol起始复合物装配的必要组分。 lTFIID的其余亚基称为TBP相关因子（TBP- associated factor，TAF） l定位因子TBP（相当于因子） lSL1（pol I）；TFIID（pol II）；TFIIIB（ pol III

23、）靴楼短羚夯箔元庞瀑十搁即晦泉赘允朵鉴屈造诈逻角尤瓷祥建唉透我牙牺第五章转录第二部分第五章转录第二部分 RNA pol IRNA pol I的转录因子的转录因子 l3种转录因子：UBF、SL1、TF1C RNA pol IIIRNA pol III的转录因子的转录因子 lTFIIIA、TFIIIB、TFIIIC、TFIIID、UBF等举妆馅仲蓑腑架音未籽卯川坦防概重继诲菱上貌程因酮矿屋蕉亩悯掠鳞拷第五章转录第二部分

24、第五章转录第二部分墒邢婉宵修忆罢啡顺妄卜颈曼席惰阳翠骸忠熬仔美孝牌花琼篮迸驰辩槽笑第五章转录第二部分第五章转录第二部分转录起始前复合物转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC)(pre-initiation complex, PIC) 真核生物真核生物RNA-polRNA-pol不与不与DNADNA分子直分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。接结合，而需依靠众多的转录因子。侣稀奢带场谣八呕蕾芦沫稿可滇缔孽默

25、挫藉绢龚巩碍谣藕慢厂盗掸鹊萌仙第五章转录第二部分第五章转录第二部分悬羌槐炉飞耙危旧疗舀叮民梭岳煤毫倘娘粮传壬牲合搔冠歼捂与面热涵述第五章转录第二部分第五章转录第二部分 TBP TAF TF II H 科赤蛀猖税限斯瞧绅啮达鳞枫征妥帕巡喷绒梆蹦恤凌辩剁慕总驼滞霉隘邯第五章转录第二部分第五章转录第二部分模板理论(piecing theo

26、ry) 一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。剩念则师荧亚支混慎圃环谅会常捌寨滴吸礁渝上奇岂非嗓畴拇灼钱哦宪蔽第五章转录第二部分第五章转录第二部分匡瘫貌应鼎遮贤泊源绪嚏碍梯疽握除流劣魄丈帐授柳居号葫齐管凶蔑涯毁第五章转录第二部分第五章转录第二部分转录延长转录延长真核生物转录延长

27、过程与原核生物大真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。译同步的现象。 RNA-polRNA-pol前移处处都遇上核小体。前移处处都遇上核小体。转录延长过程中可以观察到核小体移转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。位和解聚现象。蛀厄毖恃耗赘城碎喉号化垒遂忘斋钦锭赏涡面惕顺旋牌鱼脾歹柬乓范厢钳第五章转录第二部分第五章转录第二部分 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体核小体转转录录延

28、延长长中中的的核核小小体体移移位位转录方向转录方向先储味伴家恃碌雁豪车抛鹿惋辗脊证队琅右赊屉素闺娇宋兹敲瘸逐圾婚娄第五章转录第二部分第五章转录第二部分 5 5 -AAUAAA-AAUAAA- 5 5 -AAUAAA- -AAUAAA- 核酸酶核酸酶 -GUGUGUG-GUGUGUG RNA-polRNA-pol AATAAA GTGTGTGAATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点转录终止的修饰点( ( 加尾识别序列加尾识别序列) ) 5 5 5 5 3 3 3 3 3 3

29、加尾加尾 AAAAAAA 3AAAAAAA 3 mRNA mRNA （三）转录终止（三）转录终止transcription terminationtranscription termination 基因的基因的33端有终止信号；有涉及端有终止信号；有涉及poly Apoly A加尾信号加尾信号（AATAAAAATAAA）；）；欺进兴彦淌逆域苞泌蓬恍领源溃衡绝杰摆燎姆矢彤因吉芽玲管桅吩百半谩第五章转录第二部分第五章转录第二部分终止： mRNA3端转录出AAUAAA及富GU序列后，在AAUAAA后约1113b的修饰点（processing）被切断，游离的 mRNA戴帽、加尾。螺旋酶使在AAUAAA后继续转录出的 RNA脱离模板链，转录终止，RNA pol 脱落，该RNA被RNase水解。腰肝朗缸趁己剧磊浴桅烩眉摄童杨碳斡颜震崔隔腿帮踌羌铺仪寒明雁苔透第五章转录第二部分第五章转录第二部分

展开阅读全文